磷脂酰肌醇蛋白激酶类的活性测定试剂盒制造技术

一种用于磷脂酰肌醇蛋白激酶类及其亚类的活性快速测定的试剂盒，其特征在于该测定试剂盒有如下组成：一块由待测的磷脂酰肌醇蛋白激酶相对应的底物和磷脂预先包埋好的９６孔板；酶活性测定Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ溶液；酶反应终止与洗涤ＨＣｌ液以及簿层滴样用氯仿－ＨＣｌ专用液所组成。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物化学酶试剂盒检测领域，具体适合于磷脂酰肌醇蛋白激酶类，以及各种相关脂酶活性的固相法测定。面对日益增加的磷脂酰肌醇激酶在细胞信号转导过程中起中心作用被人们所重视，磷脂酰肌醇代谢过程中的重要蛋白激酶(PI4k，PI3K，PIP5K等)它的活性测定需求日益上升；然而，传统的磷脂酰肌醇蛋白激酶活性测定所用的方法存在许多缺点如操作繁琐，重复性差，以及不能大规模活性测定，而且对于操作者存在着放射性同位素辐照损伤的危险。为此改进传统蛋白激酶活性测定方法。特别在临床的靶向药物的选择中显得特别重要。磷脂酰肌醇激酶活性试剂盒的设计1.底物的包被由有机溶剂将磷脂溶解后在放入96孔板中在4℃条件下过夜，然后用PBS洗涤三遍。2.封闭多余的空间为了封闭多余的空间再加入3％的牛血清白蛋白，室温下孵浴一小时后，用PBST(0.02％Tween)洗涤三遍。3.磷脂酰肌醇激酶(或膜样品，或细胞裂解液)的吸附然后加入需要测定的磷脂酰肌醇激酶(或膜样品，或细胞裂解液)在室温下孵浴一小时将其吸附在固体板上后，再移去多余的溶液；4.活性的测定然后加入测活的溶液Tris-HCl 20mM，pH7.4；1本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于磷脂酰肌醇蛋白激酶类及其亚类的活性快速测定的试剂盒，其特征在于该测定试剂盒有如下组成：一块由待测的磷脂酰肌醇蛋白激酶相对应的底物和磷脂预先包埋好的９６孔板；酶活性测定Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ溶液；酶反应终止与洗涤ＨＣｌ液以及簿层滴样用氯仿－ＨＣｌ专用液所组成。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：乐加昌，
申请(专利权)人：中国科学院生物物理研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]