一种新的树突状细胞疫苗的制备方法技术

本发明专利技术属于细胞免疫学技术领域，提供了一种新的树突状细胞疫苗的制备方法。本发明专利技术在树突状细胞DC疫苗制备过程中，在负载肿瘤抗原的同时，通过电转染的方式向DC细胞中转入外源Bcl‑2 mRNA和IL‑12P70 mRNA。本发明专利技术的优点是制备的DC细胞具有更高的活力和更长的存活时间、可以分泌大量的IL‑12，从而显著增加DC的抗原呈递能力，有效诱导抗原特异性的免疫应答。本发明专利技术所制备的DC疫苗主要用于肿瘤治疗或者癌症高危人群的预防，具有制备工艺简单、成本低廉、特异性强、疗效显著等特点。

A new method for the preparation of dendritic cell vaccine

The invention belongs to the field of cell immunology technology, and provides a new preparation method of dendritic cell vaccine. In the process of preparing dendritic cell DC vaccine, the present invention transfers the exogenous Bcl mRNA and IL 12P70 mRNA in the DC cells by electric transfection at the same time that the tumor antigen is loaded. The advantage of the present invention is that the prepared DC cells have higher vitality and longer survival time, and can secrete a large number of IL 12, thus significantly increasing the antigen presentation ability of DC and effectively inducing the antigen specific immune response. The DC vaccine prepared by the invention is mainly used for the treatment of tumor or the prevention of the high risk population of cancer. It has the characteristics of simple preparation technology, low cost, strong specificity and remarkable curative effect.

【技术实现步骤摘要】
一种新的树突状细胞疫苗的制备方法
本专利技术属于细胞免疫学
，具体地说是一种树突状细胞肿瘤疫苗的制备方法。
技术介绍
肿瘤已经继心血管疾病成为威胁人类健康的第二大杀手。常规的肿瘤治疗手段包括手术治疗、放疗和化疗等。但现有的肿瘤治疗方法不能很好的解决肿瘤复发和迁移的问题。肿瘤免疫治疗作为新兴的第四种肿瘤治疗方法，鉴于其较好的疗效和安全性，在肿瘤治疗和预防方面展示出具有巨大的应用潜力与前景。肿瘤免疫治疗可分为主动免疫治疗和被动免疫治疗两类。树突状细胞疫苗属于主动免疫治疗。它可以携带肿瘤抗原信息，激活特异性T细胞产生应答反应，产生抗肿瘤效应。树突状细胞(DC，DendriticCell)是人体内功能最强的抗原递呈细胞(APC，Antigenpresentationcell)，具有强大的T细胞激活能力，并能活化幼稚T细胞(Tcell)、刺激B淋巴细胞增殖成熟、诱导机体产生特异性Th细胞、CD8+胞毒T细胞(CTL)，引发机体产生特异性应答。因此，树突状细胞肿瘤疫苗可以作为一种治疗肿瘤的有效手段。目前，DC细胞疫苗已经在世界范围内用于多种肿瘤治疗的临床研究，但治疗的临床效果小于初始预期。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种新的树突状细胞疫苗的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：a.体外合成人源Bcl‑2、IL‑12p70 mRNA；b.分离和培养DC；C.采用电穿孔的方法将Bcl‑2和IL‑12p70 mRNA导入DC细胞中。

【技术特征摘要】
1.一种新的树突状细胞疫苗的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：a.体外合成人源Bcl-2、IL-12p70mRNA；b.分离和培养DC；C.采用电穿孔的方法将Bcl-2和IL-12p70mRNA导入DC细胞中。2.根据权利要求1所述的一种新的树突状细胞疫苗的制备方法，其特征在于所述步骤b.包括以下步骤：b1.从外周血单个核细胞中分离获得单核细胞；b2.用含有GM-CSF和IL-4的无血清培养基诱导培养单核细胞向DC分化；b3.诱导未成熟DC细胞转化为成熟DC，诱导DC成熟用四种因子组合TNF-α、IL-Iβ、IL-6、PGE-2和两种因子组合TNF-α、PGE-2中的任意一种方案；b4.成熟培养1-2天。3.根据权利要求3所述方法，其中四种因子组合诱导DC成熟所用因子终浓度为：TNF-α5ng...

【专利技术属性】
技术研发人员：不公告发明人，
申请(专利权)人：北京启辰生生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11