【技术实现步骤摘要】
小分子化合物组合及利用该小分子化合物组合诱导分化的细胞制备血管平滑肌细胞的方法
本专利技术涉及细胞生物学,组织工程和再生医学领域,尤其涉及一种小分子化合物组合及利用该小分子化合物组合诱导分化的细胞制备血管平滑肌细胞的方法。
技术介绍
由于创伤、心血管疾病、器官移植、血液透析患者群体数量庞大,且自体血管具有不可替代性,同种异体血管具有来源有限、存在疾病传播风险与免疫排斥反应等原因,临床对血管替代物需求巨大。血管替代物按支架材料可分为高分子聚合物与生物材料2类。血管替代物需具有良好的强度、韧性、顺应性、不渗血、组织相容性,以及正常血管的其它生物学功能。脱细胞基质人工血管替代物已成为当前及今后的主流发展方向。脱细胞基质人工血管替代物需要大量血管平滑肌种子细胞以提供细胞外基质蛋白。传统应用的种子细胞主要来源于异种采集、同种异体捐赠、成体干细胞定向诱导、EC/IPS定向诱导,但存在来源有限、获取过程复杂、细胞纯度低、具有免疫原性或致瘤风险等问题,因而应用受限。多种分化的细胞如皮肤成纤维细胞具有来源丰富、易于获取并易于在体外长期大量扩增培养的优点。目前利用细胞转分化技术已经可以把分化的细胞如皮肤成纤维细胞直接诱导为成肌细胞、神经元、肝细胞、成骨细胞等多种不同类型的功能细胞;或先诱导为多能干细胞后,再进一步定向诱导为相应的功能细胞。上述采用细胞转分化技术从某种特定分化的细胞如皮肤成纤维细胞直接或间接诱导获得的功能细胞已经不再保持源细胞的分子特征与功能,但获得了相应目标细胞的典型分子特征与细胞功能。目前,上述诱导性功能细胞已逐渐应用于疾病模型研究、临床治疗研究与组织工程研 ...
【技术保护点】
一种小分子化合物组合,其特征在于,所述小分子组合包括按时序分开使用的第一阶段小分子化合物和第二阶段小分子化合物,所述第一阶段小分子化合物包括DNMT(DNA甲基转移酶)抑制剂和赖氨酸脱乙酰基酶(Lysine deacetylases inhibitors,KDACIs)抑制剂中的至少一种;所述第二阶段小分子化合物包括WNT/β‑catenin激动剂,cAMP激动剂和TGF‑beta受体抑制剂。
【技术特征摘要】
1.一种小分子化合物组合,其特征在于,所述小分子组合包括按时序分开使用的第一阶段小分子化合物和第二阶段小分子化合物,所述第一阶段小分子化合物包括DNMT(DNA甲基转移酶)抑制剂和赖氨酸脱乙酰基酶(Lysinedeacetylasesinhibitors,KDACIs)抑制剂中的至少一种;所述第二阶段小分子化合物包括WNT/β-catenin激动剂,cAMP激动剂和TGF-beta受体抑制剂。2.如权利要求1所述的小分子化合物组合,其特征在于,所述第二阶段小分子化合物还包括赖氨酸脱乙酰基酶抑制剂,RAR激动剂,DNMT抑制剂,HMT(组蛋白甲基转移酶)抑制剂,PKC抑制剂,ascorbate(抗坏血酸),JNK抑制剂,ROCK抑制剂和组蛋白去甲基化酶抑制剂中的至少一种。3.如权利要求2所述的小分子化合物组合,其特征在于,所述赖氨酸脱乙酰基酶抑制剂包括sodiumphenylbutyrate,butyrate,sodiumbutyrate(NaB),MC1568,CI994(Tacedinaline),chidamide,CAY10683(SantacruzaMateA),CUDC-907,M344(HistoneDeacetylaseInhibitorIII),LAQ824(NVP-LAQ824,Dacinostat),Pracinostat(SB939),VPA,Scriptaid,Apicidin,LBH-589(Panobinostat),MS-275,SAHA(Vorinostat),Trichostatin(TSA),PsammaplinA,PCI-24781(Abexinostat),Rocilinostat(ACY-1215),Mocetinostat(MGCD0103),4-Phenylbutyrate(4PB),splitomicin,SRT1720,resveratrol,Sirtinol,APHA,CI-994,Depudecin,FK-228,HC-Toxin,ITF-2357(Givinostat),Chidamide,RGFP966,PHOB,BG45,NexturastatA,TMP269,CAY10603,MGCD-0103,Niltubacin,PXD-101(Belinostat),Pyroxamide,Tubacin,EX-527,BATCP,Cambinol,MOCPAC,PTACH,MC1568,NCH51和TC-H106中的至少一种;所述TGF-β受体抑制剂包括616452,LY2109761,Pirfenidone,Repsox(E-616452),SB431542,A77-01,Tranilast,Galunisertib(LY2157299),A8301,GW788388,ITD-1,SD208,SB525334,LY364947,ASP3029,D4476和SB505124中的至少一种;所述PKC抑制剂包括Go6983,Ro31-8220Mesylate,Go6976和BisindolylmaleimideI(GF109203X)中的至少一种;所述WNT/β-catenin激动剂包括MAY-262611,CHIR98014,CHIR99021,LiCl,Li2CO3,TD114-2,AZD2858,AZD1080,BIO,Kenpaullone,TWS119,LY2090314,CBM1078,SB216763和AR-A014418中的至少一种;所述cAMP激动剂包括EPAC/RAP1激动剂,8-Bromo-cAMP,Dibutyryl-Camp和Sp-8-Br-cAMPs中的至少一种;所述EPAC/RAP1激动剂包括Forskolin,IBMX,ProstaglandinE2(PGE2),NKH477,8-pCPT-2′-O-Me-cAMP,GSK256066,Apremilast(CC-10004),Roflumilast,Cilomilast,Rolipram和Milrinone中的至少一种;所述RAR激动剂包括TTNPB,Bexarotene,Ch55,Tamibarotene,Retinol,AM580,ATRA,13-cisRA,VitaminA及VitaminA衍生物中的至少一种;所述ROCK抑制剂包括Y-27632,Y-276322HCl,Thiazovivin,Ripasudil(K-115),Fasudil,Fasudil(HA-1077)HCl,GSK429286A,RKI-1447和PKI-1313中的至少一种;所述JNK抑制剂包括SP600125,JNKInhibitorIX,AS601245,AS602801和JNK-IN-8中的至少一种;所述DNMT抑制剂包括RG108,Thioguanine,5-Aza-2'-deoxycytidine(Decitabine),SGI-1027,Zebularine和5-Azacytidine(AZA)中的至少一种;所述HMT抑制剂包括EPZ004777,EPZ5676,GSK503,BIX01294和SGC0946中的至少一种;所述组蛋白去甲基化酶抑制剂包括parnate(tranylcypromine),Tranylcypromine(2-PCPA)HCl,SP2509,4SC-202,ORY-1001(RG-6016),GSKJ1和GSK-LSD1中的至少一种。4.如权利要求2所述的小分子化合物组合,其特征在于,所述小分子化合物组合为选自下述第一阶段小分子化合物的任一项和第二阶段小分子化合物的任一项的时序性小分子化合物组合,所述时序性小分子化合物组合所属的小分子化合物必须按一定的时序与相应的细胞或细胞产物接触;所述第一阶段小分子化合物采用下列任一项:5-aza-2-deoxycytidine;RG108;TSA;NaB;VPA;5-Aza-2'-deoxycytidine+NaB;5-Aza-2'-deoxycytidine+VPA+NaB;5-Aza-2'-deoxycytidine+TSA;5-Aza-2'-deoxycytidine+TSA+VPA;5-Aza-2'-deoxycytidine+VPA;RG108+5-Aza-2'-deoxycytidine;RG108+VPA;RG108+NaB;RG108+VPA+NaB;RG108+TSA;RG108+TSA+VPA;RG108+5-Aza-2'-deoxycytidine+VPA;RG108+5-Aza-2'-deoxycytidine+VPA+NaB;所述第二阶段小分子化合物采用下列任一项:VPA+CHIR99021+Repsox+Forskolin;VPA+CHIR99021+SB431542+Forskolin;BIO+SB431542+Forskolin;CHIR99021+Repsox+Forskolin+Rolipram;CHIR99021+Repsox+Forskolin+Rolipram+SB431542;CHIR99021+SB431542+Forskolin+Rolipram;BIO+SB431542+Forskolin+Rolipram;VPA+CHIR99021+Repsox+Forskolin+NaB;CHIR99021+Repsox+Forskolin+NaB;VPA+BIO+SB431542+Rolipram;BIO+SB431542+Rolipram+SP600125;VPA+BIO+SB431542+Forskolin;VPA+CHIR99021+SB431542+Rolipram;VPA+CHIR99021+Repsox+Forskolin+SP600125;VPA+CHIR99021+Repsox+Forskolin+8-pCPT-2′-O-Me-cAMP;VPA+CHIR99021+Repsox+Forskolin+SB431542;VPA+CHIR99021+SB431542+Forskolin+Tranilast;VPA+CHIR99021+Repsox+Forskolin+SB431...
【专利技术属性】
技术研发人员:胡敏,李燕皎,
申请(专利权)人:云南济慈再生医学研究院有限公司,
类型:发明
国别省市:云南,53
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