一种新疆多浪羊外周血淋巴细胞cDNA文库的构建方法技术

本发明专利技术涉及一种新疆多浪羊外周血淋巴细胞cDNA文库的构建方法，属于生物技术领域。具体构建方法及过程如下：(1)提取和纯化总RNA；(2)合成cDNA第一链；(3)合成cDNA第二链；(4)对产物进行消化、酶切、过柱分离及连接；(5)体外包装；(6)cDNA文库的鉴定、扩增。本发明专利技术通过建立多浪羊的cDNA文库，有利于进一步研究新疆多浪羊的免疫分子并为保存物种信息奠定坚实的基础。对于现阶段利用分子克隆技术而言，建立多浪羊的cDNA文库，用相应的探针进行标记，筛选出目的基因和与目的基因相关的基因，也是目前获取新基因的重要手段。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及，属于生物
。具体构建方法及过程如下：(1)提取和纯化总RNA；(2)合成cDNA第一链；(3)合成cDNA第二链；(4)对产物进行消化、酶切、过柱分离及连接；(5)体外包装；(6)cDNA文库的鉴定、扩增。本专利技术通过建立多浪羊的cDNA文库，有利于进一步研究新疆多浪羊的免疫分子并为保存物种信息奠定坚实的基础。对于现阶段利用分子克隆技术而言，建立多浪羊的cDNA文库，用相应的探针进行标记，筛选出目的基因和与目的基因相关的基因，也是目前获取新基因的重要手段。【专利说明】—种新疆多浪羊外周血淋巴细胞cDNA文库的构建方法
本专利技术涉及，属于生物
。
技术介绍
新疆多浪羊又称“麦盖提羊”，是新疆地方良种肉用羊品种之一，该羊具有体格大，肉脂兼用型明显，体质结实，遗传性稳定，早熟，抗寒，抗病，耐粗饲，肉质鲜美，无膻味等。鉴于多浪羊有以上的优良特性，所以为了加快资源优势向经济优势转变，如何提高多浪羊的品质和养殖效率，扩大养殖范围，是新疆畜牧业未来的一个重要的发展方向。淋巴细胞是机体免疫系统的组成部分，是机体的免疫活性细胞，可分泌多种重要本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种新疆多浪羊外周血淋巴细胞cDNA文库的构建方法，其特征在于：具体构建方法及过程如下：(1)提取和纯化总RNA：采集新疆多浪羊颈静脉血20mL加2mL枸橼酸钠，分离淋巴细胞，利用Trizol法提取总RNA，纯化后置于?70℃保存备用；(2)合成cDNA第一链：以3μL总RNA(1.0μg)为模板，加入1μL?SMARTIV?oligonucleotide、1μL?CDSIII／3，PCR?Primer，混匀，瞬时离心后72℃孵育2min，冰浴2min，瞬时离心后，依次加入2μL5×First?stand?Buffer、1μL?DTT、1.0μL?dNTP?Mix、1.0μL?Power?Sc...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李莲瑞，潘伊微，贾山岭，王娟娟，曾国航，徐宏伟，李玮，
申请(专利权)人：塔里木大学，
类型：发明
国别省市：