人胎盘亚全能干细胞诱导分化为心肌细胞的方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种人胎盘亚全能干细胞诱导分化为心肌细胞的方法，包括如下步骤：将人胎盘亚全能干细胞接种于含有干细胞培养液的24孔板中，待细胞贴壁后，将干细胞培养液去除，再加入心肌细胞培养液，培养28天，每3天换液。干细胞培养液包括：DMEM培养基、羟乙基淀粉、人血清白蛋白、葡萄糖酸钾、苯酚磺酸钠、天门冬氨酸螯合钙、牛磺酸、胎盘生长因子、成纤维细胞因子、谷氨酰胺、转铁蛋白、黄精多糖、北芪多糖、透明质酸。心肌细胞培养液包括：RPMI‑1640培养基，海藻糖、牛磺酸、成纤维生长因子、表皮生长因子、葡萄糖酸钾、天门冬氨酸螯合硒、苯丙氨酸、黄体酮、茶多酚、烟酰胺、人参根粉、首乌藤粉。

【技术实现步骤摘要】
人胎盘亚全能干细胞诱导分化为心肌细胞的方法及其应用
本专利技术涉及生物医药
，尤其涉及人胎盘亚全能干细胞诱导分化为心肌细胞的方法及其应用。
技术介绍
由心肌细胞功能障碍引起的心脏衰竭是世界范围内的一种主要的疾病，心衰患者最终死亡的原因主要是心脏泵血功能丧失或心律不齐。严重的心衰患者一年期死亡率超过50％。虽然晚期患者可以进行心脏移植，然而由于供体器官缺乏，约有20％的病人在等待器官移植的过程中死亡。由于心力衰竭的高发病率和死亡率、移植心脏的死亡、免疫排斥反应等并发症以及移植心脏后期失效等客观现状，亟待发展新的治疗方法以提高心肌细胞的功能，阻止心力衰竭的发生。目前对心力衰竭的治疗方法主要集中于早期血管再生和抑制进一步的心肌细胞损失，而心肌细胞是一种终端分化的细胞，增殖能力极其有限，损失后极难恢复。而心肌细胞移植疗法着重于重建心肌功能，恢复再生心肌组织的泵血能力，也有研究发现注入心脏的心肌细胞能够形成新的心肌组织。但细胞移植治疗关键因素是确定合适的供体细胞类型。因此，如何诱导干细胞定向分化为心肌细胞以用于医药治疗是亟待解决的技术难题。
技术实现思路
基于
技术介绍
存在的技术问题，本专利技术的目的是人胎盘亚全能干细胞诱导分化为心肌细胞的方法及其应用。本专利技术提出的一种人胎盘亚全能干细胞诱导分化为心肌细胞的方法，包括如下步骤：将人胎盘亚全能干细胞以5000细胞/孔接种于含有干细胞培养液的24孔板中，待细胞贴壁后，将干细胞培养液去除，再加入心肌细胞培养液，培养28天，每3天换液。优选地，干细胞培养液包括：DMEM培养基、羟乙基淀粉、人血清白蛋白、葡萄糖酸钾、苯酚磺酸钠、天门冬氨酸螯合钙、牛磺酸、胎盘生长因子、成纤维细胞因子、谷氨酰胺、转铁蛋白、黄精多糖、北芪多糖、透明质酸。优选地，干细胞培养液中，优选地，心肌细胞培养液包括：RPMI-1640培养基，海藻糖、牛磺酸、成纤维生长因子、表皮生长因子、葡萄糖酸钾、天门冬氨酸螯合硒、苯丙氨酸、黄体酮、茶多酚、烟酰胺、人参根粉、首乌藤粉。优选地，心肌细胞培养液中，本专利技术还提出的一种心肌细胞，采用上述人胎盘亚全能干细胞诱导分化为心肌细胞的方法制得。本专利技术还提出的上述心肌细胞用于制备预防或治疗心肌细胞功能障碍疾病的药物组合物。本专利技术能够将人胎盘亚全能干细胞诱导转分化为心肌细胞，所得心肌细胞具有正常心肌细胞特异性分子标签，并且具有正常心肌的功能，为再生医学的细胞来源问题提供一种新的途径。具体实施方式下面，通过具体实施例对本专利技术的技术方案进行详细说明。实施例以下例子在此用于示范本专利技术的优选实施方案。本领域内的技术人员会明白，下述例子中披露的技术代表专利技术人发现的可以用于实施本专利技术的技术，因此可以视为实施本专利技术的优选方案。但是本领域内的技术人员根据本说明书应该明白，这里所公开的特定实施例可以做很多修改，仍然能得到相同的或者类似的结果，而非背离本专利技术的精神或范围。除非另有定义，所有在此使用的技术和科学的术语，和本专利技术所属领域内的技术人员所通常理解的意思相同，在此公开引用及他们引用的材料都将以引用的方式被并入。那些本领域内的技术人员将意识到或者通过常规试验就能了解许多这里所描述的专利技术的特定实施方案的许多等同技术。这些等同将被包含在权利要求书中。实施例1本专利技术提出的一种人胎盘亚全能干细胞诱导分化为心肌细胞的方法，包括如下步骤：将人胎盘亚全能干细胞以5000细胞/孔接种于含有干细胞培养液的24孔板中，待细胞贴壁后，将干细胞培养液去除，再加入心肌细胞培养液，培养28天，每3天换液。干细胞培养液包括：心肌细胞培养液包括：实施例2本专利技术提出的一种人胎盘亚全能干细胞诱导分化为心肌细胞的方法，包括如下步骤：将人胎盘亚全能干细胞以5000细胞/孔接种于含有干细胞培养液的24孔板中，待细胞贴壁后，将干细胞培养液去除，再加入心肌细胞培养液，培养28天，每3天换液。干细胞培养液包括：心肌细胞培养液包括：实施例3本专利技术提出的一种人胎盘亚全能干细胞诱导分化为心肌细胞的方法，包括如下步骤：将人胎盘亚全能干细胞以5000细胞/孔接种于含有干细胞培养液的24孔板中，待细胞贴壁后，将干细胞培养液去除，再加入心肌细胞培养液，培养28天，每3天换液。干细胞培养液包括：心肌细胞培养液包括：在本专利技术提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本专利技术的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本专利技术作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人胎盘亚全能干细胞诱导分化为心肌细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤：将人胎盘亚全能干细胞以5000细胞/孔接种于含有干细胞培养液的24孔板中，待细胞贴壁后，将干细胞培养液去除，再加入心肌细胞培养液，培养28天，每3天换液。

【技术特征摘要】
1.一种人胎盘亚全能干细胞诱导分化为心肌细胞的方法，其特征在于，包括如下步骤：将人胎盘亚全能干细胞以5000细胞/孔接种于含有干细胞培养液的24孔板中，待细胞贴壁后，将干细胞培养液去除，再加入心肌细胞培养液，培养28天，每3天换液。2.根据权利要求1所述人胎盘亚全能干细胞诱导分化为心肌细胞的方法，其特征在于，干细胞培养液包括：DMEM培养基、羟乙基淀粉、人血清白蛋白、葡萄糖酸钾、苯酚磺酸钠、天门冬氨酸螯合钙、牛磺酸、胎盘生长因子、成纤维细胞因子、谷氨酰胺、转铁蛋白、黄精多糖、北芪多糖、透明质酸。3.根据权利要求2所述人胎盘亚全能干细胞诱导分化为心肌细胞的方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵翔，熊雪，孙静，秦连荣，
申请(专利权)人：重庆斯德姆生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆,50