工程化亚胺还原酶以及用于酮和胺化合物的还原胺化的方法技术

本申请涉及工程化亚胺还原酶以及用于酮和胺化合物的还原胺化的方法。本公开内容提供了具有亚胺还原酶活性的工程化多肽、编码该工程化亚胺还原酶的多核苷酸、能够表达该工程化亚胺还原酶的宿主细胞、以及使用这些工程化多肽与一系列酮和胺底物化合物制备仲胺和叔胺产物化合物的方法。

Engineering imide reductase and method for reducing amidation of ketone and amine compounds

The application involves engineering imide reductase and a method for reducing amidation of ketones and amine compounds. This disclosure provides engineered polypeptides, encoding with imine reductase activity of the engineered imine reductase polynucleotides, expression of host cells, the engineered imine reductase and methods of using these engineered polypeptides and a series of ketone and amine compounds are substrates for preparation of secondary and tertiary amines product compounds.

【技术实现步骤摘要】
工程化亚胺还原酶以及用于酮和胺化合物的还原胺化的方法本申请是申请日为2013年5月9日，申请号为201380037039.4，专利技术名称为“工程化亚胺还原酶以及用于酮和胺化合物的还原胺化的方法”的申请的分案申请。
本公开内容涉及对于将各种酮和胺底物向仲胺和叔胺产物的转化有用的具有亚胺还原酶活性的工程化多肽。对序列表、表格或计算机程序的引用序列表的正式文本作为ASCII格式文本文件与说明书经EFS-Web同时被提交，文件名为“CX2-120US2_ST25.txt”，创建日期为2013年5月8日，且大小为1,729,414字节。经EFS-Web提交的序列表为本说明书的一部分，并且通过引用以其整体并入本文。
技术介绍
手性仲胺和叔胺是制药工业中的重要合成砌块(buildingblock)。不存在生产此类手性胺化合物的已知的有效生物催化路径。现有的化学方法使用手性硼试剂或多步合成。存在很少有关仲胺的生物催化合成的文献的报道。报道厌氧细菌伍氏醋酸杆菌(Acetobacteriumwoodii)的完整细胞亚胺还原酶活性还原亚苄基亚胺和亚丁基亚胺(Chadha，等人，2008,Tetrahed本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有亚胺还原酶活性的工程化多肽，所述工程化多肽包括与SEQ ID NO:2的序列相比在选自以下的残基位置上具有一个或更多个残基差异的氨基酸序列：X198、X111、X136、X156、X197、X201、X259、X280和X293。

【技术特征摘要】
2012.05.11 US 61/646,1001.一种具有亚胺还原酶活性的工程化多肽，所述工程化多肽包括与SEQIDNO:2的序列相比在选自以下的残基位置上具有一个或更多个残基差异的氨基酸序列：X198、X111、X136、X156、X197、X201、X259、X280和X293。2.如权利要求1所述的工程化多肽，其中所述残基差异选自X198E/A/H/P/S、X111M/Q/S、X136G、X156G/I/Q/S/T/V、X197I/P、X201L、X259E/H/I/L/M/S/T、X280L和X293H/I/K/L/N/Q/T/V。3.如权利要求1所述的工程化多肽，其中所述氨基酸序列包括至少选自以下的残基差异组合：X197I、X198E、X259M和X280L。4.如权利要求1所述的工程化多肽，所述工程化多肽能够在适当的反应条件下将底物化合物(1a)丙酮酸，和底物化合物(2b)丁胺转化为产物化合物(3b)，N-2-(丁基氨基)丙酸，5.如权利要求1所述的工程化多肽，所述工程化多肽能够在适当的反应条件下将底物化合物(1b)环己酮，和底物化合物(2a)L-正缬氨酸转化为产物化合物(3c)，(S)-2-(环己基氨基)戊酸，6.如权利要求1所述的工程化多肽，所述工程化多肽能够在适当的反应条件下将底物化合物(1b)环己酮，和底物化合物(2b)丁胺转化为产物化合物(3d)，N-丁基环己胺，7.如权利要求1至3的任一项所述的工程化多肽，所述工程化多肽还包括与SEQIDNO:2的序列相比在选自以下的残基位置上的一个或更多个残基差异：X4、X5、X14、X20、X29、X37、X67、X71、X74、X82、X94、X97、X100、X111、X124、X137、X141、X143、X149、X153、X154、X157、X158、X160、X163、X177、X178、X183、X184、X185、X186、X220、X223、X226、X232、X243、X246、X256、X258、X259、X260、X261、X265、X266、X270、X273、X274、X277、X279、X283、X284、X287、X288、X294、X295、X296、X297、X308、X311、X323、X324、X326、X328、X332、X353和X356。8.如权利要求7所述的工程化多肽，其中所述残基差异选自X4H/L/...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈海滨，杰弗里·穆尔，史蒂文·J·科利尔，德里克·史密斯，约瓦娜·纳佐尔，格雷戈里·休斯，雅各布·杰恩，吉伽特哈思曼，斯科特·诺维克，尼古拉斯·阿加德，奥斯卡·阿尔维左，乔治·科普，杨万林，乔利·苏库玛兰，斯特法妮·额·迈纳，
申请(专利权)人：科德克希思公司，
类型：发明
国别省市：美国,US