改善困难梭状杆菌感染症状的发酵乳酸杆菌GMNL‑296组合物及用途制造技术

本发明专利技术公开一种改善困难梭状杆菌感染症状的发酵乳酸杆菌GMNL‑296组合物及用途。所述发酵乳酸杆菌GMNL‑296可以促进抗发炎细胞激素IL‑10及调节型T细胞相关转录因子的表达而改善体重减轻及肠道异常的症状。

To improve the fermentation of Lactobacillus GMNL 296 Clostridium difficile infection symptoms, composition and use

【技术实现步骤摘要】
改善困难梭状杆菌感染症状的发酵乳酸杆菌GMNL-296组合物及用途
本专利技术是有关于一种改善困难梭状杆菌感染症状的发酵乳酸杆菌GMNL-296组合物与用途，特别是关于一种可治疗或预防困难梭状杆菌感染症状的抗发炎的发酵乳酸杆菌GMNL-296组合物与用途。
技术介绍
困难梭状杆菌(Clostridiumdifficile)，为造成住院病人因使用抗生素而导致腹泻的主要病原菌，症状从轻微腹泻到严重肠道发炎如伪膜性肠炎(pseudomembranousenteritis)、毒性巨肠症(toxicmegacolon)，菌血症，严重甚至可能造成死亡。困难梭状杆菌可通过孢子的型式散播，过去的研究发现困难梭状杆菌感染(C.difficileinfection；CDI)感染率有逐渐上升的趋势(PxZheng,GenomeAnnounc.2013.1:e00149-12.)。根据美国疾病管制局的统计，每年有十万名美国病患死于院内感染，其造成的死亡率正在攀升中(MFShih.,Int.J.Immunopathol.Pharmacol.2012.25:39-48.2)。目前临床上治疗困难梭状杆菌的方式，若因抗生素引起CDI的症状，则建议先停止目前使用的抗生素，再依照其疾病严重程度使用甲硝唑(metronidazole)及万古霉素(vancomycin)。然而，此两种药物在某些病人的治疗上是无效的，或者复发率较高(YCLin,2011.Antimicrob.AgentsChemother.55:1701-5.)。目前治疗的困境除了因为困难梭状杆菌产生的抗药性外，就是病人本身难以形成适当的保护性免疫反应，因此可能造成重复性感染问题。由于困难梭状杆菌在医疗照护机构的感染率逐渐升高，于治疗上又有复发的可能性。因此寻找非抗生素治疗及改善困难梭状杆菌感染已成为一个亟需重视的问题。虽然过去研究发现，某些特殊乳酸菌菌种对于困难梭状杆菌有很强的抑菌能力，藉此能改善小鼠感染困难梭状杆菌后的症状；但过去并没有任何报导指出乳酸菌能通过免疫调节的方式，用来改善困难梭状杆菌感染造成的肠炎症状。故，有必要提供一种抗发炎的发酵乳酸杆菌菌株及其组合物与使用发酵乳酸杆菌GMNL-296制造改善困难梭状杆菌感染症状的发酵乳酸杆菌组合物的用途，以解决习用技术中所存在的问题。
技术实现思路
本专利技术的主要目的在于提供一种改善困难梭状杆菌感染症状的发酵乳酸杆菌GMNL-296组合物与用途，可通过发酵乳酸杆菌(Lactobacillusfermentum)GMNL-296来刺激免疫反应，以改善困难梭状杆菌造成的体重减轻及肠道不良反应。所述发酵乳酸杆菌可通过食道进入消化系统内，刺激抑制发炎的细胞激素介白质-10(Interleukin-10，IL-10)的分泌及增强调节型T细胞功能，可抑制及降低肠道发炎现象。为达成本专利技术的前述目的，本专利技术的一实施例提供一种发酵乳酸杆菌组合物，用于改善困难梭状杆菌感染症状，其包含发酵乳酸杆菌(Lactobacillusfermentum)GMNL-296，所述发酵乳酸杆菌GMNL-296以保藏编号M2016225保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)。在本专利技术的一实施例中，所述发酵乳酸杆菌GMNL-296为活菌菌株。在本专利技术的一实施例中，所述发酵乳酸杆菌组合物是一医药组合物、一营养补充品、一保健食品、一医疗食品或其组合。为达成本专利技术的前述目的，本专利技术的另一实施例提供一种使用发酵乳酸杆菌GMNL-296制造改善困难梭状杆菌感染症状的发酵乳酸杆菌组合物的用途。在本专利技术的一实施例中，发酵乳酸杆菌组合物具有促进抗发炎细胞激素IL-10分泌以及FoxP3及GATA3增加的能力。在本专利技术的一实施例中，所述发酵乳酸杆菌GMNL-296为活菌菌株。在本专利技术的一实施例中，所述困难梭状杆菌感染症状是体重减轻或肠道异常。在本专利技术的一实施例中，所述肠道异常为结肠到盲肠段长度变短。附图说明图1：本专利技术实验1的抑菌圈试验后，各菌株对于困难梭状杆菌的抑制结果比较图。图2：本专利技术的发酵乳酸杆菌菌株GMNL-296在实验2的抗发炎测试中，不同剂量对NO含量影响。图3A至3B：实验3中喂食发酵乳酸杆菌菌株GMNL-296或磷酸盐生理食盐水(PBS)对已感染困难梭状杆菌后的小鼠的影响。图4：实验3中喂食发酵乳酸杆菌菌株GMNL-296或磷酸盐生理食盐水(PBS)对肠道组织的调节型T细胞(Treg)重要转录因子FoxP3、GATA3以及可抑制发炎的细胞激素IL-10的mRNA的表现量。具体实施方式为了让本专利技术的上述及其他目的、特征、优点能更明显易懂，下文将特举本专利技术较佳实施例，并配合所附图式，作详细说明如下。此外，本专利技术所提到的单数形式“一”、“一个”和“所述”包括数个引用，除非上下文另有明确规定。数值范围(如10％至11％的A)若无特定说明皆包含上、下限值(即10％≦A≦11％)；数值范围若未界定下限值(如低于0.2％的B，或0.2％以下的B)，则皆指其下限值可能为0(即0％≦B≦0.2％)。上述用语是用以说明及理解本专利技术，而非用以限制本专利技术。本专利技术的一实施例提供一种改善困难梭状杆菌感染症状的发酵乳酸杆菌菌株，其中所述发酵乳酸杆菌菌株是指发酵乳酸杆菌(Lactobacillusfermentum)GMNL-296，且以保藏编号M2016225保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)。本专利技术的一实施例提供一种发酵乳酸杆菌组合物，其包含如上所述的改善困难梭状杆菌感染症状的发酵乳酸杆菌菌株。优选的，所述发酵乳酸杆菌组合物也可以一医药组合物、一营养补充品、一保健食品、一医疗食品或其组合的方式呈现。所述组合物可以根据有效性或方便性来考量设计成不同的形态。此外，所述组合物是以食用方式进入消化系统，可刺激免疫反应来抑制肠道发炎。本专利技术的一实施例提供了一种使用发酵乳酸杆菌GMNL-296制造改善困难梭状杆菌感染症状的发酵乳酸杆菌组合物的用途，其包含下列步骤：使用如上述的发酵乳酸杆菌GMNL-296活菌菌株，以促进调节型T细胞(Treg)相关转录因子FoxP3及GATA3，以及可抑制发炎的细胞激素IL-10的mRNA的表现量，从而改善困难梭状杆菌感染症状是体重减轻或肠道异常，其中所述肠道异常指一般为直肠、结肠至盲肠段发炎，而且外观长度变短或变粗。上述实施例中的所述发酵乳酸杆菌菌株GMNL-296主要是从人体肠道筛选分离获得的多个分离株的其中一株。利用表1的引子(SEQIDNO:1及SEQIDNO:2)进行PCR以复制多个分离株各自的16SrDNA片段，接着将其加以定序，定序完成后得到其中一株的16SrDNA基因序列如下(SEQIDNO:3)；随后，如下表2所示，由NCBI网站比对后的结果可知，所述分离株的16SrDNA序列与发酵乳酸杆菌菌株(Lactobacillusfermentum)的16SrDNA序列相似，相似度均为99％以上，故可知此菌株GMNL-296确实为发酵乳酸杆菌属。表1、引子序列对照引子序列编号序列PAFSEQIDNO:1AGAGTTTGATCCTGGCTCAG536RSEQIDNO:2GTATTACCGCGGCTGCTG表2、菌株序列比对表所述发酵乳酸杆菌菌株GM本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种发酵乳酸杆菌组合物，用于改善困难梭状杆菌感染症状，其特征在于：所述发酵乳酸杆菌组合物包含发酵乳酸杆菌(Lactobacillus fermentum)GMNL‑296，且所述发酵乳酸杆菌GMNL‑296以保藏编号M 2016225保藏于中国典型培养物保藏中心。

【技术特征摘要】
2016.08.22 TW 1051267991.一种发酵乳酸杆菌组合物，用于改善困难梭状杆菌感染症状，其特征在于：所述发酵乳酸杆菌组合物包含发酵乳酸杆菌(Lactobacillusfermentum)GMNL-296，且所述发酵乳酸杆菌GMNL-296以保藏编号M2016225保藏于中国典型培养物保藏中心。2.如权利要求1所述的发酵乳酸杆菌组合物，其特征在于：所述发酵乳酸杆菌GMNL-296是活菌菌株。3.如权利要求1所述的发酵乳酸杆菌组合物，其特征在于：所述发酵乳酸杆菌组合物是一医药组合物、一营养补充品、一保健...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈奕兴，蔡宛桦，
申请(专利权)人：景岳生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：中国台湾,71