免疫-扩增制造技术

本发明专利技术为临床上相关的样品（例如血液）提供了高度灵敏的、高通量的免疫－扩增测定。该测定包括使用２个邻近成员，后者包含缀合到寡核苷酸上的分析物特异性结合组分。结合分析物使邻近成员的寡核苷酸部分足够接近，以形成扩增子。然后，通过扩增扩增子和检测扩增的核酸，检测分析物的存在。通过防止未与分析物复合的邻近成员形成虚假的或非特异性的扩增子，提高了本发明专利技术的测定的灵敏度。在一个实施方案中，使用能结合未彼此杂交的寡核苷酸部分的杂交封闭剂寡核苷酸，防止了目标－非依赖性扩增子形成。通过提供能阻止扩增子形成、直到释放出被捕获的复合物的固相捕捉寡核苷酸，进一步降低了背景。（*该技术在2024年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及分析物特异性结合组分和核酸扩增的新应用，以提供 超灵敏的高通量测定，来检测和定量溶液中的分析物。
技术介绍
在目标分析物的检测和定量领域的一个基本目标是，开发高特异 性且灵敏的测定系统，其能检测复杂环境中的极少量的分析物，所述 的复杂环境例如血液、血清、血浆、尿或其它体液。因为与体液中的 其它组分相比，诊断上有重要意义的分子可能极少量地构成或存在， 因此可接受的测定形式必须能够将可能代表样品中的总生物材料的一 小部分百分比的分析物区分开。常规方法使用分析物特异性抗体，来 提供需要的辨别，但是抗体受到它们与其它非靶向分析物的交叉反应 性的限制。如果分析物以极少量存在于环境中，而该环境又富含以低 亲合力结合抗体的分析物，即使对于具有高特异性的抗体，小程度的 交叉反应性也会造成不可克服的问题。免疫-扩增已经用作提高免疫测定的灵敏度的手段。在该方法中，使抗原接触与可以扩增的DM标记分子缀合的抗体。不是通过常规方 法检测抗体的存在，例如用可检测地标记的抗-抗体标记抗体-抗原复 合物，而是通过聚合酶链式反应("PCR")，通过对DNA标记的扩增间 接检测抗原-抗体-标记缀合物。然本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测分析物的方法，包括：　（ｉ）组合：　（ａ）分析物；　（ｂ）第１邻近成员，其包含第１分析物特异性结合实体，后者能与分析物形成复合物，且缀合到包含第一部分的第１寡核苷酸部分上；　（ｃ）第２邻近成员，其包含第２分析物特 异性结合实体，后者能与分析物形成复合物，且缀合到包含能与第１寡核苷酸的第一部分杂交的部分的第２寡核苷酸部分上；　（ｄ）杂交封闭剂寡核苷酸，其中杂交封闭剂寡核苷酸包含能与第１寡核苷酸部分的第一部分形成杂交体的部分；　（ｉｉ）形成杂 交体，其包含第１寡核苷酸部分的第一部分和第２寡核苷酸部分的所述部分，其中杂交体包含第...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：J纳多，T赫利尔，D伯杰，W努斯鲍默，R罗森斯坦，A库恩，SS王，K桑顿，
申请(专利权)人：贝克顿迪金森公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]