一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法技术

本发明专利技术是一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法，该方法采用以下方法建立双鱼颗粒定量指纹图谱：采用高效液相色谱法，色谱条件与系统适应性试验：色谱柱C18，以乙腈为流动相A，以体积浓度0.05%三氟乙酸为流动相B，梯度洗脱，0~50min，5%A~70%A；流速每分钟为0.7~0.9 ml；检测波长为230 nm和327 nm；柱温25~35℃。本发明专利技术方法能够反映双鱼颗粒的主要成分含量的变化情况，用于更好地评价和控制双鱼颗粒的质量。

【技术实现步骤摘要】
一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法
本专利技术涉及中药制剂的质量控制方法，特别是一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法。
技术介绍
双鱼颗粒由鱼腥草、金银花、赤芍、艾叶、薄荷5味药制成，具有辛凉解表，清热解毒的功效，主要用于外感风热型普通感冒，症见发热头痛，全身酸痛，鼻塞，流涕，咳嗽，咳痰，咽喉发痒，口干而渴，咽喉红肿疼痛，舌红，脉数等症。中药指纹图谱对于有效控制中药材或中成药的质量具有重要的意义，它在一定程度上反映了中药的化学物质基础。同时，结合多指标成分定量分析，已经成为当前中药质量控制的手段之一。现有技术中尚无有关双鱼颗粒的质量控制方法的明确报道，因此，为了保证其质量和疗效，提供一种双鱼颗粒的质量控制方法更好地对其质量进行控制具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种新的双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法，该方法能够反映双鱼颗粒的主要成分含量的变化情况，用于更好地评价和控制双鱼颗粒的质量。本专利技术所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的。本专利技术是一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法，其特点是，该方法采用以下方法建立双鱼颗粒定量指纹图谱：采用高效液相色谱法，色谱条件与系统适应性试验：色谱柱C18，以乙腈为流动相A，以体积浓度0.05％三氟乙酸为流动相B，梯度洗脱，0～50min，5％A～70％A；流速每分钟为0.7～0.9ml；检测波长为230nm和327nm；柱温25～35℃。本专利技术所述的一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法中：优选以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱：KromasilC18，柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为3.5μm。优选流速每分钟为0.8ml；优选柱温30℃。本专利技术所述的一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法，其进一步优选的技术方案是，所述的梯度洗脱程序如下：时间min乙腈％0.05％三氟乙酸％0～105→1095→9010～1510→1590→8515～2515→2585→7525～3425→3475→6634～4534→7066→3045～507030本专利技术所述的一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法，其进一步优选的技术方案是：建立双鱼颗粒定量指纹图谱后，按相同的方法测定待测双鱼颗粒样品的定量指纹图谱，然后将其与上述双鱼颗粒的定量指纹图谱比较，相似度不低于0.90。本专利技术所述的一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法，其进一步优选的技术方案是：对照品溶液的制备：精密称取新绿原酸对照品、绿原酸对照品、隐绿原酸对照品、芍药苷对照品、异绿原酸B对照品、异绿原酸A对照品、异绿原酸C对照品适量，加70％甲醇制成每1ml含新绿原酸18μg、绿原酸110μg、隐绿原酸25μg、芍药苷30μg、异绿原酸B16μg、异绿原酸A30μg、异绿原酸C58μg的混合对照品溶液，即得。供试品溶液的制备：取本品适量，加入70％甲醇80-120倍体积超声，称重，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，即得；优选的供试品溶液的制备方法为：取本品5袋，混匀，研细，取约0.25g，置具塞锥形瓶中，精密加入70％甲醇25ml，超声提取30分钟，放冷，称重，用70％甲醇补足减失的重量，摇匀，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，记录50min图谱，即得。优选的超声提取的工艺参数为250W，40KHz。本专利技术所述的一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法，其进一步优选的技术方案是，每克双鱼颗粒的有效成份含量标准为：含新绿原酸不得少于1.45mg，含绿原酸不得少于9.20mg，含隐绿原酸不得少于1.50mg，含芍药苷不得少于3.40mg，含异绿原酸B不得少于1.10mg，含异绿原酸A不得少2.10mg，异绿原酸C不得少于3.0mg。本专利技术所述的一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法，优选的待测双鱼颗粒样品的定量指纹图谱的17个共有峰相对保留时间控制范围如下：优选的17个共有峰的相对峰面积控制范围如下：与现有技术相比，本专利技术提供一种新的双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法，该方法能够反映双鱼颗粒的主要成分含量的变化情况，用于更好地评价和控制双鱼颗粒的质量。主要表现为：本专利技术方法采用的色谱条件所获得图谱能较全面的反映本品化学成分，因此能作为指纹图谱较好的控制本品质量；而现有技术方法所获得图谱中色谱峰较少，不能有效控制产品质量。本专利技术采用的色谱条件所获得图谱中各色谱峰分离较好，可同时进行定量测定，本次提供资料根据对照品获得情况对7个化学成分进行了定量控制；而现有技术所获得图谱中仅5个主要色谱峰分离较好，同时进行多成分含量测定较难以实现。本专利技术采用的色谱柱为常用色谱柱，普通高效液相色谱仪即可实现；而现有技术需采用超高压液相色谱柱和超高效液相色谱仪才能实现。而且本专利技术采用最适合的洗脱程序、流速、流动相中酸浓度均可以实现更好地评价和控制双鱼颗粒的质量。附图说明图1为波长的考察对比图谱；图2为洗脱程序的考察对比图谱(230nm)；图3为洗脱程序的考察对比图谱(327nm)；图4流动相系统的考察对比图谱(230nm)；图5流动相系统的考察对比图谱(327nm)；图4、图5中，A：乙腈-0.05％三氟乙酸水溶液，B：乙腈-0.05％磷酸水溶液，C：乙腈-0.3％甲酸水溶液；图6双鱼颗粒指纹图谱和含量测定色谱柱选择图谱(230nm)；图7双鱼颗粒指纹图谱和含量测定色谱柱选择图谱(327nm)；图6、图7中：A-KromasilC18(250×4.6mm，3.5μm)，B-KromasilC18(150×4.6mm，3.5μm)，C-KromasilC18(250×4.6mm，5μm)，D-AgilentZorbaxEclipseC18(4.6×150mm，5μm)；图8为柱温的考察对比图谱(230nm)；图9为柱温的考察对比图谱(327nm)；图10为流速的考察对比图谱(230nm)；图11为流速的考察对比图谱(327nm)；图12为延长时间测试滞后峰图谱；图13为双鱼颗粒对照指纹图谱。具体实施方式以下参照附图，进一步描述本专利技术的具体技术方案，以便于本领域的技术人员进一步地理解本专利技术，而不构成对其权利的限制。实施例1，一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法，该方法采用以下方法建立双鱼颗粒定量指纹图谱：采用高效液相色谱法，色谱条件与系统适应性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱：KromasilC18，柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为3.5μm；以乙腈为流动相A，以0.05％三氟乙酸为流动相B，梯度洗脱，0～50min，5％A～70％A；流速每分钟为0.8ml；检测波长为230nm和327nm；柱温30℃。梯度洗脱程序如下：建立建立双鱼颗粒定量指纹图谱后，按相同的方法测定待测双鱼颗粒样品的定量指纹图谱，然后将其与上述双鱼颗粒的定量指纹图谱比较，相似度不低于0.90。其中：对照品溶液的制备：精密称取新绿原酸对照品、绿原酸对照品、隐绿原酸对照品、芍药苷对照品、异绿原酸B对照品、异绿原酸A对照品、异绿原酸C对照品适量，加70％甲醇制成每1ml含新绿原酸18μg、绿原酸110μg、隐绿原酸25μg、芍药苷30μg、异绿原酸B16μg、异绿原酸A30μg、异绿原酸C58μg的混合对照品溶液，即得。供本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法，其特征在于，该方法采用以下方法建立双鱼颗粒定量指纹图谱：采用高效液相色谱法，色谱条件与系统适应性试验：色谱柱C18，以乙腈为流动相A，以体积浓度0.05%三氟乙酸为流动相B，梯度洗脱，0~50min， 5%A~70%A；流速每分钟为0.7~0.9 ml；检测波长为230 nm和327 nm；柱温25~35℃。

【技术特征摘要】
1.一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法，其特征在于，该方法采用以下方法建立双鱼颗粒定量指纹图谱：采用高效液相色谱法，色谱条件与系统适应性试验：色谱柱C18，以乙腈为流动相A，以体积浓度0.05%三氟乙酸为流动相B，梯度洗脱，0~50min，5%A~70%A；流速每分钟为0.7~0.9ml；检测波长为230nm和327nm；柱温25~35℃。2.根据权利要求1所述的一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法，其特征在于：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱：KromasilC18，柱长为250mm,内径为4.6mm，粒径为3.5μm。3.根据权利要求1所述的一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法，其特征在于：流速每分钟为0.8ml；柱温30℃。4.根据权利要求1所述的一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法，其特征在于，梯度洗脱程序如下：时间min乙腈%0.05%三氟乙酸%0～105→1095→9010～1510→1590→8515～2515→2585→7525～3425→3475→6634～4534→7066→3045～5070305.根据权利要求1－4任何一项所述的一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法，其特征在于，建立双鱼颗粒定量指纹图谱后，按相同的方法测定待测双鱼颗粒样品的定量指纹图谱，然后将其与上述双鱼颗粒的定量指纹图谱比较，相似度不低于0.90。6.根据权利要求5所述的一种双鱼颗粒定量指纹图谱检测方法，其特征在于：对照品溶液的制备：精密称取新绿原酸对照品、绿原酸对照品、隐绿原酸对照品、芍药苷对照品、异绿原酸B对照品、异绿原酸A对照品、异绿原酸C对照品适量，加70%甲醇制成每1ml含新绿原酸18μg、绿原酸110μg、隐绿原酸25μg、芍药苷30μg、异绿原酸B16μg、异绿原酸A30μg、异绿原酸C58μg的混合对照品溶液，即得;供试品溶液的制备：取本品适量，加入70%甲醇80-120倍体积超声，称重，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，即得；测定法：分别精密...

【专利技术属性】
技术研发人员：萧伟，秦建平，郎悦，林夏，仲艳，于桂芳，李家春，王振中，
申请(专利权)人：江苏康缘药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32