转氨酶突变体及其应用制造技术

技术编号:17538048 阅读:60 留言:0更新日期:2018-03-24 11:53
本发明专利技术公开了一种转氨酶突变体及其应用。该转氨酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列,突变至少包括如下突变位点之一:第19位、第41位、第43位、第72位、第76位、第92位、第107位、第125位、第132位、第226位、第292位、第295位和第308位、第332位;且第19位突变为丝氨酸,第41位突变为丝氨酸,第43位突变为天冬酰胺,第72位的甘氨酸突变为亮氨酸等;或者转氨酶突变体的氨基酸序列具有发生突变的氨基酸序列中的突变位点,且与发生突变的氨基酸序列具有80%以上同源性的氨基酸序列。本发明专利技术转氨酶突变体大幅度降低了手性胺工业生产中的成本。

Transaminase mutant and its application

The invention discloses an aminotransferase mutant and its application. The amino acid sequence of the transaminase mutants of the amino acid sequence shown by SEQ ID NO:1 the amino acid sequence of mutation, mutation of mutation at least comprises the following: nineteenth, forty-first, forty-third, seventy-second, seventy-sixth, ninety-second, 107th, 125th, 132nd, 226th, 292nd bit, 295th bit and 308th bit, 332nd bit and nineteenth bit; mutated to serine, forty-first mutated to serine, forty-third mutated to asparagine, seventy-second glycine leucine mutation; or amino acid sequences of mutants with aminotransferase mutations mutations in the amino acid sequence, and more than 80% homology in amino acid sequence and the amino acid sequence mutation has. The mutants of the transaminase have greatly reduced the cost in the industrial production of chiral amines.

【技术实现步骤摘要】
转氨酶突变体及其应用
本专利技术涉及生物
,具体而言,涉及一种转氨酶突变体及其应用。
技术介绍
手性胺广泛存在于自然界中,是很多重要生物活性分子的结构单元,是合成天然产物和手性药物的重要中间体。许多手性胺都含有一个或多个手性中心,不同手性药物的药理活性、代谢过程、代谢速率以及毒性有显著差异,通常一种对映体是有效的,而另一种对映体则是低效或无效的,甚至是有毒的。因此,如何高效立体选择性地构建含手性中心的化合物在医药研发中有着重要意义。ω-转氨酶(ω-TA)属于转移酶类,同其他的转氨酶类一样,催化一个氨基与酮基互换的过程。大部分情况下ω-转氨酶是指一类酶,只要某个酶催化的转氨反应中,反应的底物或产物中不含有α-氨基酸,就可以称该酶为ω-转氨酶。ω-转氨酶以酮类化合物为原料,通过立体选择性地转氨基作用,可以高效生产手性胺,因其底物相对廉价、产物纯度高的特点,受到研究人员越来越多的关注(GreenChemistry,2017,19(2):333-360.)。然而野生型的转氨酶多存在底物耐受性差,活性低,稳定性差等缺陷,距离工业化应用有较大的差距。
技术实现思路
本专利技术旨在提供一种转氨酶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种转氨酶突变体,其特征在于,所述转氨酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列,所述突变至少包括如下突变位点之一:第72位、第76位、第92位、第107位、第125位、第132位、第226位第292位、第295位、第308位和第332位,且第19位突变为丝氨酸,第41位突变为丝氨酸,第43位突变为天冬酰胺,所述第72位的甘氨酸突变为亮氨酸;第76位的亮氨酸突变为丙氨酸;第92位的赖氨酸突变为甘氨酸,第107位的亮氨酸突变为异亮氨酸;第125位的丝氨酸突变为丙氨酸;第132位的丝氨酸突变为丙氨酸;第226位的丙氨酸突变为甘氨酸,第292位的缬氨酸突变...

【技术特征摘要】
1.一种转氨酶突变体,其特征在于,所述转氨酶突变体的氨基酸序列是由SEQIDNO:1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列,所述突变至少包括如下突变位点之一:第72位、第76位、第92位、第107位、第125位、第132位、第226位第292位、第295位、第308位和第332位,且第19位突变为丝氨酸,第41位突变为丝氨酸,第43位突变为天冬酰胺,所述第72位的甘氨酸突变为亮氨酸;第76位的亮氨酸突变为丙氨酸;第92位的赖氨酸突变为甘氨酸,第107位的亮氨酸突变为异亮氨酸;第125位的丝氨酸突变为丙氨酸;第132位的丝氨酸突变为丙氨酸;第226位的丙氨酸突变为甘氨酸,第292位的缬氨酸突变为半胱氨酸,第295位的丙氨酸突变为甘氨酸,第308位突变为丝氨酸,第332位突变为丝氨酸;或者所述转氨酶突变体的氨基酸序列具有所述发生突变的氨基酸序列中的所述突变位点,且与所述发生突变的氨基酸序列具有80%以上同源性的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的转氨酶突变体,其特征在于,所述转氨酶突变体的氨基酸序列为SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:9、SEQIDNO:10、SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18、SEQIDNO:19、SEQIDNO:20、SEQIDNO:21、SEQIDNO:22、SEQIDNO:23、SEQIDNO:24、SEQIDNO:25、SEQIDNO:26、SEQIDNO:27、SEQIDNO:28、SEQIDNO:29或SEQIDNO:30所示的氨基酸序列;或者所述转氨酶突变体的氨基酸序列为与SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5、SEQIDNO:6、SEQIDNO:7、SEQIDNO:8、SEQIDNO:9、SEQIDNO:10、SEQIDNO:11、SEQIDNO:12、SEQIDNO:13、SEQIDNO:14、SEQIDNO:15、SEQIDNO:16、SEQIDNO:17、SEQIDNO:18、SEQIDNO:19、SEQIDNO:20、SEQIDNO:21、SEQIDNO:22、SEQIDNO:23、SEQIDNO:24、SEQIDNO:25、SEQIDNO:26、SEQIDNO:27、SEQIDNO:28、SEQIDNO:29或SEQIDNO:30所示的氨基酸序列具有95%以上同源性的氨基酸序列。3.一种DNA分子,其特征在于,所述DNA分子编码权利要求1或2所述的转氨酶突变体。4.根据权利要求3所述的DNA分子,其特征在于,所述DNA分子的序列为SEQIDNO:32、SEQIDNO:33、SEQIDNO:34、SEQIDNO:35、SEQIDNO:36、SEQIDNO:37、SEQIDNO:38、SEQIDNO:39、SEQIDNO:40、SEQIDNO:41、SEQIDNO:42、SEQIDNO:43、SEQIDNO:44、SEQIDNO:45、SEQIDNO:46、SEQIDNO:47、SEQIDNO:48、SEQIDNO:49、SEQIDNO:50、SEQIDNO:51、SEQIDNO:52、SEQIDNO:53、SEQIDNO:54、SEQIDNO:55、SEQIDNO:56、SEQIDNO:57、SEQIDNO:58、SEQIDNO:59或SEQI...

【专利技术属性】
技术研发人员:洪浩詹姆斯·盖吉卢江平焦学成张娜李瑞张克俭
申请(专利权)人:凯莱英生命科学技术天津有限公司
类型:发明
国别省市:天津,12

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