盐碱土壤修复微生物菌剂及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种盐碱土壤修复微生物菌剂及其制备方法。在农业生产过程中，由于过量使用肥料导致农产品及农业土壤营养积累，造成土壤次生盐渍化，为农业土壤生态安全及农业可持续发展带来一定问题。本发明专利技术在专用液体发酵培养基中培养耐盐微生物藤黄海球菌  A393和耐冷盐单胞菌 A413，收集发酵液离心分离除去发酵液中的水份，获得桔红色膏状菌泥，加入丙三醇和高岭土，搅拌混合均匀，获得白色固体制剂即目的产品。本发明专利技术是一种高效、经济的环境友好型盐碱土壤修复处理技术，土壤盐碱降低可达到70%以上，具有处理成本低、施工简单、无二次污染、对环境影响小等优点。

Microbial inoculant for saline alkali soil remediation and its preparation methods

The invention relates to a salt alkali soil remediation microbial agent and a preparation method. In the process of agricultural production, excessive use of fertilizers leads to the accumulation of nutrients in agricultural products and agricultural soil, resulting in secondary salinization of soil, which brings certain problems for agricultural soil ecological security and sustainable development of agriculture. The present invention in medium salt tolerant microorganisms Staphylococcus A393 and rattan the Yellow Sea cold resistant Halomonas A413 special liquid fermentation, separation from fermentation broth of fermentation liquid centrifugal water collecting, get orange paste bacteria mud, glycerol and kaolin, uniformly mixing, i.e. to obtain white solid preparation product. The invention is an efficient, economical and environment-friendly saline soil remediation and treatment technology. The soil salinity and salinity can be reduced to more than 70%, and has the advantages of low processing cost, simple construction, no two time pollution and little environmental impact.

【技术实现步骤摘要】
盐碱土壤修复微生物菌剂及其制备方法
本专利技术属于土壤生物修复
，具体涉及一种盐碱土壤修复微生物菌剂及其制备方法。
技术介绍
良好土壤质量作为保障农业丰收的重要手段，在农业生产中发挥着重要的作用。大量化学肥料使用存在的主要问题是化学肥料不合理使用、土壤中营养严重失衡、土壤生态环境恶化，造成作物长势下降、减产等问题。微生物修复是利用特定微生物体的代谢吸收、转化、降解盐碱离子成分，实现土壤生态平衡、生态效应恢复的生物措施。具有高效经济、无二次污染等特点。该技术已应用于各类土壤修复领域，表现出了较高的应用价值，国内外有关行业部门专家认为生物修复技术是生态环境保护领域最有价值和最具生命力的处理技术，是农业土壤修复的主要发展方向，也是解决农业次生盐渍化土壤生态修复的有效手段。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种盐碱土壤修复微生物菌剂及其制备方法，通过生物修复的方式对盐碱化土壤进行有效修复。本专利技术所采用的技术方案是：一种盐碱土壤修复微生物菌剂及其制备方法的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一：发酵：调节液体发酵培养基A的pH至7.8-8.5，并进行常规无菌处理，按液体质量8-13%无菌操作接入藤黄海球菌A393，恒定温度33±1℃，搅拌速度120-250rpm，通风量0.25-0.35M3/min，罐压0.03-0.05MPa，持续发酵44-50hr，显微镜检测计数发酵液中细胞数达(2.5-5.0)×109个/mL时，按液体质量10-15%无菌操作接入耐冷盐单胞菌A413恒定温度35±1℃，搅拌速度180-450rpm，通风量0.36-0.45M3/min，罐压0.03-0.05MPa，持续发酵88-96hr，显微镜检测计数发酵液中细胞数达(5.5-9.0)×1010个/mL时终止发酵。步骤二：菌体细胞分离：收集步骤一液体发酵培养基A的藤黄海球菌A393和耐冷盐单胞菌A413发酵液，用高速冷冻离心机离心分离除去发酵液中水份，获得桔红色膏状菌泥；步骤三：制剂制取：在步骤二获得的桔红色膏状菌泥中，按照菌体：丙三醇体积比1:(0.65-1.56)的比例加入丙三醇，并搅拌混合均匀，再按照菌体：高岭土体积比1：(0.8-1.5)的比例加入细度为200目高岭土，搅拌混合均匀，获得白色固体制剂即目的产品。步骤一中的Marinococcusluteus藤黄海球菌A393于2014年11月6日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO.9937。步骤一中的Halomonasfrigidi耐冷盐单胞菌A413于2014年11月6日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO.9941。步骤一中的液体发酵培养基A的配方如下：葡萄糖15-20g/L，酪蛋白胨2.0-5.0g/L，酵母提取物3.0-8.0g/L，MgSO4·7H2O0.5-0.7g/L，NaCl5.0-8.0g/L，K2HPO4·3H2O0.5-1.0g/L，FeSO4·2H2O0.2-0.5mg/L，MnSO4·2H2O0.2-0.5mg/L色氨酸0.03-0.05mg/L余量水定容至1L。本专利技术具有以下优点：本专利技术是一种高效、经济的环境友好型土壤修复技术，核心技术是高效降解菌株的筛选和功能菌剂的制备，本专利技术使用的耐盐微生物藤黄海球菌A393和耐冷盐单胞菌A413对土壤盐碱降低可达到70%以上。本专利技术是操作简单、修复效果好、成本费用低、不影响农业生产的土壤修复技术，相比其他方法具有处理成本低、施工简单、无二次污染、对环境影响小等优点。对恢复农业土壤的生态平衡和生产力具有良好效果。生物修复技术在盐碱土壤治理的应用，能有效改善农田土壤环境，同时，对于保护农产品安全，推动农产品的绿色化、有机化及农田土壤的可持续发展具有良好的经济、社会效益。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利技术进行详细的说明。本专利技术涉及的一种盐碱土壤修复微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：步骤一：微生物发酵：调节液体发酵培养基A的pH至7.8-8.5，并进行常规无菌处理，按液体质量8-13%无菌操作接入藤黄海球菌A393，恒定温度33±1℃，搅拌速度120-250rpm，通风量0.25-0.35M3/min，罐压0.03-0.05MPa，持续发酵44-50hr，显微镜检测计数发酵液中细胞数达(2.5-5.0)×109个/mL时，按液体质量10-15%无菌操作接入耐冷盐单胞菌A413恒定温度35±1℃，搅拌速度180-450rpm，通风量0.36-0.45M3/min，罐压0.03-0.05MPa，持续发酵88-96hr，显微镜检测计数发酵液中细胞数达(5.5-9.0)×1010个/mL时终止发酵。步骤二：菌体细胞分离：收集步骤一液体发酵培养基A的藤黄海球菌A393和耐冷盐单胞菌A413发酵液，用高速冷冻离心机离心分离除去发酵液中水份，获得桔红色膏状菌泥；步骤三：制剂制取：在步骤二获得的桔红色膏状菌泥中，按照菌体：丙三醇体积比1:（0.65-1.56）的比例加入丙三醇，并搅拌混合均匀，再按照菌体：高岭土体积比1：（0.8-1.5）的比例加入细度为200目高岭土，搅拌混合均匀，获得白色固体制剂即目的产品。步骤一中的Marinococcusluteus藤黄海球菌A393于2014年11月6日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO.9937。步骤一中的Halomonasfrigidi耐冷盐单胞菌A413于2014年11月6日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO.9941。实施例1：步骤一：微生物发酵：调节液体发酵培养基A的pH至7.8，并进行常规无菌处理，按液体质量13%无菌操作接入藤黄海球菌A393，恒定温度33±1℃，搅拌速度250rpm，通风量0.25M3/min，罐压0.05MPa，持续发酵50hr，显微镜检测计数发酵液中细胞数达2.5×109个/mL时，按液体质量15%无菌操作接入耐冷盐单胞菌A413恒定温度35±1℃，搅拌速度180rpm，通风量0.45M3/min，罐压0.05MPa，持续发酵88hr，显微镜检测计数发酵液中细胞数达5.5×1010个/mL时终止发酵。步骤二：菌体细胞分离：收集步骤一液体发酵培养基A的藤黄海球菌A393和耐冷盐单胞菌A413发酵液，用高速冷冻离心机离心分离除去发酵液中水份，获得桔红色膏状菌泥；步骤三：制剂制取：在步骤二获得的桔红色膏状菌泥中，按照菌体：丙三醇体积比1:0.65的比例加入丙三醇，并搅拌混合均匀，再按照菌体：高岭土体积比1：0.8的比例加入细度为200目高岭土，搅拌混合均匀，获得白色固体制剂即目的产品。实施例2：步骤一：微生物发酵：调节液体发酵培养基A的pH至8.0，并进行常规无菌处理，按液体质量10%无菌操作接入藤黄海球菌A393，恒定温度33±1℃，搅拌速度200rpm，通风量0.30M3/min，罐压0.045MPa，持续发酵48hr，显微镜检测计数发酵液中细胞数达3.0×109个/mL时，按液体质量12%无菌操作接入耐冷盐单胞菌A413恒定温度35±1℃，搅拌速度350rpm，通风量0.4M3/m本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种盐碱土壤修复微生物菌剂及其制备方法的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一：发酵：调节液体发酵培养基A的pH至7.8‑8.5，并进行常规无菌处理，按液体质量8‑13%无菌操作接入藤黄海球菌 A393，恒定温度33±1℃，搅拌速度120‑250rpm，通风量0.25‑0.35M

【技术特征摘要】
1.一种盐碱土壤修复微生物菌剂及其制备方法的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一：发酵：调节液体发酵培养基A的pH至7.8-8.5，并进行常规无菌处理，按液体质量8-13%无菌操作接入藤黄海球菌A393，恒定温度33±1℃，搅拌速度120-250rpm，通风量0.25-0.35M3/min，罐压0.03-0.05MPa，持续发酵44-50hr，显微镜检测计数发酵液中细胞数达(2.5-5.0)×109个/mL时，按液体质量10-15%无菌操作接入耐冷盐单胞菌A413恒定温度35±1℃，搅拌速度180-450rpm，通风量0.36-0.45M3/min，罐压0.03-0.05MPa，持续发酵88-96hr，显微镜检测计数发酵液中细胞数达(5.5-9.0)×1010个/mL时终止发酵；步骤二：菌体细胞分离：收集步骤一液体发酵培养基A的藤黄海球菌A393和耐冷盐单胞菌A413发酵液，用高速冷冻离心机离心分离除去发酵液中水份，获得桔红色膏状菌泥；步骤三：制剂制取：在步骤二获得的桔红色膏状菌泥中，按照菌体：丙三醇体积比1:(0.65-1.56)的比例加入丙三醇，并搅拌混合均匀，再按照菌体：高岭土体积比1：(0.8-1.5)的比例加入细度为200目高岭土，...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙晓宇，陈锐，李玥，赵玲侠，瞿佳，沈卫荣，
申请(专利权)人：陕西省微生物研究所，
类型：发明
国别省市：陕西,61