【技术实现步骤摘要】
本专利技术一般地涉及基因工程领域,具体说与重组基因的糖蛋白产物表达有关,更具体地说与从稳定转染的细胞中高水平地表达有生物活力的人红血球生成素有关。红血球生成素这一激素在调节红血球生成、红血细胞的形成以及由贫血导致的红血球生成素缺乏中起着重要作用。由于缺少纯的材料,对这个激素做详细研究以及试图用它进行替补治疗一直都很困难。人红血细胞的产生,需要肾脏分泌成熟糖蛋白形式的红血球生成素。在恒态时,这个激素在循环血液中浓度为每毫升10至18毫单位(128-230微微克),在严重的组织供氧不足(缺氧)刺激下,它的水平可以增加一千倍。提高激素水平可触发骨髓中感受干细胞群的增生和分化,激活成熟红细胞中血红蛋白的合成,加速红细胞从骨髓释放进入循环,从而增加红细胞量,改善供氧不足的局面。缺乏红血球生成素的病人如慢性肾脏病人,常患有严重的贫血症。红血球生成素是一个34-38千道尔顿的糖蛋白,分子量的约40%是糖类提供的。至少一个二硫桥是活力所需的,对此激素的结构所知甚少,其合成的详情也未全清楚。最近分离到的CDNA和基因组克隆,提供了分析红血球生成素产生的调节控制的机会,但是,还没有表达 ...
【技术保护点】
主要包含相当于人红血球生成素基因的ApaI限制片段的基本纯的DNA或RNA。
【技术特征摘要】
US 1986-6-27 879,423及其等价部分所定义的内容加以限制。权利要求1.主要包含相当于人红血球生成素基因的ApaI限制片段的基本纯的DNA或RNA。2.权利要求1中的DNA或RNA,其ApaⅠ限制片段主要包含如图1所示的意义链的核苷酸序列,或其互补的RNA序列。3.权利要求1中的DNA或RNA序列,它们有效地与能够使其表达的第二核酸序列相连接。4.权利要求3的DNA或RNA,其中第二核酸序列由下列中选择一种或数种启动子序列、增强子序列、多聚腺苷酸序列、选择性标记序列、质粒、病毒或逆病毒表达载体、以及逆病毒的跨染色体作用因子。5.含有权利要求3的DNA或RNA的细胞。6.用权利要求3的DNA或RNA稳定转染的细胞。7.权利要求6的细胞,它们从包括真核细胞、酵母和细菌的一组中选出。8.权利要求7的细胞,其中真核细胞来源于肾脏。9.权利要求8的细胞,其中肾脏细胞是上皮细胞。10.一种表达有生物活力的重组人红血球生成素的方法,包括用主要含有人红血球生成素基因的ApaⅠ限制片段的DNA、RNA或核苷酸序列转染宿主细胞,使转染细胞与培养基相接触,使细胞表达红血球生成素,并回收表...
【专利技术属性】
技术研发人员:杰里S鲍威尔,
申请(专利权)人:华盛顿大学评议会,
类型:发明
国别省市:US[美国]
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