一种检测和评价抗HBV药物活性的方法及试剂盒技术

本发明专利技术涉及一种检测和评价抗HBV药物活性的方法及试剂盒。所述方法包括如下步骤：S1、向动物肝癌细胞或人肝癌细胞的培养体系中加入待测抗HBV药物，进行培养，S2、检测培养上清液中HBV pgRNA浓度，S3、根据培养上清液中HBV pgRNA浓度判断待测抗HBV药物活性结果。所述试剂盒中含有上游引物、下游引物和荧光标记探针以及逆转录引物，其序列分别为序列表序列1—4序列。本发明专利技术具有检测灵敏度高、敏感，检测过程简便、周期短的优点。

A method and kit for detecting and evaluating the activity of anti HBV drugs

The present invention relates to a method and a kit for detecting and evaluating the activity of anti HBV drug. The method comprises the following steps: S1, added to the culture system of animal cells or human hepatocellular carcinoma cells in anti HBV drugs to be tested were cultured in HBV pgRNA concentration in the supernatant of S2, detection of culture, S3, according to the concentration of pgRNA in supernatant of HBV test anti HBV drug activity results. The kit contains upstream primers, downstream primers and fluorescent labeling probes, and reverse transcriptase primers. The sequence of the kits is sequence 1 - 4 sequence, respectively. The invention has the advantages of high sensitivity, sensitivity, simple detection process and short period.

【技术实现步骤摘要】
一种检测和评价抗HBV药物活性的方法及试剂盒
本专利技术属于生物
，具体涉及一种检测和评价抗HBV药物活性的方法及试剂盒。
技术介绍
乙型病毒性肝炎，简称乙肝，是由乙型肝炎病毒HBV感染引起的疾病。乙型肝炎病毒HBV属于嗜肝DNA病毒科，正嗜肝DNA病毒属，基因组长约3.2kb，是一种部分双链环状DNA。在HBV感染者的血液中，电镜下可以同时观察到三种不同的病毒颗粒：包括直径为42nm的大球形颗粒，为完整的病毒颗粒，具有传染性，也称为Dane颗粒；还可以见到直径22nm的小球形颗粒和管形颗粒。小球形颗粒和管形颗粒为乙型肝炎表面抗原，没有核酸，无传染性。乙型肝炎病毒HBV外面有一层包膜，上面有乙肝表面抗原，包膜里面是病毒的核心颗粒，其内为乙肝的核酸和聚合酶。HBV的核酸为部分双链的DNA，又称为环状松弛DNA(relaxedcircularDNA，rcDNA)，其基因组编码HBsAg、HBcAg、HBeAg、病毒多聚酶和HBx蛋白。HBV含4个部分重叠的开放读码框(ORF)，即：前S/S区、前C/C区、P区和X区。HBV编码四种不同长度的mRNA，分别长3.5kb、2.4kb、2本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测和评价抗HBV药物活性的方法，包括如下步骤：S1、向动物肝癌细胞或人肝癌细胞的培养体系中加入待测抗HBV药物，进行培养，S2、检测培养上清液中HBV pgRNA浓度，S3、根据培养上清液中HBV pgRNA浓度判断待测抗HBV药物活性结果。

【技术特征摘要】
1.一种检测和评价抗HBV药物活性的方法，包括如下步骤：S1、向动物肝癌细胞或人肝癌细胞的培养体系中加入待测抗HBV药物，进行培养，S2、检测培养上清液中HBVpgRNA浓度，S3、根据培养上清液中HBVpgRNA浓度判断待测抗HBV药物活性结果。2.一种检测和评价抗HBV药物活性的方法，包括如下步骤：对经待测抗HBV药物治疗过的转HBV基因动物的离体血清进行HBVpgRNA浓度测定，根据离体血清中HBVpgRNA浓度判断待测抗HBV药物活性结果。3.一种检测和评价抗HBV药物活性的方法，包括如下步骤：对经待测抗HBV药物治疗过的乙肝患者的离体血清进行HBVpgRNA浓度测定，根据离体血清中HBVpgRNA浓度判断待测抗HBV药物活性结果。4.如权利要求1—3中任一所述的方法，其特征在于：所述判断待测抗HBV药物活性结果的标准为：当培养上清液或离体血清中HBVpgRNA浓度在500copies/mL以下时，所述待测抗HBV药物的活性或敏感性较好，当培养上清液或离体血清中HBVpgRNA浓度在1.0×105copies/mL以上时，所述待测抗HBV药物的活性或敏感性较差，当培养上清液或离体血清中HBV...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈广磊，刘明坤，叶锋，
申请(专利权)人：北京旌准医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11