筛选γ－分泌酶抑制剂的方法技术

本发明专利技术涉及用于测定γ－分泌酶活性的改进方法，该方法的各自组分和所述方法的用途。本发明专利技术涉及测定γ－分泌酶活性和检测γ－分泌酶、γ－分泌酶的亚单位蛋白质或者γ－分泌酶样蛋白酶的改进方法；所述方法的具体实施方案一方面涉及鉴定γ－分泌酶和编码γ－分泌酶、γ－分泌酶的亚单位蛋白质或者γ－分泌酶样蛋白酶的ｃＤＮＡ的方法，另一方面涉及鉴定可以抑制γ－分泌酶、γ－分泌酶的亚单位蛋白质或者γ－分泌酶样蛋白酶的活性的物质的方法。此类物质尤其重要，因为它们可以用于例如，作为药学活性化合物，例如，用于治疗阿尔茨海默氏病。（*该技术在2024年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及测定γ-分泌酶活性的改进方法，涉及所述方法的各种组分和所述方法的用途。本专利技术是基于WO00/34511 A2的教导，因此，将WO00/34511 A2的内容并入本文作为参考。阿尔茨海默氏病(AD)是脑的神经变性疾病，其伴随着细胞水平上边缘系统和大脑皮质中神经元的大量损失。在受侵袭的脑部，可以在分子水平上检测到蛋白质沉积，即所称作的蚀斑，其是阿尔茨海默氏病的基本特征。最经常在这些蚀斑中发生的蛋白质是40到42个氨基酸的肽，其称作Aβ肽。该Aβ肽是695到770个氨基酸的明显更大的蛋白质的切割产物，所述蛋白质称作淀粉状蛋白前体蛋白(APP)。APP是整合跨膜蛋白质，其首先穿过脂双层。到目前为止所述蛋白质的最大部分在细胞外，而较短的C末端结构域导向胞质溶胶(附图说明图1)。Aβ肽在图1中以暗灰色显示。约2/3的Aβ肽来自APP的细胞外结构域，约1/3来自APP的跨膜结构域。除了基于膜的APP，还可以检测到淀粉状蛋白前体蛋白的分泌形式，其由APP的大胞外结构域组成并且称作APPsec(“分泌的APP”)。通过蛋白酶剪切APP形成APPsec，所述剪切通过α分泌酶实现。本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测γ－分泌酶活性的方法，其中Ａ．使用编码融合蛋白质的转基因，其含有ａ）第一种核苷酸序列，其编码含有氨基酸序列ＧＡＩＩＧＬＭＶＧＧＶＶＩＡＴＶＩＶＩＴＬＶＭＬ（ＳＥＱＩＤＮＯ．１）的蛋白质，ｂ）处于第一种核苷酸序列的５’末端的第二种核苷酸序列，其编码信号肽，ｃ）启动子和，ｄ）如果适宜，其他编码和／或非编码核苷酸序列；Ｂ．将该转基因掺入到细胞中并且表达融合蛋白质；Ｃ．融和蛋白质在氨基酸序列ＳＥＱＩＤＮＯ．１内部通过细胞中存在的γ－分泌酶切割，从而形成含有氨基酸序列ＧＡＩＩＧＬＭＶＧＧＶＶ（ＳＥＱＩＤＮＯ．２）的第一种部分蛋白质和含有氨基酸序列ＶＩＶＩＴＬＶＭＬ（ＳＥＱＩＤＮＯ．３）的第二种部分蛋...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：E霍佩，G佩劳斯，J罗思布拉特，E莱伯尔，L默尔肯，S德赖斯勒，
申请(专利权)人：塞诺菲安万特德国有限公司，
类型：发明
国别省市：DE[德国]