镍纹蛋白用于治疗异常性疼痛、痛觉过敏、自发性疼痛和幻痛的用途制造技术

本发明专利技术涉及使用镍纹蛋白治疗异常性疼痛(allodynia)、痛觉过敏(hyperagesia)自发性疼痛(spontaneous pain)和幻痛(phantom pain)。在一个优选实施方案中，要治疗的异常是异常性疼痛和痛觉过敏，更优选地异常性疼痛，包括热和触觉异常性疼痛。

【技术实现步骤摘要】
镍纹蛋白用于治疗异常性疼痛、痛觉过敏、自发性疼痛和幻痛的用途本专利技术是基于申请日为2011年9月30日，申请号为“201180058044.4”(国际申请号为PCT/DK2011/050369)，专利技术名称为“镍纹蛋白用于治疗异常性疼痛、痛觉过敏、自发性疼痛和幻痛的用途”的专利申请的分案申请。本文援引并入在专利申请或在本专利申请中所引用的全部专利和非专利参考文献的全部内容。本申请要求获得US61/390,791的利益，其于2010年10月7日提出申请，本文援引并入其内容。专利
本专利技术涉及使用镍纹蛋白治疗异常性疼痛、痛觉过敏、自发性疼痛和幻痛。在一个优选实施方案中，要治疗的病症是异常性疼痛和痛觉过敏，更优选地为异常性疼痛，包括温度和触觉异常性疼痛。在另一个优选实施方案中，异常是温度痛觉过敏。专利技术背景已经探索了多种疗法治疗异常性疼痛、痛觉过敏、自发性疼痛和幻痛，取得了不同程度的成功，这些疗法包括非甾体抗炎药物(NSAIDs)、阿片类药物、抗惊厥剂、抗心律不齐药、三环类抗抑郁药和外用剂。替代性的手段包括麻醉阻滞、硬膜外施用类固醇和神经外科损伤(neurosurgicallesion)。然而，所有当前的治疗对大多数患者仅具有不太高的效力，仅是缓解性而非治愈性的，并且其副作用导致了显著的限制。因此，对有效治疗异常性疼痛、痛觉过敏、自发性疼痛和幻痛，优选地仅具有微小副作用、不会影响患者的一般健康的疗法存在高度的需求，没有得到满足。专利技术概要本专利技术提供了用于治疗异常性疼痛、痛觉过敏、自发性疼痛和幻痛的方法。该方法使用镍纹蛋白(Meteorin)，编码镍纹蛋白的核苷酸序列，含有编码镍纹蛋白的核苷酸序列的表达载体，用编码镍纹蛋白的表达载体转化和/或转染的细胞系，或输送分泌型镍纹蛋白的生物相容性胶囊。因此，在第一个方面中，本专利技术涉及一种用于治疗异常性疼痛、痛觉过敏、自发性疼痛和幻痛的方法的分离的多肽，所述多肽包括选自下组的氨基酸序列：i.SEQIDNO:3的氨基酸序列；ii.SEQIDNO:3氨基酸序列的生物活性序列变体，其中该变体与SEQIDNO:3具有至少70％序列同一性；和iii.i)或ii)的至少50个连续氨基酸的生物活性片段，其中该片段与SEQIDNO:3至少70％同一。本专利技术人发现，镍纹蛋白能够减轻温度和机械性异常性疼痛和自发性疼痛动物模型(承重不足(Weightbearingdeficit))中的异常性疼痛。重要的是，动物在整个实验期间没有经历任何体重减轻或毒性表现，并且没有观察到疼痛副作用。在数种不同的异常性疼痛和自发性疼痛模型中，同时使用全身性(皮下)和局部(鞘内)给药，均独立观察到阳性效果。在一个进一步的方面中，本专利技术涉及一种用于治疗异常性疼痛、痛觉过敏、自发性疼痛和幻痛的方法的分离的核酸分子，所述核酸分子包括编码多肽的核酸序列，所述多肽包含选自下组的氨基酸序列：i.SEQIDNO:3的氨基酸序列；ii.SEQIDNO:3氨基酸序列的生物活性序列变体，其中该变体与SEQIDNO:3具有至少70％序列同一性；和iii.i)或ii)的至少50个连续氨基酸的生物活性片段，其中该片段与SEQIDNO:3至少70％同一。在一个进一步的方面中，本专利技术涉及一种用于治疗异常性疼痛、痛觉过敏、自发性疼痛和/或幻痛的方法的表达载体，其包含本专利技术的核酸分子。在更进一步的方面中，本专利技术涉及一种用于治疗异常性疼痛、痛觉过敏、自发性疼痛和/或幻痛的方法的分离的宿主细胞，其包含根据本专利技术的表达载体。特别地，本专利技术涉及可以用于基于细胞的疗法(基于裸细胞的疗法或者基于包囊细胞的疗法)的宿主细胞，用于治疗异常性疼痛、痛觉过敏、自发性疼痛和/或幻痛的方法。在一个进一步的方面中，本专利技术涉及一种可植入生物相容性胶囊，其用于通过向受试者输送分泌型的生物活性镍纹蛋白来治疗异常性疼痛、痛觉过敏、自发性疼痛和/或幻痛的方法，所述胶囊包含：i.生物相容性外膜和内核，ii.所述内核包含根据本专利技术的细胞，iii.所述细胞包含根据本专利技术的载体。在一个进一步的方面中，本专利技术涉及一种组合物，包含：i.根据本专利技术的分离的多肽；或ii.根据本专利技术的分离的核酸；或iii.根据本专利技术的表达载体；或iv.根据本专利技术的细胞系；或v.根据本专利技术的可植入生物相容性胶囊；用于治疗异常性疼痛、痛觉过敏、自发性疼痛和/或幻痛的方法。在进一步的方面中，本专利技术涉及：i.根据本专利技术的分离的多肽；ii.根据本专利技术的分离的核酸；iii.根据本专利技术的表达载体；iv.根据本专利技术的细胞系；和v.根据本专利技术的可植入生物相容性胶囊；在制造用于治疗异常性疼痛、痛觉过敏、自发性疼痛和/或幻痛的药物中的用途。在进一步的方面中，本专利技术涉及用于治疗受试者中的异常性疼痛、痛觉过敏、自发性疼痛和/或幻痛的方法，包括向有需要的所述受试者施用治疗有效量的根据本专利技术的分离的多肽。附图简述图1.对坐骨神经损伤后弗莱毛(vonFreyhairs)机械刺激的同侧后足爪缩回阈值(Ipsilateralhindpawwithdrawalthreshold)。注意，镍纹蛋白处理剂量依赖地减轻了机械性异常性疼痛。箭头指示处理时间点。数据表达为平均值±SEM，评分是盲评的。*p<0.05。图2.对坐骨神经损伤后冷刺激的同侧后足爪响应打分。0是没有响应，1是相应于正常大鼠中见到的类似惊吓的响应，而2和3指示轻微和严重的疼痛反应。注意，镍纹蛋白处理剂量依赖性地减轻了冷异常性疼痛。箭头指示处理时间点。评分是盲评的，且数据表达为平均值±SEM。*p<0.05。图3.坐骨神经损伤大鼠的体重变化。所有动物在整个研究期间均正常增重。箭头指示处理时间点。评分是盲评的，并且数据表达为平均值±SEM。*p<0.05。图4.CCI(慢性压迫损伤)后大鼠的承重不足。使用双足平衡测痛仪(incapacitancemeter)来评估每个后肢施加的下向力(downwardforce)。手术之前，没有不足，因为所有动物在两个后肢上承载相等的重量。12天后，在处理即将开始之前，与同侧肢相比，对侧肢多承受了～50g。注意，镍纹蛋白处理减轻了承重不足。评分是盲评的，并且数据表达为平均值±SEM。*p<0.05。图5.CCI大鼠的体重变化。所有动物在整个研究期间均正常增重。箭头指示处理时间点。评分是盲评的，并且数据表达为平均值±SEM。*p<0.05。图6.镍纹蛋白的CLUSTALW(1.82)多序列比对。图6a.人(SEQIDNO2),大鼠(SEQIDNO9),和小鼠(SEQIDNO5)的镍纹蛋白前体的比对。图6b.人(SEQIDNO3),大鼠(SEQIDNO10),和小鼠(SEQIDNO6)的成熟镍纹蛋白的比对。图6c.成熟镍纹蛋白，从人、小鼠和大鼠序列中完全保守的残基生成的共有序列(SEQIDNO11)。X代表由DNA编码的21种天然出现的氨基酸的任一种。图7.镍纹蛋白对CCI大鼠中机械超敏感性的效果。箭头指示处理天数，其中动物全身性注射0.1mg/kg,0.5mg/kg或1.8mg/kg重组镍纹蛋白或者作为阴性对照的溶媒。使用弗莱毛检查大鼠的伤害感受(nociception)改变，数据表达本文档来自技高网...

【技术保护点】
分离的多肽用于制备药物的用途，其中所述药物用于在治疗异常性疼痛、痛觉过敏、自发性疼痛和/或幻痛的方法中使用，所述多肽包含选自下组的氨基酸序列：i.SEQ ID NO:3的氨基酸序列；ii.SEQ ID NO:3的氨基酸序列的生物活性序列变体，其中该变体与SEQ ID NO:3有至少90％序列同一性。

【技术特征摘要】
2010.10.01 DK PA201070423;2010.10.07 US 61/390,7911.分离的多肽用于制备药物的用途，其中所述药物用于在治疗异常性疼痛、痛觉过敏、自发性疼痛和/或幻痛的方法中使用，所述多肽包含选自下组的氨基酸序列：i.SEQIDNO:3的氨基酸序列；ii.SEQIDNO:3的氨基酸序列的生物活性序列变体，其中该变体与SEQIDNO:3有至少90％序列同一性。2.权利要求1的用途，其中所述多肽与具有SEQIDNO:3的序列的蛋白质有至少95％序列同一性。3.根据前述权利要求中任一项的用途，其中该神经营养性多肽包含SEQIDNO...

【专利技术属性】
技术研发人员：TE约翰森，LU瓦尔伯格，JR乔根森，
申请(专利权)人：霍巴治疗公司，
类型：发明
国别省市：丹麦,DK