3-磷酸甘油醛脱氢酶及其多克隆抗体制造技术

本发明专利技术涉及分子生物学领域，尤其涉及一种3‑磷酸甘油醛脱氢酶及其多克隆抗体。3‑磷酸甘油醛脱氢酶的多克隆抗体的制备方法，包括步骤：1)以氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的3‑磷酸甘油醛脱氢酶为抗原，免疫小鼠制备抗血清；2)纯化抗血清得到3‑磷酸甘油醛脱氢酶的多克隆抗体。本发明专利技术利用PCR技术在喜冷杆菌属Cryobacterium中扩增得到3‑磷酸甘油醛脱氢酶基因，并通过基因工程技术得到Ecoli BL21‑pET21a‑GPR重组菌株，诱导表达重组菌株得到3‑磷酸甘油醛脱氢酶蛋白，该蛋白具有较好的低温耐受，而且以3‑磷酸甘油醛脱氢酶为抗原成功得到3‑磷酸甘油醛脱氢酶的多克隆抗体，该多克隆抗体能够准确检测3‑磷酸甘油醛脱氢酶。

3- phosphate glyceraldehyde dehydrogenase and its polyclonal antibody

The invention relates to the field of molecular biology, in particular to a 3 glyceraldehyde dehydrogenase and its polyclonal antibody. The preparation method of polyclonal antibody of 3 phosphate glyceraldehyde dehydrogenase, including steps: 1) the polyclonal antibody of 3 phosphate glyceraldehyde dehydrogenase was obtained by the amino acid sequence, such as the 3 phosphate glyceraldehyde dehydrogenase as the antigen as shown by the amino acid sequence such as SEQ ID No.1, and immunized mice to prepare antiserum; 2) purified antiserum. The invention uses PCR technology to amplify the 3 phosphate glyceraldehyde dehydrogenase gene in the Cryobacterium of the genus coriobacteria, and obtains the recombinant strain of Ecoli BL21 pET21a GPR by gene engineering technology to induce the recombinant strain to obtain the protein of glyceraldehyde dehydrogenase, which is well tolerated at low temperature and 3 The polyclonal antibody of glyceraldehyde dehydrogenase (3) was successfully obtained by the glyceraldehyde dehydrogenase (DH) as antigen. The polyclonal antibody was able to detect the glyceraldehyde dehydrogenase (3) accurately.

【技术实现步骤摘要】
3-磷酸甘油醛脱氢酶及其多克隆抗体
本专利技术涉及分子生物学领域，尤其涉及一种3-磷酸甘油醛脱氢酶及其多克隆抗体。
技术介绍
3-磷酸甘油醛脱氢酶，英文名(Glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase，GAPD)。3-磷酸甘油醛脱氢酶，它可以催化3-磷酸甘油醛氧化(脱氢)和磷酸化，生成1，3-二磷酸甘油酸，是糖代谢的中心环节，故对糖代谢起着重要的作用。3-磷酸甘油醛脱氢酶广布于人体各组织器官，脂肪组织含量较低，肺含酶量约为脂肪组织的10倍，肝、心含量相近，约为脂肪组织的30倍，以骨骼肌、红细胞和肾中的含量最为丰富。急性肝炎、酒精性肝病、肝硬变等可致血清GAPD总活性升高。慢性肾盂肾炎、多发性骨髓病、肺炎、肺气肿等病人血清GAPDA活性呈不同程度的升高。3-磷酸甘油醛脱氢酶的应用前景十分广阔，它是糖代谢的中心环节，对糖代谢起着重要的作用，而对于体内缺乏此酶，糖代谢有问题的病人，通过食用含有此酶的药物，可以使病情得以缓解，治疗。该酶还分布于人体各组织器官故通过对3-磷酸甘油醛脱氢酶的活性检测就可以推断是否患有此类病，对于疾病的预防有着很大作用。提取3-磷本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种3‑磷酸甘油醛脱氢酶，其特征在于：所述3‑磷酸甘油醛脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种3-磷酸甘油醛脱氢酶，其特征在于：所述3-磷酸甘油醛脱氢酶的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。2.一种编码权利要求1所述的3-磷酸甘油醛脱氢酶的基因，其特征在于：所述3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的碱基序列如SEQIDNO.2所示。3.一种3-磷酸甘油醛脱氢酶的多克隆抗体，其特征在于：所述多克隆抗体的抗原为SEQIDNO.1所示氨基酸序列组成的多肽。4.一种制备权利要求3所述的3-磷酸甘油醛脱氢酶的多克隆抗体的方法，其特征在于：包括以下步骤：1)以氨基酸序列如SEQIDNo.1所示的3-磷酸甘油醛脱氢酶为抗原，免疫小鼠制备抗血清；2)纯化抗血清得到3-磷酸甘油醛脱氢酶的多克隆抗体。5.根据权利要求4所述的3-磷酸甘油醛脱氢酶的多克隆抗体的制备方法，其特征在于：所述3-磷酸甘油醛脱氢酶的制备方法为：1.1)利用PCR技术扩增SEQIDNO.2所示的碱基序列；1.2)将SEQIDNO.2所示的碱基序列克隆入载体质粒中，构建3-磷酸甘油醛脱氢酶的表达载体；1.3)将表达载体转化入大肠杆菌感受态菌体中得到重组菌体，依次经扩大培养、诱导表达、收集菌体、破碎菌体和纯化蛋白过程得到3-磷酸甘油醛脱...

【专利技术属性】
技术研发人员：宫春杰，顾昌祺，薛栋升，王崇鞠，胡征，
申请(专利权)人：湖北工业大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42