一种催化活性提高的菜豆环氧化物水解酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种催化活性提高的菜豆环氧化物水解酶突变体及其应用，属于基因工程和蛋白质表达领域。本发明专利技术的突变体是在SEQ ID NO.2所示的氨基酸的基础上，将第196位的亮氨酸突变成了天冬氨酸。本发明专利技术摇瓶诱导10h得到的突变酶PvEH1

A mutant of bean epoxide hydrolase enhanced by catalytic activity and its application

The invention discloses a bean bean epoxide hydrolase mutant with improved catalytic activity and its application, belonging to the field of gene engineering and protein expression. The mutant of the present invention is based on the amino acid shown in SEQ ID ID NO.2, which mutated the 196th leucine into aspartic acid. The mutant enzyme PvEH1 obtained by a shake flask of the present invention by 10h

【技术实现步骤摘要】
一种催化活性提高的菜豆环氧化物水解酶突变体及其应用
本专利技术涉及一种催化活性提高的菜豆环氧化物水解酶突变体及其应用，属于基因工程和蛋白质表达领域。
技术介绍
手性环氧化物和邻二醇是合成手性药物、农业、香料及精细化工等行业各种活性物质的中药中间体，具有广阔的应用前景和市场需要求。光活性的手性化合物具有不同于外消旋体的独特性质，其在生物体内的代谢途径、代谢速率、药理以及毒性等方面的差异，时期在化学和生命科学产业有着崭新和特殊的用途。20世纪60年代，震惊世界的“反应停事件”已经充分说明获得光学纯化合物的必要性。传统的化学拆分环氧化物往往需要重金属类毒物质作为催化剂，不仅面临着环境的巨大挑战，且很难获得高产率的手性纯化合物。环氧化物水解酶(epoxidehydrolases,EHs,EC3.3.2.-)能够催化外消旋环氧化物的水解动力学拆分或对映归一性水解，保留单一构型环氧化物或转化为手性邻二醇。是一种典型的α/β折叠型水解酶。EHs具有反应时不需要金属离子和辅酶、来源广泛、对映选择性高等优点，成为一种非常有潜力的生物催化剂，具有较高的研究价值。然而，不同来源的EHs的性质均存在着很大的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种菜豆环氧化物水解酶突变体，其特征在于，所述环氧化物水解酶突变体是：(a)氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白质；(b)在严格条件下与(a)限定的氨基酸序列杂交且编码具有环氧化物水解酶活性的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种菜豆环氧化物水解酶突变体，其特征在于，所述环氧化物水解酶突变体是：(a)氨基酸序列如SEQIDNO.1所示的蛋白质；(b)在严格条件下与(a)限定的氨基酸序列杂交且编码具有环氧化物水解酶活性的氨基酸序列。2.一种编码权利要求1所述的环氧化物水解酶突变体的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列是SEQIDNO.3所示的序列。3.一种获得权利要求1所述的环氧化物水解酶突变体的方法，其特征在于，是在如SEQIDNO.2所示的氨基酸序列基础上，将第196位的亮氨酸突变成了天冬氨酸。4.含有编码权利要求1所述突变体的基因的载体。5.表达权利要求1所述突变体的基因工程菌。6.根据权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：邬敏辰，阚婷婷，苏永君，王婷婷，李剑芳，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32