富集乳酸菌及酵母菌的固态共生培养基及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种富集乳酸菌及酵母菌的固态共生培养基，包括基料和辅料，其中，基料包括以下原料：豆粕粉、玉米粉、糖蜜，且质量比依次为90:(4～6):(4～6)；辅料包括以下原料：44～46wt％纯净水、0.8～1.2wt％复合菌液、0.4～0.6wt％无水乙酸钠、0.15～0.25wt％柠檬酸氢二氨、0.015～0.025wt％七水硫酸镁，且辅料中各原料的用量均为基料总重量的重量百分比。本发明专利技术能同时满足酵母菌和乳酸菌繁殖的需要，稳定性好，成本低，可作为动物饲料或其添加成分，促进动物消化吸收，增收增产。

Solid-state symbiotic medium for enriching lactic acid bacteria and yeast and its preparation methods

The invention discloses a method for enrichment of lactic acid bacteria and yeast solid symbiotic culture medium, including base materials and auxiliary materials, wherein the base material comprises the following raw materials: soybean powder, corn powder, molasses, and the mass ratio were 90: (4~6): (4~6); material comprises the following raw materials: 44 ~ 46wt%, pure water 0.8 ~ 1.2wt% composite bacteria liquid, 0.4 ~ 0.6wt%, 0.15 ~ 0.25wt% sodium acetate anhydrous citric acid hydrogen diamine, 0.015 ~ 0.025wt% seven Magnesium Sulfate water, raw materials and accessories in the amount are weight percent of the total weight of the base material. The invention can simultaneously satisfy the needs of yeast and Lactobacillus reproduction, has good stability and low cost, and can be used as animal feed or its added ingredients, so as to promote animal digestion and absorption, increase yield and increase production.

【技术实现步骤摘要】
富集乳酸菌及酵母菌的固态共生培养基及其制备方法
本专利技术涉及微生物领域，具体是一种富集乳酸菌及酵母菌的固态共生培养基及其制备方法。
技术介绍
二十一世纪是生物技术的鼎盛时代，随着现代农业的快速发展，生物技术已成为农业技术革命的重要组成部分。特别是近年来生物技术的不断完善和成熟，生物技术也已成为畜牧业发展的必然选择和强大动力。畜牧业领域成为现代生物技术应用最广阔、最活跃、最富挑战性的领域。生物技术在畜禽品种培育、遗传资源保护利用、饲料资源开发及疾病预防和诊断等方面应用广泛，发挥着越来越重要的作用。并且，随着人们生活水平和思想觉悟的提高，环境问题日益受到重视，滥用抗生素、激素和违禁药品饲喂畜禽导致的食品安全事件日益受到政府和广大消费者关注。新型、绿色、无公害的生物发酵饲料可以解决饲料安全带来的肉食品安全问题、可以实现现代化无抗养殖新模式、可以降低养殖过程中畜禽产生的粪污废水污染而受到日益关注。生物发酵饲料是以微生物、复合酶为生物饲料发酵剂菌种，将饲料原料转化为微生物菌体蛋白、生物活性小肽类氨基酸、微生物活性益生菌、复合酶制剂为一体生物发酵饲料。其营养价值高、可提高动物适口性、改善动物肉质、提高动物免疫力，促进动物消化和营养吸收。生物发酵饲料的关键即是获得高活性、高密度、高稳定性的益生菌，目前主要用于饲料发酵及作为饲料添加剂的益生菌有乳酸菌、酵母菌及芽孢杆菌等。其中，乳酸菌是一类可发酵碳水化合物而主要生成大量乳酸的细菌的总称，通常都是革兰氏阳性菌及非病原性细菌。乳酸菌在生长代谢的过程中，会产生供自身生长的酶类，还可以产生特殊功能的酶，如双歧因子不仅能够促进双歧杆菌的生长，还可以产生有机酸，降低胃肠道内的pH值，对调节胃肠道菌群平衡、提高机体免疫力有积极的作用。酵母菌一般泛指能发酵糖类并以芽殖或裂殖的方式进行无性繁殖的一类单细胞真菌。在农业方面，酵母菌可用于单细胞蛋白(SCP)的生产以及动物饲料的发酵。酵母菌和乳酸菌拥有丰富的酶系和多种经济价值很高的生理活性物质，是继动物蛋白和植物蛋白后的另一种重要蛋白质来源，其发酵产品是优质的饲料添加剂，因此，具有良好的开发利用价值。对于菌体培养有液态发酵培养和固态发酵培养，目前国内获得高含量乳酸菌及酵母菌的工艺普遍为液态发酵培养且制备工艺已经相对成熟和普遍，而固态发酵培养由于其发酵条件难控制、发酵期间质热传递不均匀、培养时间长、产量及产能低受到的关注和研究较少。但在讲究低成本高效益的畜牧及饲料行业，基质原料成本低廉、基质处理简单、发酵培养工艺简便的固态发酵培养方式随着现代生态养殖发展的需要也日渐受到重视和关注。如何克服固态发酵培养的上述缺陷、发展可规模化生产的培养方法成为固态发酵培养急需解决的问题。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。本专利技术还有一个目的是提供富集乳酸菌及酵母菌的固态共生培养基，其能同时满足酵母菌和乳酸菌繁殖的需要，稳定性好，成本低，可作为动物饲料或其添加成分，促进动物消化吸收，增收增产。为了实现根据本专利技术的这些目的和其它优点，一种富集乳酸菌及酵母菌的固态共生培养基，包括基料和辅料，其中，基料包括以下原料：豆粕粉、玉米粉、糖蜜，且质量比依次为90:(4～6):(4～6)；辅料包括以下原料：44～46wt％纯净水、0.8～1.2wt％复合菌液、0.4～0.6wt％无水乙酸钠、0.15～0.25wt％柠檬酸氢二氨、0.015～0.025wt％七水硫酸镁，且辅料中各原料的用量均为基料总重量的重量百分比。优选的是，所述的富集乳酸菌及酵母菌的固态共生培养基的制备方法，包括以下步骤：步骤一、将上述重量的糖蜜溶解于上述重量的纯净水中，制成糖蜜水，然后加入上述重量的无水乙酸钠、上述重量的柠檬酸氢二氨、上述重量的七水硫酸镁，混合均匀，得到第一混合液，备用；步骤二、将步骤一制备的第一混合液与上述重量的的豆粕粉、上述重量的玉米粉混合均匀后，再加入上述重量的复合液体菌液混合均匀，制得初混物，将初混物于37℃恒温密封发酵48h，制得固态共生培养基。优选的是，复合菌液通过以下方法制得：a、将糙米洗净后蒸煮成糙米饭；b、将红糖溶解后，在压力为0.1MPa、温度为121℃下杀菌处理5min，制得红糖水；c、将苹果洗净后切块，在压力为0.1MPa、温度为121℃下杀菌处理5min，捣碎，制成苹果泥；d、将糙米饭、红糖水、苹果泥以及蒸馏水混合均匀，制得复合菌液；其中，糙米、红糖、苹果以及蒸馏水的比例为5：6：2.5：120。优选的是，步骤a中糙米洗净后、蒸煮前进行了如下处理：分别将洗净的皇帝柑的果皮以及去皮去核后的龙眼肉搅碎，与洗净后的糙米按质量比为1:2:4混合，于36℃恒温密封静置2h，再加入13重量份的南瓜汤，调节pH为5.5，然后依次间隔加入0.2重量份的纤维素酶、0.5重量份的淀粉酶、0.7重量份的蛋白酶进行酶解，间隔时间为1h，酶解时间为4h，酶解后进行蒸煮得到糙米饭，其中，南瓜汤由过筛220目的南瓜子粉溶于25℃的蒸馏水中制成，其质量浓度为450kg/m3。优选的是，步骤一中在制备第一混合液时还向糖蜜水中加入了2重量份的海带碎片、1重量份的橄榄果肉提取液、3重量份的椰子粉，其中，橄榄果肉提取液是将成熟的橄榄果去核后粉碎、打浆、过滤，将滤液采用功率为50W的超声波细胞破碎仪进行水浴浸提45min，制得浸提液即为橄榄果肉提取液，椰子粉是将新鲜的椰子肉经研磨、喷雾干燥后制得；步骤二中对初混物进行恒温密封发酵前，还进行了如下处理：在初混物中加入3重量份的鸡蛋清液、1.5重量份的竹醋液、5重量份的多孔木渣，混合均匀，并采用HAc-NaAc缓冲溶液调节pH为5.8。优选的是，超声波细胞破碎仪的超声波频率为20KHz，喷雾干燥的进风温度为170℃、出风温度为80℃。优选的是，所述多孔木渣是直径为2mm的具有多个贯穿孔的木质球形颗粒。本专利技术至少能达到以下有益效果：1.本专利技术的制得的固态共生培养基中富含乳酸菌和酵母菌，可以高效率的将饲料中畜禽不易消化的大分子物质降解为畜禽易于消化吸收的小分子物质，提高饲料的转化率、畜禽对饲料的消化率及吸收率，有效降低饲料中的抗营养因子水平；另外，我们培养的乳酸菌可定植于畜禽肠道内生长繁殖，其代谢产生的乳酸等有机酸能降低畜禽肠道内pH并保持在适宜的低pH肠道环境，从而抑制大肠杆菌、沙门氏菌等致病菌的生长，维持畜禽肠道菌群平衡，提高畜禽机体免疫力；再者，乳酸菌及酵母菌菌体本身即是高营养体蛋白质，含有矿物质及丰富的B族维生素等营养物质，可供畜禽机体消化吸收，促进畜禽的生长发育。2.本专利技术制得的培养基的基质无需灭菌与处理，可使乳酸菌快速繁殖生长，有效降低基料pH。乳酸菌、酵母菌在数量上占据优势可拮抗基料中本身携带的杂菌，比如：霉菌、大肠杆菌、沙门氏菌等可引起动物中毒、致病的坏菌，免除基料接种前的灭菌过程，避免基料在高温灭菌过程中营养成分的损失，降低成本和简化操作过程。3.本专利技术制得的固态共生培养基中所含的活菌数高，达到8.6×109cfu/g，另外，还含有各种有机酸、氨基酸及酶类等代谢副产物，产生多种利于动物消化吸收的营养物质，比如：多种必须氨基酸、单糖、小分子蛋白、多种维生素和矿物质元素等。4.本专利技术对糙米、皇帝柑果皮本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种富集乳酸菌及酵母菌的固态共生培养基，其特征在于，包括基料和辅料，其中，基料包括以下原料：豆粕粉、玉米粉、糖蜜，且质量比依次为90:(4～6):(4～6)；辅料包括以下原料：44～46wt％纯净水、0.8～1.2wt％复合菌液、0.4～0.6wt％无水乙酸钠、0.15～0.25wt％柠檬酸氢二氨、0.015～0.025wt％七水硫酸镁，且辅料中各原料的用量均为基料总重量的重量百分比。

【技术特征摘要】
1.一种富集乳酸菌及酵母菌的固态共生培养基，其特征在于，包括基料和辅料，其中，基料包括以下原料：豆粕粉、玉米粉、糖蜜，且质量比依次为90:(4～6):(4～6)；辅料包括以下原料：44～46wt％纯净水、0.8～1.2wt％复合菌液、0.4～0.6wt％无水乙酸钠、0.15～0.25wt％柠檬酸氢二氨、0.015～0.025wt％七水硫酸镁，且辅料中各原料的用量均为基料总重量的重量百分比。2.如权利要求1所述的富集乳酸菌及酵母菌的固态共生培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、将上述重量的糖蜜溶解于上述重量的纯净水中，制成糖蜜水，然后加入上述重量的无水乙酸钠、上述重量的柠檬酸氢二氨、上述重量的七水硫酸镁，混合均匀，得到第一混合液，备用；步骤二、将步骤一制备的第一混合液与上述重量的的豆粕粉、上述重量的玉米粉混合均匀后，再加入上述重量的复合液体菌液混合均匀，制得初混物，将初混物于37℃恒温密封发酵48h，制得固态共生培养基。3.如权利要求2所述的富集乳酸菌及酵母菌的固态共生培养基的制备方法，其特征在于，复合菌液通过以下方法制得：a、将糙米洗净后蒸煮成糙米饭；b、将红糖溶解后，在压力为0.1MPa、温度为121℃下杀菌处理5min，制得红糖水；c、将苹果洗净后切块，在压力为0.1MPa、温度为121℃下杀菌处理5min，捣碎，制成苹果泥；d、将糙米饭、红糖水、苹果泥以及蒸馏水混合均匀，制得复合菌液；其中，糙米、红糖、苹果以及蒸馏水的比例为5：6：2.5：120。4.如权利要求3所述的富集乳酸菌及酵母菌的固态共生培养基的制...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈文艳，苏善高，韦爱芬，
申请(专利权)人：广西康佳龙农牧集团有限公司，
类型：发明
国别省市：广西,45