KSP抑制剂与抗B7H3抗体的抗体-活性物质缀合物(ADC)制造技术

本发明专利技术涉及新型结合剂‑活性物质‑缀合物(ADC)、所述ADC的活性代谢物、用于制备所述ADC的方法、所述ADC用于治疗和/或预防疾病的用途以及所述ADC用于制备用于治疗和/或预防疾病（特别是过度增殖性病症和/或血管生成病症(诸如癌症疾病)）的药剂的用途。此类治疗可以作为单一疗法或者与其它药剂或其它治疗措施组合实现。

Antibody active substance conjugates (ADC) of KSP inhibitors and anti B7H3 antibodies

The invention relates to a novel bond active substance conjugate (ADC), the active metabolite of the ADC, a method for preparing the ADC, the use of the ADC for the treatment and / or prevention of the disease, and the ADC for the preparation of the treatment and / or prevention of disease, in particular the hyperproliferative diseases and / or angiogenic diseases. The use of drugs, such as cancer.) Such treatment can be used as a single therapy or combination with other agents or other therapeutic measures.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】KSP抑制剂与抗B7H3抗体的抗体-活性物质缀合物(ADC)引言和现有技术状况本专利技术涉及驱动蛋白纺锤体蛋白抑制剂的结合剂-活性物质-缀合物(ADC)、这些ADC的活性代谢物、制备这些ADC的方法、这些ADC用于治疗和/或预防疾病的用途和这些ADC用于制备治疗和/或预防疾病，特别是过度增生和/或血管生成疾病，例如癌症的药剂的用途。此类治疗可作为单一疗法或另外与其它药剂或其它治疗措施联合实现。癌症是多种多样的组织的不受控细胞生长的后果。在许多情况下，新的细胞渗透到现有组织中(浸润性生长)或它们转移到远端器官中。癌症发生在多种多样的器官中并通常具有组织特异性病程。术语“癌症”作为通用术语因此描述不同器官、组织和细胞类型的大量确定疾病。一些肿瘤在初期可任选通过手术和放射治疗措施除去。转移的肿瘤通常只能用化疗药物姑息治疗。此处的目标是实现改善生活质量和延长寿命的最佳组合。结合剂蛋白与一个或多个活性物质分子的缀合物是已知的，特别是以抗体-药物缀合物(ADC)的形式，其中针对肿瘤相关抗原的内化抗体经接头共价连接至细胞毒性剂。在将ADC引入肿瘤细胞中和该缀合物随后离解后，在肿瘤细胞内释放细胞毒性剂本身或由其形成的细胞毒性代谢物且可在其内直接和选择性展现其作用。以该方式，相比于癌症的传统化疗，可将对正常组织的损伤保持在明显较窄的界限内[参见例如J.M.Lambert,Curr.Opin.Pharmacol.5,543-549(2005);A.M.Wu和P.D.Senter,Nat.Biotechnol.23,1137-1146(2005);P.D.Senter,Curr.Opin.Chem.Biol.13,235-244(2009);L.Ducry和B.Stump,BioconjugateChem.21,5-13(2010)]。因此，WO2012/171020描述了ADC，其中多个毒簇分子经聚合接头连接至抗体。作为可能的毒簇，WO2012/171020尤其提到物质SB743921、SB715992(Ispinesib)、MK-0371、AZD8477、AZ3146和ARRY-520。最后提到的物质是所谓的驱动蛋白纺锤体蛋白抑制剂。驱动蛋白纺锤体蛋白(KSP，也称作Eg5、HsEg5、KNSL1或KIF11)是双极有丝分裂纺锤体发挥作用所必需的驱动蛋白样马达蛋白。KSP的抑制导致有丝分裂阻滞并经相对较长时间导致细胞凋亡(Tao等人,CancerCell2005Jul8(1),39-59)。在发现最早的细胞穿透KSP抑制剂Monastrol后，KSP抑制剂已将它们自身确立为一类新型化疗药物(Mayer等人,Science286:971-974,1999)，且已经是许多专利申请的主题(例如WO2006/044825；WO2006/002236；WO2005/051922；WO2006/060737；WO03/060064；WO03/040979；和WO03/049527)。但是，由于KSP仅在有丝分裂期期间的相对短时期内展现其作用，KSP抑制剂在该期期间必须以足够高的浓度存在。WO2014/151030公开了包括某些KSP抑制剂的ADC。专利技术概述针对该背景，本专利技术的一个目的是提供在以相对低的浓度施用后可展现细胞凋亡作用并因此有益于癌症治疗的物质。为了实现该目标，本专利技术提供糖基化或去糖基化的抗B7H3抗体与下式(I)化合物的缀合物，其中一个或多个式(I)化合物经由接头L连接至抗体。在该情况下，去糖基化的抗体在Fc区的CH2结构域中的保守N-结合位点不具有任何聚糖且因此不结合NK细胞。因此，去糖基化的抗体不支持NK细胞介导的细胞毒性。抗体优选为人类、人源化或嵌合单克隆抗体。特别优选特异性结合B7H3的人类Ig4和/或人类和/或鼠Ig2同种型的抗B7H3抗体，具体地抗B7H3抗体TPP-6497、TPP-6499、TPP-6501、TTP-6502、TPP-6515、TPP-7611、TPP-8382、TPP-8564、TPP-8567、TPP-8322、TPP-8565、TPP-8568、TPP-8748和TPP-8750。式(I)：其中R1代表H、-L-#1、-MOD或-(CH2)0-3Z，其中Z代表-H、-NHY3、-OY3、-SY3、卤素、-CO-NY1Y2或-CO-OY3，其中Y1和Y2彼此独立地代表H、NH2、-(CH2CH2O)0-3-(CH2)0-3Z'(例如-(CH2)0-3Z')或-CH(CH2W)Z'，且Y3代表H或-(CH2)0-3Z'，其中Z'代表H、NH2、SO3H、COOH、-NH-CO-CH2-CH2-CH(NH2)COOH或-(CO-NH-CHY4)1-3COOH，其中W代表H或OH，其中Y4代表任选地被-NHCONH2取代的直链或支化的C1-6烷基，或代表任选地被-NH2取代的芳基或苄基；R2代表H、-MOD、-CO-CHY4-NHY5或-(CH2)0-3Z，其中Z代表-H、卤素、-OY3、-SY3、NHY3、-CO-NY1Y2或-CO-OY3，其中Y1和Y2彼此独立地代表H、NH2或-(CH2)0-3Z'，且Y3代表H或-(CH2)0-3Z'，其中Z'代表H、SO3H、NH2或COOH；其中Y4代表任选地被-NHCONH2取代的直链或支化的C1-6-烷基，或代表任选地被-NH2取代的芳基或苄基，且Y5代表H或-CO-CHY6-NH2，其中Y6代表直链或支化的C1-6-烷基；R4代表H、-L-#1、-SGlys-(CO)0-1-R4’、-CO-CHY4-NHY5或-(CH2)0-3Z，其中SGlys是溶酶体酶可裂解的基团，特别是由二肽或三肽组成的基团，R4'是C1-10-烷基、C5-10-芳基或C6-10-芳烷基、C5-10-杂烷基、C1-10-烷基-O-C6-10-芳基、C5-10-杂环烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂芳基烷氧基、C1-10-烷氧基、C6-10-芳基氧基或C6-10-芳烷氧基、C5-10-杂芳烷氧基、C1-10-烷基-O-C6-10-芳基氧基、C5-10-杂环烷氧基基团，其可被以下基团取代一次或多次：-NH2、-NH-烷基、-N(烷基)2、NH-CO-烷基、N(烷基)-CO烷基、-SO3H、-SO2NH2、-SO2-N(烷基)2、-COOH、-CONH2、-CON(烷基)2或-OH；-H或基团-Ox-(CH2CH2O)v-R4''(其中x是0或1且v是1至10的数值，且R4''是-H、-烷基(优选C1-12-烷基)、-CH2-COOH、-CH2-CH2-COOH或-CH2-CH2-NH2)，其中在裂解后存在伯胺基团(对应于R4=H)；其中Z代表-H、卤素、-OY3、-SY3、NHY3、-CO-NY1Y2或-CO-OY3，其中Y1和Y2彼此独立地代表H、NH2或-(CH2)0-3Z'，且Y3代表H或-(CH2)0-3Z'，其中Z'代表H、SO3H、NH2或COOH；其中Y4代表任选地被-NHCONH2取代的直链或支化的C1-6-烷基，或代表任选地被-NH2取代的芳基或苄基，且Y5代表H或-CO-CHY6-NH2，其中Y6代表直链或支化的C1-6-烷基；或R2和R4一起本文档来自技高网...

【技术保护点】
下式的抗体与一个或多个活性物质分子的缀合物：

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.06.23 EP 15173485.21.下式的抗体与一个或多个活性物质分子的缀合物：其中结合剂代表糖基化或去糖基化的抗B7H3抗体，或代表其抗原结合片段，L代表接头，n代表1至50、优选1.2至20且特别优选2至8的数值，且KSP代表下式(I)的化合物：式(I)：其中R1代表-H、-L-#1、-MOD或-(CH2)0-3Z，其中Z代表-H、-NHY3、-OY3、-SY3、卤素、-C(=O)-NY1Y2或-C(=O)-OY3，Y1和Y2彼此独立地代表-H、-NH2、-(CH2CH2O)0-3-(CH2)0-3Z'(例如-(CH2)0-3Z')或-CH(CH2W)Z'，Y3代表-H或-(CH2)0-3Z'，Z'代表-H、-NH2、-SO3H、-COOH、-NH-C(=O)-CH2-CH2-CH(NH2)COOH或-(C=O-NH-CHY4)1-3COOH；W代表H或OH，Y4代表任选地被-NH-C(=O)-NH2取代的直链或支化的C1-6烷基，或代表任选地被-NH2取代的芳基或苄基；R2代表H、-MOD、-C(=O)-CHY4-NHY5或-(CH2)0-3Z，其中Z代表-H、卤素、-OY3、-SY3、-NHY3、-C(=O)-NY1Y2或-C(=O)-OY3，Y1和Y2彼此独立地代表-H、-NH2或-(CH2)0-3Z'，Y3代表-H或-(CH2)0-3Z'，Z'代表-H、-SO3H、-NH2或-COOH；Y4代表任选地被-NH-C(=O)-NH2取代的直链或支化的C1-6-烷基，或代表任选地被-NH2取代的芳基或苄基，且Y5代表-H或-C(=O)-CHY6-NH2，Y6代表直链或支化的C1-6-烷基；R4代表-H、-L-#1、-SGlys-(C=O)0-1-R4’、-C(=O)-CHY4-NHY5或-(CH2)0-3Z，其中SGlys是溶酶体酶可裂解的基团，特别是由二肽或三肽组成的基团，R4'是C1-10-烷基、C5-10-芳基或C6-10-芳烷基、C5-10-杂烷基、C1-10-烷基-O-C6-10-芳基、C5-10-杂环烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂芳基烷氧基、C1-10-烷氧基、C6-10-芳基氧基或C6-10-芳烷氧基、C5-10-杂芳烷氧基、C1-10-烷基-O-C6-10-芳基氧基、C5-10-杂环烷氧基基团，其可被以下基团取代一次或多次：-NH2、-NH-烷基、-N(烷基)2、NH-C(=O)-烷基、-N(烷基)-C(=O)烷基、-SO3H、-SO2NH2、-SO2-N(烷基)2、-COOH、-C(=O)NH2、-C(=O)N(烷基)2或-OH；是-H或基团-Ox-(CH2CH2O)v-R4''，其中x是0或1，其中v是1至20的数值，且R4''是-H、-烷基(优选C1-12-烷基)、-CH2-COOH、-CH2-CH2-COOH或-CH2-CH2-NH2)；Z代表-H、卤素、-OY3、-SY3、NHY3、-C(=O)-NY1Y2或-C(=O)-OY3，Y1和Y2彼此独立地代表-H、-NH2或-(CH2)0-3Z'，Y3代表-H或-(CH2)0-3Z'，Z'代表-H、-SO3H、-NH2或-COOH；Y4代表任选地被-NH-C(=O)-NH2取代的直链或支化的C1-6-烷基，或代表任选地被-NH2取代的芳基或苄基，Y5代表-H或-C(=O)-CHY6-NH2，且Y6代表直链或支化的C1-6-烷基；或R2和R4一起(形成吡咯烷环)代表-CH2-CHR11-或-CHR11-CH2-，其中R11代表-H、-NH2、-SO3H、-COOH、-SH、卤素(特别是F或Cl)、C1-4-烷基、C1-4-卤代烷基、C1-4-烷氧基、羟基-取代的C1-4-烷基、-C(=O)-O-(C1-4-烷基)或-OH；A代表-C(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-S(=O)2NH-或-CNNH2-；R3代表-L-#1、-MOD或任选地取代的烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂烷基、杂环烷基基团，优选-L-#1或C1-10-烷基、C6-10-芳基或C6-10-芳烷基、C5-10-杂烷基、C1-10-烷基-O-C6-10-芳基或C5-10-杂环烷基基团，其各自可被1-3个-OH基团、1-3个卤素原子、1-3个卤代烷基基团(各自具有1-3个卤素原子)、1-3个-O-烷基基团、1-3个-SH基团、1-3个-S-烷基基团、1-3个-O-C(=O)-烷基基团、1-3个-O-C(=O)-NH-烷基基团、1-3个-NH-C(=O)-烷基基团、1-3个-NH-C(=O)-NH-烷基基团、1-3个-S(=O)n-烷基基团、1-3个-S(=O)2-NH-烷基基团、1-3个-NH-烷基基团、1-3个-N(烷基)2基团、1-3个-NH2基团或1-3个-(CH2)0-3Z基团取代，其中n代表0、1或2，Z代表-H、卤素、-OY3、-SY3、-NHY3、-C(=O)-NY1Y2或-C(=O)-OY3，Y1和Y2彼此独立地代表-H、-NH2或-(CH2)0-3Z'，Y3代表-H、-(CH2)0-3-CH(NH-C(=O)-CH3)Z'、-(CH2)0-3-CH(NH2)Z'或-(CH2)0-3Z'，Z'代表-H、-SO3H、-NH2或-COOH，R5代表-H、-NH2、-NO2、卤素(特别是F、Cl、Br)、-CN、CF3、-OCF3、-CH2F、-CH2F、SH或-(CH2)0-3Z，其中Z代表-H、-OY3、-SY3、卤素、-NHY3、-C(=O)-NY1Y2或-C(=O)-OY3，Y1和Y2彼此独立地代表-H、-NH2或-(CH2)0-3Z'，Y3代表-H或-(CH2)0-3Z'，Z'代表-H、-SO3H、-NH2或-COOH；R6和R7彼此独立地代表-H、氰基、C1-10-烷基、氟-C1-10-烷基、C2-10-烯基、氟-C2-10-烯基、C2-10-炔基、氟-C2-10-炔基、羟基、-NO2、-NH2、-COOH或卤素，R8代表C1-10-烷基、氟-C1-10-烷基、C2-10-烯基、氟-C2-10-烯基、C2-10-炔基、氟-C2-10-炔基、C4-10-环烷基、氟-C4-10-环烷基或-(CH2)0-2-(HZ2)，其可以被-OH、-COOH或-NH2相同或不同地取代一次或两次，且其中HZ2代表具有最多2个选自N、O和S的杂原子的4-至7-元杂环，R9代表-H、-F、-CH3、-CF3、-CH2F或-CHF2；其中取代基R1、R3和R4之一代表-L-#1，L代表接头且#1代表至所述抗体的键，-MOD代表-(NR10)n-(G1)o-G2-G3,其中R10代表-H或C1-C3-烷基；G1代表-NH-C(=O)-、-C(=O)-NH-(其中，如果G1代表-NH-C(=O)-，则R10不代表NH2)；n代表0或1；o代表0或1；且G2代表具有1至10个碳原子的直链或支化的烃链，其可被基团-O-、-S-、-S(=O)-、S(=O)2、-NRy-、-NRyC(=O)-、-C(=O)-NRy-、-NRyNRy-、-S(=O)2-NRyNRy-、-C(=O)-NRyNRy-中的一个或多个中断一次或多次，其中Ry代表-H、苯基、C1-C10-烷基、C2-C10-烯基或C2-C10-炔基，其各自可被-NH-C(=O)-NH2、-COOH、-OH、-NH2、-NH-CN-NH2、磺酰胺、砜、亚砜或磺酸相同或不同地取代一次或多次，和/或其可被-C(=O)-、-CRx=N-O-相同或不同地中断一次或多次，其中Rx代表-H、C1-C3-烷基或苯基，且其中包括任选地在烃基团上取代的C1-C10-烷基基团作为侧链的烃链可被-NH-C(=O)-NH2、-COOH、-OH、-NH2、-NH-CN-NH2、磺酰胺、砜、亚砜或磺酸取代，G3代表-H或-COOH，且其中基团-MOD优选地具有至少一个基团-COOH；以及其盐、溶剂化物、溶剂化物的盐和差向异构体。2.根据权利要求1所述的缀合物，其中A代表-C(=O)-。3.根据权利要求1或2所述的缀合物，其中R1代表-H、-L-#1、-COOH、-C(=O)-NHNH2、-(CH2)1-3NH2、-C(=O)-NZ''(CH2)1-3NH2或-C(=O)-NZ''CH2COOH，其中Z''代表-H或-NH2。4.根据前述权利要求中一项或多项所述的缀合物，其中R2和R4代表-H，或R2和R4一起(形成吡咯烷环)代表-CHR11-CH2-或-CH2-CHR11-；其中R11代表-H、-COOH、-F、甲基、-CH2F、-O甲基、-CH2OH、-C(=O)-O-(C1-4-烷基)或OH。5.根据前述权利要求中一项或多项所述的缀合物，其中R3代表-L-#1，或代表可被卤素、C1-3-烷基或氟-C1-3-烷基取代一次或多次的苯基基团，或代表C1-10-烷基基团或氟-C1-10-烷基基团，其可任选地被-OY4、-SY4、-O-C(=O)-Y4、-O-C(=O)-NH-Y4、-NH-C(=O)-Y4、-NH-C(=O)-NH-Y4、-S(O)n-Y4、-S(=O)2-NH-Y4、-NH-Y4或-N(Y4)2取代，其中n代表0、1或2，Y4代表-H，任选地被卤素、C1-3烷基或氟-C1-3-烷基取代一次或多次的苯基，或代表可被-OH、-COOH和/或-NH-C(O)-C1-3-烷基取代的烷基。6.根据权利要求5所述的缀合物，其中所述缀合物具有下式(IIj)：其中R3代表-L-#1；A代表-C(=O)-；且R6、R7、R8和R9具有与权利要求1中的式(I)中相同的含义。7.根据权利要求1至5中一项或多项所述的缀合物，其中取代基R1代表-L-#1。8.根据权利要求7所述的缀合物，其中所述缀合物具有式(IIk)：其中R1代表-L-#1；A代表-C(=O)-且R3代表-CH2OH-；R6、R7、R8和R9具有与权利要求1中的式(I)中相同的含义。9.根据前述权利要求中一项或多项所述的缀合物，其中R5代表-H或-F。10.根据前述权利要求中一项或多项所述的缀合物，其中R6和R7彼此独立地代表-H、C1-3-烷基、氟-C1-3-烷基、C2-4-烯基、氟-C2-4-烯基、C2-4-炔基、氟-C2-4-炔基、羟基或卤素。11.根据前述权利要求中一项或多项所述的缀合物，其中R8代表支化的C1-5-烷基基团或环己基。12.根据前述权利要求中一项或多项所述的缀合物，其中R9代表-H或氟。13.根据前述权利要求中一项或多项所述的缀合物，其中所述接头-L-具有以下基本结构(i)至(iv)之一：其中m代表0或1，SG和SG1代表体内可裂解的基团，L1彼此独立地代表体内不可裂解的有机基团，且L2代表在所述结合剂上的偶联基团。14.根据权利要求13所述的缀合物，其中所述体内可裂解的基团SG是2-8寡肽基团，优选三肽或二肽基团或二硫化物、腙、缩醛或缩醛胺且SG1是2-8寡肽基团，优选二肽基团。15.根据前述权利要求中一项或多项所述的缀合物，其中所述接头L连接至半胱氨酸侧链或半胱氨酸残基且具有下式：其中m代表0或1；§代表至所述活性物质分子的键，且§§代表至所述抗体的键，且-L2-代表其中#1表示与所述抗体的硫原子的连接点，#2表示与基团L1的连接点，L1代表-(NR10)n-(G1)o-G2-,其中R10代表-H、-NH2或C1-C3-烷基；G1代表-NH-C(=O)-；n代表0或1；o代表0或1；且G2代表具有1至100个(优选1至25个)碳原子的直链或支化的烃链，其来自芳基基团和/或直链和/或支化的烷基基团...

【专利技术属性】
技术研发人员：HG莱尔兴，AS雷布施托克，Y坎乔格兰德，S维特罗克，S贝恩特，U格里特赞，J菲廷，B施特尔特路德维希，P琼斯，C马莱特，C福茨迈尔，D舍恩费尔德，M特劳特魏因，E韦伯，N帕洛夫斯基，S格雷文，JM格吕克，S汉默，L迪茨，S梅尔施，
申请(专利权)人：拜耳制药股份公司，
类型：发明
国别省市：德国,DE