一种检测外周血中胰腺癌细胞标志物的试剂盒制造技术

本发明专利技术提供一种检测外周血中胰腺癌细胞的试剂盒，包括结合有胰腺癌抗体的磁珠及相应缓冲试剂，该试剂盒采用磁珠分选，RT‑PCR等分子生物学的方法检测胰腺癌患者血液循环中的肿瘤细胞的生物学活性，确定药物治疗靶点的基因，通过检测EpCAM、KRT19和MUC16的表达水平，确定胰腺癌的发展及转归，对胰腺癌的个体化治疗提供理论依据和实验证据。本发明专利技术提供的试剂盒检测样本量小，对患者伤害小，检测灵敏度高，检出率可达80％以上。

A kit for detecting pancreatic cancer cell markers in peripheral blood

The invention provides a kit for detection of pancreatic cancer cells in the peripheral blood, including pancreatic cancer combined with magnetic antibody and corresponding buffer reagent, the kit using magnetic bead sorting method, the biological activity of RT PCR and other molecular biology detection of blood circulation in patients with pancreatic cancer tumor cells and identify drug targets the gene, by detecting the expression level of EpCAM, KRT19 and MUC16, determine the development and prognosis of pancreatic cancer, and provide a theoretical basis and experimental evidence for individualized therapy for pancreatic cancer. The test kit provided by the invention has small sample size, small damage to the patient, high detection sensitivity and more than 80% detection rates.

【技术实现步骤摘要】
一种检测外周血中胰腺癌细胞标志物的试剂盒
本专利技术属于生物
，涉及一种胰腺癌检测试剂盒，具体涉及一种准确性高的检测外周血中胰腺癌细胞标志物的试剂盒。
技术介绍
1.1胰腺癌概述胰腺癌(pancreaticcarcinoma)是一种常见的消化道恶性肿瘤，约90％为起源于导管上皮的导管腺癌(pancreaticductaladenocarcinoma,PDAC)，其发病率和死亡率近年来明显上升，90％的胰腺癌患者生存期不超过一年，生存期超过五年的不足5％，是预后最差的恶性肿瘤之一。胰腺癌治疗效果不理想的影响因素有其早期症状不典型,复杂的病理生理学机制,早期诊断及预后标志物的缺乏等。尽管近年来肿瘤的诊断和治疗手段不断完善和进步，不少肿瘤的预后已获得改善，但据美国癌症协会统计，胰腺癌病人的预后改善最不明显。胰腺癌高死亡率的原因在于：1)尽管影像学方法在胰腺癌检测及治疗中发挥重要作用，然而，对小的病变，胰腺炎、胰腺上皮内瘤变及其它良性病变与胰腺癌仍很难鉴别，仅7％的胰腺癌在初期诊断。2)进展期胰腺癌无有效的治疗手段导致大多数患者预后差，外科手术可切除的局部病灶的患者5年相对生存率22％本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测外周血中胰腺癌细胞标志物的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒由如下组分组成：结合有胰腺癌抗体的磁珠：结合有寡核苷酸Oligo(dT)的磁珠；缓冲液A；100‑200mL缓冲液B：100‑200mL；裂解/结合缓冲液150‑250mL；10×缓冲液4.0‑5.0mL；dNTPs，5mM each 4.0‑5.0mL逆转录酶，10000U/μL 2.0‑3.0mLRNA酶抑制剂，40U/μL 0.4‑0.6mL2×热启动PCR混合液2‑3mLRNase‑free水1‑2mL；胰腺癌肿瘤标志物引物10μmol/L 3.0‑5.0mL；其中所述胰腺癌肿瘤标志物为EpCAM、KRT19、MUC16中...

【技术特征摘要】
1.一种检测外周血中胰腺癌细胞标志物的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒由如下组分组成：结合有胰腺癌抗体的磁珠：结合有寡核苷酸Oligo(dT)的磁珠；缓冲液A；100-200mL缓冲液B：100-200mL；裂解/结合缓冲液150-250mL；10×缓冲液4.0-5.0mL；dNTPs，5mMeach4.0-5.0mL逆转录酶，10000U/μL2.0-3.0mLRNA酶抑制剂，40U/μL0.4-0.6mL2×热启动PCR混合液2-3mLRNase-free水1-2mL；胰腺癌肿瘤标志物引物10μmol/L3.0-5.0mL；其中所述胰腺癌肿瘤标志物为EpCAM、KRT19、MUC16中的一种或多种；所述EpCAM引物序列为：上游引物如SEQIDNO：1所示；下游引物如SEQIDNO：2所示；所述KRT19引物序列为：上游引物如SEQIDNO：3所示；下游引物如SEQIDNO：4...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭焕然，牛刚，郝纯毅，徐巍，杨晓伟，
申请(专利权)人：北京牛牛基因技术有限公司，北京大学，北京市肿瘤防治研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11