一种新的多肽--磷脂酸磷酸酶29.81和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－磷脂酸磷酸酶２９．８１，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如脱髓鞘性周围神经病、夜盲症、佝偻病、脂肪肝、支气管哮喘、消化性溃疡等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的磷脂酸磷酸酶２９．８１的多核苷酸的用途。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽--磷脂酸磷酸酶29.81，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。磷脂酸(PA)和二脂酰甘油(DG)在信号传导和细胞膜脂类的生物合成过程中有重要作用，磷脂酸磷酸酶(PAP)的作用是将PA催化生成DG，PAP有两种，PAP1和PAP2，PAP1被认为是与细胞质和细胞膜都有关，PAP2是一个完全的膜蛋白。PAP2-alpha 1和PAP2-alpha2是可选择性的同一PAP2基因编码出的两种形式。(DNA Cell Biol 1998 Apr；17(4)377-85)已发现PAP2有三种不同的同工结构，分别称为PAP2a，PAP2b，PAP2c。它们的结构，包括糖基化位点、跨膜的功能域、酶催化位点等已有了一定程度的阐述，具体请参阅相关文献。(FEBS Lett 1998 May 8；427(2)188-92)已有的实验从鼠的体内克隆到了35KD的PAP2。也已证明，同工的人磷脂酸磷酸酶(PAP2)已发现三种，2a，2b，2c。这些酶都有6个跨膜的功能域，而这些酶的催化位点也被初步定于酶的第二和第三个细胞外LOOP结构之间，PAP2属于一大类可溶性的膜结合酶。体外实验的结果证明，PAP2可以脱去以下底物的磷酸，包括可溶性磷脂酸、神经酰胺-1-磷酸盐、神经鞘氨醇-1-磷酸盐和二脂酰甘油焦磷酸脂等。PAP2有很广泛的底物特异性，但具体的研究还有待进一步完善，PAP2显示有调控来源于丙三基或鞘类磷脂等脂类代谢的功能。(Chem Phys Lipids1999 Apr；98(1-2)119-26)磷脂酸磷酸酶(PAP)的主要功能是将磷脂酸脱去磷酸形成二脂酰甘油，因此调控甘油脂类的合成、细胞信号传导等过程。磷脂酸磷酸酶(PAP)是一种在脂类代谢过程中有重要作用的酶类，其底物和产物(磷脂酸和二脂酰甘油)是作为第二信使在生物的信号传导过程中起作用。通过诱变编码PAP的基因的方法，我们发现突变后的细胞发生了在细胞分裂时期的细胞形状不正常，细胞生长不正常、细胞质移动不正常。因此，可以认为PAP在细胞生长、细胞质移动等过程中有重要的作用。(Biochem Biophys Res Commun.1998 Jul 9；248(1)87-92)Northern杂交的结果显示，在一些肿瘤组织中PAP2的表达被抑制，特别是一些来源于初级消化道的组织中，这一现象特别明显。因此，可以推断PAP2及其编码基因可用于一些肿瘤的治疗。(DNA Cell Biol 1998 Apr；17(4)377-85)也有研究表明，PAP2在前列腺细胞中能起到男性激素的调控作用，因此可用于治疗前列腺的相关疾病，例如前列腺癌等等。(J Biol Chem 1998 Feb20；273(8)4660-5)；(PAP-2a；Kai.，M.，Wada，I.，Imai，S.-i.，Sakane，F.，and Kanoh，H.(1997)J.Biol.Chem.272，24572-24578)还有研究发现，PAP2与生殖细胞的移动、上皮组织细胞的分裂等过程有关系，并可能在上述过程中起重要的调节作用。(Biochim Biophys Acta 1997 Sep4；1348(1-2)56-62)在对鼠的研究中，我们发现磷脂酸磷酸酶(PAP)与鼠的肥胖程度有一定关系。但是，对正常人的脂肪组织和病态肥胖的人脂肪组织中的磷脂酸磷酸酶(PAP)进行对照研究，结果显示导致人肥胖的甘油三脂的过度合成与磷脂酸磷酸酶(PAP)的活性高低并没有明显的关系。(Lipids 1989 Dec；24(12)1048-52)对人正常和营养缺乏的肌肉组织的活体切片检查的结果表明，与正常组织相比在营养缺乏组织中的磷脂酸磷酸酶(PAP)在微粒体中的表达要低很多，而在细胞质和线粒体中的表达要高很多。(Clin Chim Acta 1985 Mar15；146(2-3)167-74)本专利技术人的多肽与磷脂酸磷酸酶(PAP)在氨基酸水平上分别有36％和57％的相同性与相似性，并具有相似的结构特征，同属于磷脂酸磷酸酶蛋白家族，故命名为磷脂酸磷酸酶29.81，同时推测其具有相似的生物学功能。由于如上所述磷脂酸磷酸酶29.81蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的磷脂酸磷酸酶29.81蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新磷脂酸磷酸酶29.81蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽--磷脂酸磷酸酶29.81以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码磷脂酸磷酸酶29.81的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码磷脂酸磷酸酶29.81的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产磷脂酸磷酸酶29.81的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽--磷脂酸磷酸酶29.81的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽--磷脂酸磷酸酶29.81的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与磷脂酸磷酸酶29.81异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO1中56-871位的序列；和(b)具有SEQ ID NO1中1-1268位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制磷脂酸磷酸酶29.81蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与磷脂酸磷酸酶29.81蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于磷脂酸磷酸酶29.81表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－磷脂酸磷酸酶２９．８１，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]