The invention discloses a grape snRNA U6 gene, its primers and its primers and applications. The present invention has first identified the snRNA U6 gene of grape, and designed the primers for real-time fluorescent quantitative PCR. The experiment proved that the gene and primers can be used for real-time quantitative PCR analysis of grape gene and grape miRNA. The grape snRNA U6 gene is stable and reliable under the condition of grape tissue and cold stress. The snRNA gene U6 gene can be used as the internal reference gene of real-time fluorescent quantitative PCR. The U6 gene is currently recognized as the most suitable internal reference gene for miRNA fluorescence quantitative. The expression results from snRNA U6 as the internal parameter coincide highly with the miRNA sequencing expression spectrum, which is beneficial to the expression analysis of a small amount of miRNA, and the operation is relatively simple. This is low and high sensitivity.
【技术实现步骤摘要】
一种葡萄snRNAU6基因及其引物和应用
本专利技术涉及一种葡萄snRNAU6基因、进行实时荧光定量PCR扩增该基因的引物以及该基因作为葡萄miRNA定量PCR检测的内参基因的应用。
技术介绍
miRNA(MicroRNA)是一类在生物界中广泛存在的小分子非编码单链RNA,长约21~24nt,它能通过降解或抑制互补的靶mRNA来进行转录后基因表达调控,并且在生物的各个发育时期和不同的组织器官中广泛表达,参与到生物的各种生理活动中,因其在生物中的重要性,近几年国内外科学家对miRNA的研究倍加重视。对葡萄miRNA的研究有助于推动葡萄种植业的发展。葡萄中只报导了187条miRNA,对miRNA的定量研究的较少。目前对miRNA的表达分析主要有高通量测序,基因芯片和实时荧光定量PCR法三种。其中,高通量测序和基因芯片法为高通量监测的方法,成本很高,不适于少量miRNA的功能分析,并且需要利用实时荧光定量PCR方法来验证。而基于SYBRGreen染料荧光定量PCR的miRNA相对定量法表达分析有着操作相对简单,成本较低,灵敏度高的优势,广受研究人员的欢迎。在相对定量中, ...
【技术保护点】
一种葡萄snRNA U6 基因,其特征是:其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
【技术特征摘要】
1.一种葡萄snRNAU6基因,其特征是:其核苷酸序列如SEQIDNO:1所示。2.权利要求1所述的葡萄snRNAU6基因作为葡萄miRNA的定量PCR检测的内参基因的应用。3.根据权利要求2所述的应用,其特征是:所述定量PCR检测为实时荧光定量PCR检测。4.扩增权利要求1所述的葡萄snRNAU6基因的引物,其特征是:正向引物:5’GAGACATCCGATAAAATT...
【专利技术属性】
技术研发人员:王鹏飞,任凤山,王咏梅,吴新颖,蒋锡龙,杨立英,
申请(专利权)人:山东省葡萄研究院,
类型:发明
国别省市:山东,37
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