基于 PD‑L1 抗体偶联化疗药物的ADC 及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于药物研发领域，具体涉及一种基于PD‑L1抗体偶联化疗药物的ADC及其制备方法和应用。本发明专利技术基于抗体偶联技术，利用PD‑L1抗体的靶向性但不仅限于PD‑L1抗体和抗肿瘤药物美登素（DM1）及其类似物的抗癌性能，形成免疫‑药物体系；该免疫‑药物体系不仅保留了单个PD‑L1抗体的靶向性和单独化疗药物对肿瘤的强杀伤性，免疫‑药物体系也使大量的DM1有效富集到肿瘤部位，减少药物的使用剂量，从而降低药物对正常组织的杀伤，降低药物的毒副作用。

PD L1 antibody conjugated with chemotherapy drug ADC and its preparation method and application based on

The invention belongs to the field of drug development, in particular to a PD L1 antibody conjugated with chemotherapy drug ADC and its preparation method and application based on. The invention of antibody coupling technology based on the use of PD L1 antibody targeting but not limited to PD L1 antibody and anti tumor drug maytansine (DM1) anti-cancer properties and its analogues, the formation of the immune system immune drugs; drug system not only retains the single PD L1 antibody targeting and separate chemotherapy drugs on tumor strong destruction, immune system drugs also make a lot of DM1 enriched effectively to the tumor site, reduce the dose of drugs, thereby reducing drug destruction of normal tissue, reduce the side effects of drugs.

【技术实现步骤摘要】
基于PD-L1抗体偶联化疗药物的ADC及其制备方法和应用
本专利技术属于药物研发领域，具体涉及一种基于PD-L1抗体偶联化疗药物的ADC及其制备方法和应用。
技术介绍
肿瘤是当今严重威胁人类健康的三大疾病之一。2012年全球癌症患者和死亡病例都在不断增加，新增癌症病例有近一半出现在亚洲，其中大部分在中国，中国新增癌症病例高居第一位。在肝、食道、胃和肺等4种恶性肿瘤中，中国新增病例和死亡人数均居世界首位。同时全国肿瘤登记中心发布的2012年数据显示，中国每年新增癌症病例约350万，约有250万人因此死亡。恶性胃癌治疗效果差，晚期转移率高，预后多不佳。目前临床上多采用的常规治疗方法如手术治疗、放疗、化疗和免疫治疗，但是化疗或放疗不能改变患者的生存期，即便是对首次化疗敏感的癌症患者来说，也很容易复发或产生耐药。而且复发后再次进行化疗或放疗时，疗效则明显降低。因此，对多数复发无法避免、治愈率极低的患者而言，低毒性、更有效的靶向治疗就显得非常必要。近年来，针对细胞表面分子的抗体靶向性治疗已取得了巨大进展。在抗肿瘤治疗过程中，由于抗体靶向治疗具有特异性高、副作用小、半衰期长等特点，已经成为一种非常有发展前途的肿瘤生物治疗的方法。但是单克隆抗体存在对肿瘤作用温和效果低。
技术实现思路
为了克服现有技术中所存在的问题，本专利技术的目的在于提供一种基于PD-L1抗体偶联化疗药物的ADC及其制备方法和应用。为了实现上述目的以及其他相关目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术的第一方面，提供一种抗体-药物偶联物，包括细胞毒性药物、抗体以及偶联抗体和毒性药物的偶联链。优选地，所述细胞毒性药物选自但不限于美登素DM1。优选地，所述抗体选自但不限于程序性死亡配体-1PD-L1。优选地，所述偶联链选自但不限于3-(2-吡啶二硫代)丙酰肼PDPH。优选地，美登素DM1与程序性死亡配体-1PD-L1的摩尔比例范围是(1～2)：1。优选地，偶联链PDPH的-S-S-基团与美登素DM1的-SH基团连接。优选地，偶联链PDPH的-NH2基团与程序性死亡配体-1PD-L1的-COOH基团连接。本专利技术的第二方面，提供了前述抗体-药物偶联物的制备方法，包括：(1)合成带有酰肼基团的美登素DM1(DM1-PDPH)：取美登素DM1和3-(2-吡啶二硫代)丙酰肼PDPH，溶解，反应；(2)制备氧化的程序性死亡配体-1PD-L1：将PD-L1与氧化缓冲溶液混合，进行氧化；(3)制备PD-L1-DM1：将步骤(1)获得的带有酰肼基团的美登素DM1与步骤(2)获得的氧化的程序性死亡配体-1混合，反应，获得PD-L1-DM1。优选地，步骤(1)中，取美登素DM1和3-(2-吡啶二硫代)丙酰肼PDPH溶解于甲醇中。优选地，步骤(2)中，所述氧化缓冲溶液为碘酸钠氧化缓冲溶液。优选地，步骤(3)中，所述反应在室温下进行。本专利技术的第三方面，提供了前述抗体-药物偶联物在制备肿瘤治疗药物中的用途。优选地，所述肿瘤治疗药物选自但不限于肺癌治疗药物。本专利技术的第四方面，提供一种肿瘤治疗药物组合物，所述药物组合物的有效成分中含有前述抗体-药物偶联物。优选地，所述药物组合物中，前述抗体-药物偶联物为该药物组合物的有效成分之一或唯一有效成分。优选地，上述药物组合物中还包含药学上可接受的载体。本专利技术药物组合物使用时，前述抗体-药物偶联物作为唯一有效成分，或者前述抗体-药物偶联物作为有效成分之一，可与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混合制成不同给药途径的药物剂型。优选地，所述药物组合物的制剂形式为片剂、胶囊、散剂、颗粒剂、糖浆剂、溶液剂、口服液、醑剂、酊剂、气雾剂、粉雾剂、注射剂、注射用无菌粉末，或者栓剂。上述制剂类型可以按照药剂学(第六版，人民卫生出版社，崔福德)中的相关定义理解，上述制剂的制备可以按照药剂学(第六版，人民卫生出版社，崔福德)中的相关制剂的方法配制。所述药物组合物的使用剂量均在临床医生所熟知的范围内。前述抗体-药物偶联物作为活性成分的有效剂量可随给药模式和疾病的严重程度而变化。对大部分大型哺乳动物而言，每天有效成分前述抗体-药物偶联物的服用剂量约为0.01～1000mg。优选的，成人临床给药量的范围为0.01-200mg/日，更优选为0.05-100mg/日。本专利技术的第五方面，提供一种治疗肿瘤的方法，包括将前述肿瘤治疗药物施用于患者。与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：本专利技术的基于抗体偶联技术旨在利用PD-L1抗体的靶向性但不仅限于PD-L1抗体和抗肿瘤药物美登素(DM1)及其类似物的抗癌性能，形成免疫-药物体系；该免疫-药物体系不仅保留了单个PD-L1抗体的靶向性和单独化疗药物对肿瘤的强杀伤性，免疫-药物体系也使大量的DM1有效富集到肿瘤部位，减少药物的使用剂量，从而降低药物对正常组织的杀伤，降低药物的毒副作用。附图说明图1：带有酰肼基团的DM1化合物(DM1-PDPH)合成示意图。图2：PD-L1-DM1的合成示意图。图3：DM1的标准曲线。图4：是PD-L1-DM1体外细胞毒性效果图。图5：是PD-L1-DM1的抗体活性流式检测图。图6：是PD-L1-DM1的抗体活性激光共聚焦检测图。图7：是PD-L1-DM1体内抑瘤效果图。图8是PD-L1-DM1治疗肿瘤效果图。具体实施方式一、抗体-药物偶联物(antibody-drugconjugates，ADC)抗体-药物偶联物(antibody-drugconjugates，ADC)是新一代抗体靶向治疗药物，主要用于癌症和肿瘤的治疗。从结构上，ADC药物由“弹头”药物(细胞毒药物)、抗体以及偶联抗体和药物的偶联链3部分组成，通过化学偶联的方法将细胞毒性药物连接到抗体蛋白上。得益于稳定结合子型的ADCs能够确切地将药物携带至细胞内，而在外周血和细胞表面很少降解；在同等给药剂量下，使用稳定型ADCs更像缓释剂一样能够长时间在体保持有效的杀伤浓度而不释放出多余的毒素，从而使得ADCs在抗肿瘤中具有更高效的杀伤效应和更小的不良反应。因此，抗体-药物偶联物(antibody-drugconjugates，ADC)一定程度上既克服了抗体杀伤不足的同时，也明显降低了化疗药物对正常组织的毒副作用。二、PD-L1PD-L1全称为ProgrammedDeathLigand-1(程序性死亡配体-1)广泛存在于肿瘤细胞上。目前诸多研究表明，多种人类肿瘤大量表达的PD-L1分子与患者临床病理特征及预后紧密相关，成为肿瘤检出和预后判断的新的生物学指标。肿瘤细胞使用这种配体来阻断PD-1和T细胞上的B7.1的相互识别，从而逃避免疫系统的监控。三、DM1DM1也称美登素DM1，英文名MaytansineDM1。CAS号：139504-50-0。四、PDPHPDPH是指3-(2-吡啶二硫代)丙酰肼，英文名是3-(2-Pyridyldithio)propionylhydrazide(PDPH)。五、PD-L1-DM1本专利技术的PD-L1-DM1，属于抗体-药物偶联物，包括细胞毒性药物、抗体以及偶联抗体和毒性药物的偶联链。所述细胞毒性药物选自但不限于美登素DM1。所述抗体选自但不限于程序性死亡配体-1PD-L1。所述偶联链选自但不限于3-(2-吡啶二硫本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种抗体‑药物偶联物，包括细胞毒性药物、抗体以及偶联抗体和毒性药物的偶联链。

【技术特征摘要】
1.一种抗体-药物偶联物，包括细胞毒性药物、抗体以及偶联抗体和毒性药物的偶联链。2.根据权利要求1所述的抗体-药物偶联物，其特征在于，所述细胞毒性药物选用美登素DM1；所述抗体选用程序性死亡配体-1PD-L1。3.根据权利要求2所述的抗体-药物偶联物，其特征在于，所述偶联链选用3-(2-吡啶二硫代)丙酰肼PDPH。4.根据权利要求2所述的抗体-药物偶联物，其特征在于，美登素DM1与程序性死亡配体-1PD-L1的摩尔比例范围是(1～2)：1。5.根据权利要求3所述的抗体-药物偶联物，其特征在于，偶联链PDPH的-S-S-基团与美登素DM1的-SH基团连接。6.根据权利要求3所述的抗体-药物偶联物，其特征在于，偶联链PDPH的-NH2基团与程序性死亡配体-1PD-L1的-COOH基团连接。7.如权利要求1～6任一项所述的抗体-药物偶联物的制备方法，包括：(1)合成带有酰肼基...

【专利技术属性】
技术研发人员：张莉，张付雷，王颖，董霞，
申请(专利权)人：上海干云生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31