利用5’-肌苷酸脱氢酶缺陷型芽孢杆菌生产肌苷的方法技术

技术编号:1750110 阅读:249 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
用重组DNA技术生产与肌苷酸脱氢酥基因区和/或它的侧部区高度同质的DNA,它使该基因钝化。该DNA及插入该DNA的载体可用来转化芽孢杆菌,从而使这些菌株至少能生产肌苷,黄苷和鸟苷中的一种核苷。生产肌苷的该菌株既能高度累积肌苷又很稳定。(*该技术在2007年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生产肌苷的方法。肌苷是合成5′-肌苷酸时作为起始材料的重要物质。本专利技术还涉及生产肌苷酸的新微生物及组建这些新微生物所用的新DNA。人们已知发酵生产肌苷酸是用一种芽孢杆菌(见日本公告专利号2965/1980,41915/1982,42895/1984),Brevibacterium(日本公告专利5075/1976,见农业生物化学1978年42期399页)或需要腺嘌呤及既需腺嘌呤又具几种药物抗性的类似菌株。用这些菌株是由于它们生物合成嘌呤核苷酸的能力都很强。另一方面,用肌苷酸脱氢酶缺陷型菌株可大量积累肌苷,因为当肌苷酸脱氢酶缺乏时,生产肌苷的一种中间体5′-肌苷酸就可有效地转化为肌苷,而不转化为5′-乌苷酸。为此目的,就常用影印法或用诸如紫外线和亚硝基胍(NTG)处理的突变方法筛选需要黄嘌呤或乌嘌呤的菌株。然而这样得到的营养缺陷型菌株有很多缺点,例如由于它们在有关酶的基因以外其它区域的突变,产率会低于它们的母株,也会在发酵期间由于回复突变而使产率浮动。根据这种情况,本专利技术人研究了如何得到肌苷酸脱氢酶缺陷型菌株,结果用重组DNA技术将为肌苷酸脱氢酶编码的基因DNA并入一本文档来自技高网...

【技术保护点】
为钝化〔失活〕的肌苷酸脱氢酶编码的DNA,它与枯草杆菌的肌苷酸脱氢酶基因区和/或它的侧部区高度同质。

【技术特征摘要】
JP 1986-12-26 311588/861.为钝化(失活)的肌苷酸脱氢酶编码的DNA,它与枯草杆菌的肌苷酸脱氢酶基因区和/或它的侧部区高度同质。2.根据权利要求1所述DNA,该DNA具有插入一个DNA片段的肌苷酸脱氢酶基因区,从而使该基因钝化(失活)。3.根据权利要求2所述DNA,其中所述的DNA片段是一个除肌苷酸脱氢酶基因以外的其它基因。4.根据权利要求3所述DNA,其中所述的其它基因是一个筛选(选择)标记基因。5.根据权利要求4所述的DNA,其中所述的选择标记基因是选自下面一组的一个或多个基因药物抗性基因,氨基酸合成基...

【专利技术属性】
技术研发人员:宫川权一郎木村宏之隅野靖弘
申请(专利权)人:武田药品工业株式会社
类型:发明
国别省市:JP[日本]

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