使用实时荧光PCR法检测TBLR1‑RARα融合基因的引物和探针及应用制造技术

本发明专利技术提供了一种使用实时荧光PCR法检测TBLR1‑RARα融合基因的引物和探针及应用。使用该引物、探针和方法完全能满足临床对灵敏度高、检测流程简便和MRD监测的需求。

Using real time fluorescent PCR detection of TBLR1 RAR alpha fusion gene primers and probes and its application

The invention provides a real-time fluorescent PCR detection of TBLR1 RAR alpha fusion gene primers and probes and its application. The use of the primers, probes and methods can fully meet the needs of high sensitivity, simple detection process and MRD monitoring.

【技术实现步骤摘要】
使用实时荧光PCR法检测TBLR1-RARα融合基因的引物和探针及应用
本专利技术属生命科学和生物
，特别涉及一种采用TAQMAN探针及实时荧光PCR技术定量检测TBLR1-RARα融合基因的方法、引物、探针及试剂盒。实时荧光PCR技术成熟且通量大，适于辅助临床诊断及微小残留病灶的监测。技术背景急性早幼粒细胞白血病(Acutepromyelocyticleukemia,APL)是急性髓系白血病(Acutemyeloidleukemia,AML)中的一类特殊的疾病。因其治疗方案不同于其他类型的AML，且该类病患通常病情危机易出血，常因弥漫性血管内凝血(DIC)而病故；故在诊断时必须从AML中区分出来，进行及时的治疗。APL的诊断关键是找到特异的染色体或基因异常。几乎所有的APL都涉及染色体17(q21)的易位，即RARα基因参与的重排融合。其中＞95％的病例为t(15；17)(q22；q21)，产生PML-RARα融合基因；但仍有少数的不典型病例会涉及其他的染色体和基因与RARα基因发生融合。如11号染色体上的PLZF和NuMA基因，5号染色体上的NPM1基因及3号染色体上的本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测TBLR1‑RARα融合基因的引物和探针，其特征在于，所述上游引物TBLR1‑F、下游引物RARA‑R和探针RARA‑P的序列包括：TBLR1‑F：5’‑GGGAGGAGAATGGAGCACA‑3’RARA‑R：5’‑AGGGCTGGGCACTATCTCTTC‑3’RARA‑P：5’‑FAM‑CCATTGAGACCCAGAGCAGCAGTTC‑TAMRA‑3’。

【技术特征摘要】
1.检测TBLR1-RARα融合基因的引物和探针，其特征在于，所述上游引物TBLR1-F、下游引物RARA-R和探针RARA-P的序列包括：TBLR1-F：5’-GGGAGGAGAATGGAGCACA-3’RARA-R：5’-AGGGCTGGGCACTATCTCTTC-3’RARA-P：5’-FAM-CCATTGAGACCCAGAGCAGCAGTTC-TAMRA-3’。2.根据权利要求1所述的引物和探针，其特征在于，还包括用于扩增作为内参的管家基因ABL的引物和探针，其核苷酸序列如下：ABL-F：5’-GATACGAAGGGAGGGTGTACCA-3’ABL-R：5’-CTCGGCCAGGGTGTTGAA-3’ABL-P：5’-FAM-TGCTTCTGATGGCAAGCTCTACGTCTCCT-TAMRA-3’。3.一种检测TBLR1-RARα融合基因的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)提取全血样本中的有核细胞；(2)提取步骤1中有核细胞中的总RNA，并将RNA反转录成cDNA；(3)以步骤2的cDNA为模板，进行TBLR1-RARα融合基因的定量检测；所述融合基因定量检测包括上游引物TBLR1-F、下游引物RARA-R和探针RARA-P的序列，其包括：TBLR1-F：5’-GGGAGGAGAATGGAGCACA-3’RARA-R：5’-AGGGCTGGGCACTATCTCTTC-3’...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹媛，杜翠，
申请(专利权)人：武汉艾迪康医学检验所有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42