一种蔗糖淀粉酶、制备方法及在生产α‑熊果苷中的应用技术

本发明专利技术公开了一种蔗糖淀粉酶、制备方法及在生产α‑熊果苷中的应用，所述蔗糖淀粉酶DpAMY基因，是SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。该蔗糖淀粉酶DpAMY来源于Deinococcus puniceus菌，具有高催化能力，能够特异地催化蔗糖和对苯二酚生产α‑熊果苷，6h内能够催化3％的对苯二酚，摩尔转化效率达98％，催化时间短，产物纯度高，副产物少，易于纯化。

A sucrose amylase, preparation method and production in the application of alpha arbutin

【技术实现步骤摘要】
一种蔗糖淀粉酶、制备方法及在生产α-熊果苷中的应用
本专利技术涉及蔗糖淀粉酶生产
，具体涉及一种一种蔗糖淀粉酶、制备方法及在生产α-熊果苷中的应用。
技术介绍
熊果苷是从多种不同植物中提取得到的天然活性物质，是葡萄糖基化的氢醌衍生物，化合物分类中属于氢醌葡萄糖苷类，具有某些特定的生理功能，广泛存在于在动物、植物及微生物细胞中。熊果苷具有抑制黑色素产生的作用，通常在化妆品中作为美白保湿剂使用，具有两种异构体，即：β-熊果苷和α-熊果苷，研究表明，不仅在美白功效方面α-熊果苷远远强于β-熊果苷，而且在使用的安全性上α-熊果苷也远远优于β-熊果苷。二者均属于天然产物，前者主要通过植物提取或化学法合成得到；而α-熊果苷除通过植物提取制备外，主要通过生物转化法得到。生物转化法是利用生物细胞中的相应的酶对外源化合物进行酶催化反应。目前已经发现一些植物细胞，如西洋参冠瘿组织培养液、长春花组织细胞、何首乌毛状根能够催化底物生成α-熊果苷，1991年，Inomate等人首次将对苯二酚加入到长春花植物组织细胞悬浮液中，通过对苯二酚的转化制得具有高含量的熊果苷；此后Yokoyama等人不仅采用更换新本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蔗糖淀粉酶，其特征在于，所述蔗糖淀粉酶命名为DpAMY，蔗糖淀粉酶DpAMY的基因是SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种蔗糖淀粉酶，其特征在于，所述蔗糖淀粉酶命名为DpAMY，蔗糖淀粉酶DpAMY的基因是SEQIDNO.2所示的核苷酸序列。2.权利要求1所述蔗糖淀粉酶DpAMY基因编码的蛋白质，其特征在于，它是SEQIDNo.3所示的氨基酸序列。3.根据权利要求1所述的蔗糖淀粉酶，其特征在于，所述蔗糖淀粉酶DpAMY来自于Deinococcuspuniceus菌。4.权利要求1-3任一项所述蔗糖淀粉酶DpAMY菌体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：(a)DpAMY基因的获得：将来自于Deinococcuspuniceus菌株的蔗糖淀粉酶候选基因进行密码子优化后进行全基因合成，并在基因序列的前端加入BamHI限制性酶切位点，末端加入XhoI限制性酶切位点；(b)构建DpAMY原核表达载体：利用BamHI和XhoI分别将DpAMY和pET28a载体双酶切，然后二者进行连接构建得到重组表达蔗糖淀粉酶基因DpAMY的质粒pET28a-DpAMY；(c)构建表达蔗糖淀粉酶DpAMY的基因工程菌；将质粒pET28a-DpAMY转入E.coliBL21，得到重组表达蔗糖淀粉酶DpAMY的菌株BL21-DpAMY；(d)将菌株BL21-DpAMY在发酵培养基中发酵培养，加入0.1-0.5％的乳糖25-30℃诱导表达16h，离心收集菌体即得到蔗糖淀粉酶DpAMY菌体。5.根据权利要求4所述蔗糖淀粉酶DpAMY菌体的的制备方法，其特征在于，所述发酵培养基配方为：甘油20g/L，酵母浸粉20g/L，蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员：王东阳，张娟，冯志彬，王蕾，
申请(专利权)人：山东阳成生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37