富含呋喃香豆素的飞龙掌血提取物的制备及止血医药用途制造技术

本发明专利技术公开了一种富含呋喃香豆素的飞龙掌血提取物的制备及止血医药用途，制备步骤包括：将飞龙掌血干燥药材粉碎；往飞龙掌血干燥药材中加入乙醇，冷浸提取数次，合并冷浸提取液浓缩成浸膏1；再用乙醇回流提取药渣数次，合并回流提取液浓缩得浸膏2；将浸膏1、浸膏2或两者合并的合并浸膏依次通过萃取溶剂萃取以得到有效部位，对有效部位处理后得到提取物，所得提取物因其含有丰富的呋喃香豆素类天然活性化合物，可在制备新型止血药物中得到应用。

Preparation of furan coumarin rich extract of the dragon's Dragon's blood and the use of hemostasis medicine

The invention discloses a rich furanocoumarins Toddalia asiatica extract preparation and hemostatic medicine use, preparation method comprises the following steps: Toddalia dried medicinal powder; adding ethanol to Toddalia asiatica herbs in the dry blood, extracted several times with cold water extract is concentrated into extract and 1 ethanol extracting dregs; several times, with reflux concentrated extract extract extract 1, 2; will extract 2 or both merging in order to get the effective part extract by extraction solvent extraction, the effective parts of processed extracts, the extract containing furan coumarins because of its rich natural active compounds, can be prepared by application of a novel hemostatic drug in.

【技术实现步骤摘要】
富含呋喃香豆素的飞龙掌血提取物的制备及止血医药用途
本专利技术涉及天然药物化学领域，尤其涉及富含呋喃香豆素的飞龙掌血提取物制备技术和该提取物在止血方面的医药应用。
技术介绍
出血一般指人体皮肤、组织受伤后，血液从局部破损部位流出的现象。一般人体内有止血机制，局部受损血管发生反射性收缩或者血管受损处血小板粘集，形成凝块，从而缓慢少量出血的情况下能够自行止血。但是对于机体止血机制发生异常的人体而言，却是会引发一系列严重出血性的疾病，如血友病。应用止血药物治疗出血性顽疾是目前临床应用主要手段。飞龙掌血始载于《植物明实图考》，在我国主要分布于贵州、四川、广西、湖南等地，具有散瘀止血、祛风除湿、解毒消肿之效，其止血作用显著，故又名见血飞、血见愁、见血散等，但其药理研究并未完全揭示中药活性成分与止血药理作用、机制之间的关系，缺乏客观可靠的监控指标，临床疗效不确定。因此解决飞龙掌血在止血制药产业方面的严重开发不足，对飞龙掌血提取物活性成分进行分离分析鉴定工作是十分必要的。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种富含呋喃香豆素的飞龙掌血提取物的制备及止血医药用途。为了达到上述目的本专利技术采用如下技术方案：富含呋喃香豆素的飞龙掌血提取物的制备工艺，步骤如下：(1)将飞龙掌血干燥药材粉碎；(2)冷浸提取，往经过步骤(1)处理的飞龙掌血干燥药材中加入质量分数为50％以上乙醇水溶液，飞龙掌血干燥药材与乙醇溶液的重量比为1:0.5-50，每次冷浸提取2-14天，共冷浸提取5-15次，合并冷浸提取液浓缩成浸膏1，药渣备用；(3)回流提取，把经过步骤(1)处理的药渣用质量分数为70％以下乙醇水溶液回流提取，药渣与乙醇水溶液的重量比为1:0.5-50，每次回流提取1-5h，共提取2-6次，合并回流提取液浓缩得浸膏2；(4)用洗脱液萃取浸膏1、浸膏2或两者合并的合并浸膏，以得到有效部位，对有效部位处理后得到富含呋喃香豆素提取物，提取物包含有以下结构通式(Ⅰ)、结构通式(Ⅱ)表示的化合物：(5)进行试验动物的止血试验，以出血时间、出血量、凝血时间为评价指标，发现飞龙掌血的浸膏1、浸膏2、合并浸膏及其萃取所得的有效部位具有止血活性。进一步地，所述步骤(4)是用正丁醇萃取浸膏1、浸膏2或合并浸膏，得到正丁醇萃取部位；取正丁醇萃取部位，加水溶解，经D101大孔吸附树脂吸附，依次用水、质量分数为10％～80％乙醇水溶液、质量分数为80％以上乙醇水溶液洗脱；将得到质量分数为10％～80％乙醇水溶液洗脱部位再经过正相硅胶色谱柱,用甲醇-二氯甲烷梯度洗脱，甲醇与二氯甲烷的体积比为1:50-1:0，TLC检测合并,得到包括Fr1组分和Fr2组分的产物，其中，从Fr1组分经反复正相柱石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱和重结晶分离纯化得到茴芹内酯、佛手内酯、别欧前胡素、异茴芹内酯；Fr2组分经正相柱二氯甲烷-甲醇梯度洗脱和SephadexLH-20柱色谱分离纯化得到走马芹内脂、珊瑚菜素。茴芹内酯(pimpinellin)的结构式如式(Ⅲ)所示：佛手内酯(bergapten)的结构式如式(Ⅳ)所示：别欧前胡素(alloimperatorin)的结构式如式(Ⅴ)所示：异茴芹内酯(isopimpinellin)的结构式如式(Ⅵ)所示：走马芹内酯(moellendorffiline)的结构式如式(Ⅶ)所示：珊瑚菜素(phellopterin)的结构式如式(Ⅷ)所示：上述各化合物结构数据如下：茴芹内酯：淡黄色针状结晶,C13H10O5,HRESI-MSm/z247.0606[M+H]+。1H-NMR(400MHz,DMSO-D6)δ:8.09(1H,d,J＝9.5Hz,H-4),7.84(1H,d,J＝2.2Hz,H-2′),7.19(1H,d,J＝2.2Hz,H-3′),6.38(1H,d,J＝9.5Hz,H-3),4.02(3H,s,6-OCH3),3.92(3H,s,5-OCH3).13C-NMR(101MHz,DMSO-D6)δ:160.15(C-2),149.63(C-9),147.59(C-2'),144.68(C-5),143.08(C-7),140.62(C-4),135.18(C-6),114.26(C-3),113.97(C-8),109.63(C-10),104.42(C-3'),62.91(6-OCH3),61.59(5-OCH3)。佛手内酯：淡黄色针状结晶,C12H8O4,HRESI-MSm/z217.0498[M+H]+。1H-NMR(400MHz,Chloroform-D)δ:8.14(1H,d,J＝9.7Hz,H-4),7.58(1H,d,J＝2.4Hz,H-2'),7.12(1H,s,H-8),7.01(1H,d,J＝2.4Hz,H-3'),6.26(1H,d,J＝9.7Hz,H-3),4.25(3H,s,5-OCH3).13C-NMR(101MHz,Chloroform-D)δ:161.35(C-2),158.46(C-7),152.78(C-9),149.65(C-5),144.87(C-2’),139.37(C-4),112.74(C-6),112.62(C-3),106.48(C-10),105.13(C-3’),93.92(C-8),60.17(C-5-OCH3)。别欧前胡素：淡黄色针状结晶,C16H14O4,HRESI-MSm/z271.0961[M+H]+。1H-NMR(400MHz,DMSO-D6)δ:10.37(1H,s,C8-OH),8.15(1H,d,J＝9.9Hz,H-4),7.97(1H,d,J＝2.5Hz,H-2'),6.95(1H,d,J＝2.5Hz,H-3'),6.36(1H,d,J＝9.8Hz,H-3),5.04(1H,t,J＝6.8Hz,H-2”),3.69(2H,d,J＝6.8Hz,H-1”),1.76(3H,s,C-5”),1.59(3H,s,C-4”).13C-NMR(101MHz,DMSO-D6)δ:160.40(C-2),147.46(C-2'),145.53(C-7),142.80(C-4),141.03(C-9),131.96(C-3”),128.91(C-8),125.37(C-6),123.62(C-2”),122.56(C-5),114.16(C-10),113.79(C-3),106.64(C-3'),27.66(C-1”),25.92(C-5”),18.47(C-4”)。异茴芹内酯：淡黄色针状结晶,C13H10O5,HRESI-MSm/z247.0604[M+H]+。1H-NMR(400MHz,DMSO-D6)δ:8.12(1H,d,J＝9.8Hz,H-4),8.05(1H,d,J＝2.3Hz,H-2'),7.35(1H,d,J＝2.3Hz,H-3'),6.29(1H,d,J＝9.8Hz,H-3),4.12(3H,s,8-OCH3),3.98(3H,s,5-OCH3).13C-NMR(101MHz,DMSO-D6)δ:160.10(C-2),149.93(C-7),146.85(C-2'),144.80(C-5),143.59(C-9),140.24(C-4),127.65(C-本文档来自技高网...

【技术保护点】
富含呋喃香豆素的飞龙掌血提取物的制备工艺，其特征在于：步骤如下：(1)将飞龙掌血干燥药材粉碎；(2)冷浸提取，往经过步骤(1)处理的飞龙掌血干燥药材中加入质量分数为50％以上乙醇水溶液，飞龙掌血干燥药材与乙醇溶液的重量比为1:0.5‑50，每次冷浸提取2‑14天，共冷浸提取5‑15次，合并冷浸提取液浓缩成浸膏1，药渣备用；(3)回流提取，把经过步骤(1)处理的药渣用质量分数70％以下乙醇水溶液回流提取，药渣与乙醇水溶液的重量比为1:0.5‑50，每次回流提取1‑5h，共提取2‑6次，合并回流提取液浓缩得浸膏2；(4)用洗脱液萃取浸膏1、浸膏2或两者合并的合并浸膏，以得到有效部位，对有效部位处理后得到富含呋喃香豆素的提取物，提取物包含有以下结构通式(Ⅰ)、结构通式(Ⅱ)表示的化合物：

【技术特征摘要】
1.富含呋喃香豆素的飞龙掌血提取物的制备工艺，其特征在于：步骤如下：(1)将飞龙掌血干燥药材粉碎；(2)冷浸提取，往经过步骤(1)处理的飞龙掌血干燥药材中加入质量分数为50％以上乙醇水溶液，飞龙掌血干燥药材与乙醇溶液的重量比为1:0.5-50，每次冷浸提取2-14天，共冷浸提取5-15次，合并冷浸提取液浓缩成浸膏1，药渣备用；(3)回流提取，把经过步骤(1)处理的药渣用质量分数70％以下乙醇水溶液回流提取，药渣与乙醇水溶液的重量比为1:0.5-50，每次回流提取1-5h，共提取2-6次，合并回流提取液浓缩得浸膏2；(4)用洗脱液萃取浸膏1、浸膏2或两者合并的合并浸膏，以得到有效部位，对有效部位处理后得到富含呋喃香豆素的提取物，提取物包含有以下结构通式(Ⅰ)、结构通式(Ⅱ)表示的化合物：(5)进行试验动物的止血试验，以出血时间、出血量、凝血时间为评价指标，发现飞龙掌血的浸膏1、浸膏2、合并浸膏及其萃取所得的有效部位具有止血活性。2.根据权利要求1所述富含呋喃香豆素的飞龙掌血提取物的制备工艺，其特征在于：所述步骤(4)是用正丁醇萃取浸膏1、浸膏2或合并浸膏，得到正丁醇萃取部位；取正丁醇萃取部位，加水溶解，经D101大孔吸附树脂吸附，依次用水、质量分数10％～80％乙醇水溶液、质量分数80％以上乙醇水溶液洗脱；将得到质量分数10％～80％乙醇水溶液洗脱部位再经过正相硅胶色谱柱,用甲醇-二氯甲烷梯度洗脱，甲醇与二氯甲烷的体积比为1:50-1:0，TLC检测合并,得到包括Fr1组分和Fr2组分的产物，其中，从Fr1组分经反复正相柱...

【专利技术属性】
技术研发人员：周威，郝小燕，孙文博，梁妍，张晓燕，
申请(专利权)人：贵州医科大学，
类型：发明
国别省市：贵州,52