用于引发免疫应答的剂和组合物制造技术

公开了免疫强化组合物。更具体地，本发明专利技术公开了包含表现出增强的抗原呈递功能的细胞的组合物。本发明专利技术的组合物通常可用于促进宿主免疫细胞应答(包括选择性和靶向的免疫细胞应答)的刺激，并且特别地可用于治疗和/或预防癌症、肿瘤和病原体感染。

Agents and compositions used to trigger immune responses

The immune strengthening composition was disclosed. More specifically, the present invention discloses a composition containing cells that exhibit enhanced antigen presentation function. The compositions of the invention can usually be used to stimulate the immune response of the host, including selective and targeted immune cell responses, and especially for the treatment and / or prevention of cancer, tumor and pathogen infection.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于引发免疫应答的剂和组合物专利
本专利技术通常涉及免疫强化组合物(immunepotentiatingcomposition)。更具体地，本专利技术涉及包含表现出增强的抗原呈递功能的细胞的组合物。本专利技术的组合物通常可用于促进宿主免疫细胞应答(包括选择性和靶向的免疫细胞应答)的刺激，并且特别地可用于治疗和/或预防癌症、肿瘤和病原体感染。专利技术背景癌症仍然为全球发病率和死亡率的主要原因之一，其中恶性黑素瘤为对这些统计数据作出显著贡献的一种(Trotter等，2014；Bray等，2012)。部分地由于这个巨大的全球负担，对癌症的研究才会如此多产(Trotter等，2014；Jemal等，2011)。已经进行了研究恶性黑素瘤的发病机制、分子机制和潜在的治疗选项的大量研究(Lee等，2014；Yang,2011；和Fang等，2008)。然而，尽管已经进行了大量的研究，但仍然不存在被批准用于在预防或治疗恶性黑素瘤中使用的疫苗。用于将疫苗靶向特定癌症的一种方法依赖于使用患者自己的细胞(黑素瘤细胞和/或树突细胞)来产生定制疫苗，以加强患者针对其自身癌细胞的免疫应答。这项技术已经在若干研究中被采用和测试(Berd等，1997；Soiffer等，2003；O’Rourke等，2003；deRosa等，2014)。然而，个体化疗法(包括基于自体癌细胞和/或树突细胞疫苗的治疗)带来的担忧是该方法的高度耗时性和制造的巨大成本。这两个特征代表了对于及时和成本有效地产生个体化癌症疫苗的显著障碍，并且可能解释了制药公司无兴趣主动从事此类治疗剂的开发(Jaffee等，2001；Sondak等，2006；Ralph2007)。可能商业上更可行的相关技术为使用基于同种异体全细胞的疫苗。这些疫苗基于具有有利的免疫原性的同种异体组织，并且越来越受欢迎，且最近的研究提供了有关癌症与患者免疫应答之间关系的有用信息(Dezfouli等，2003；Fang,2008)。迄今，最成功的全细胞疫苗为CANVAXINTM，其包括三个经辐照的同种异体黑素瘤细胞系，它们之间表达了超过20种不同的黑素瘤抗原(Hsueh和Morton,2003)。尽管这种疫苗达到了III期临床测试，但在数据安全性监测委员会(theDataSafetyMonitoringBoard)确定了与未接种疫苗的对照患者相比，CANVAXINTM治疗的患者不太可能显示任何存活益处之后，试验被停止(Sondak等，2006)。然而，这项试验为疫苗开发提供了有用的方法，该方法已经被用于其后的研究中(Faries等，2009；Lotem等，2011)。由Dezfouli等(2003)进行的单独的研究鉴定了在细胞表面表达B7.1的工程化黑素瘤细胞，并随后用IFNγ/β的组合的处理不仅增强了B7.1表达而且还诱导对黑素瘤细胞的特异性细胞毒性T淋巴细胞应答。此外，该研究得出结论，将B7.1添加到黑素瘤疫苗上介导了观察到的独立于CD4+辅助性T细胞的CD8+T细胞应答(Dezfouli等，2003)。专利技术概述本专利技术人已经出人意料地发现，对靶抗原的较强的免疫应答可以通过用抗原呈递细胞进行接种疫苗来引发，所述抗原呈递细胞在其表面上具有呈递的B7分子和4-1BB激动剂并且其抗原呈递特性已经通过暴露于干扰素处理被增强。干扰素处理和B7分子和4-1BB激动剂的表面表达的组合产生细胞的抗原呈递功能的协同增强，所述细胞当被引入到合适的宿主中时引发针对由所述细胞呈递的抗原的显著改进的免疫应答。本专利技术的人工抗原呈递细胞在治疗已经消耗天然抗原呈递细胞群体(例如，巨噬细胞、树突细胞等)的受试者方面具有特别的优势。因此，在本专利技术的一个方面，提供了一种人工抗原呈递细胞，所述人工抗原呈递细胞在其表面上包含B7分子和4-1BB激动剂，其中所述细胞的抗原呈递功能(例如，细胞表面上的较高水平的主要组织相容性复合物)通过暴露于至少一种干扰素(IFN)被增强。合适地，细胞的抗原呈递功能通过使细胞与至少一种外源IFN接触(例如，在至少一种外源IFN的存在下培养)被增强。在本文描述的方面和实施方案的每一个中，人工抗原呈递细胞通常来源于动物细胞，所述动物细胞通常为脊椎动物细胞(例如，哺乳动物细胞)。合适地，动物细胞为癌细胞或肿瘤细胞(例如，黑素瘤细胞)。在本文描述的方面和实施方案的每一个中，4-1BB激动剂合适地为4-1BB配体。在本专利技术的另一个方面，提供了一种组合物，所述组合物包含B7分子、4-1BB激动剂和动物细胞，所述动物细胞在足以增强细胞的抗原呈递功能的条件下并且持续一段时间与至少一种外源IFN接触(例如，在至少一种外源IFN的存在下培养)。B7分子可以在细胞的表面上存在或以可溶性形式存在。类似地，4-1BB激动剂可以在所述细胞的表面上存在或以可溶性形式存在。在这种类型的说明性实例中，B7分子和4-1BB激动剂中的一种在细胞表面上存在，且另一种呈可溶性形式。在其他说明性实例中，B7分子和4-1BB激动剂各自在细胞的表面上存在。可选地，B7分子和4-1BB激动剂均呈可溶性形式。在本文描述的方面和实施方案的每一个中，动物细胞通常为脊椎动物细胞，通常为哺乳动物细胞，其非限制性实例包括癌细胞或肿瘤细胞(例如，黑素瘤细胞)。在本专利技术的另外方面，提供了一种用于制备人工抗原呈递细胞的方法，所述方法包括：将在其细胞表面上表达B7分子和4-1BB激动剂的动物细胞在足以增强细胞的抗原呈递功能的条件下并且持续一段时间暴露于至少一种(通常为外源的)IFN。仍在本专利技术的另外方面，提供了一种用于增强动物细胞的免疫强化作用的方法，所述方法包括：将在其细胞表面上表达B7分子和4-1BB激动剂的动物细胞在足以增强细胞的抗原呈递功能的条件下并且持续一段时间暴露于至少一种(通常为外源的)IFN。在一些实施方案中，该方法还包括从动物细胞的异质群体分离表达B7分子和4-1BB激动剂中的一种或两种的细胞。在一些实施方案中，该方法还包括修饰动物细胞以在其细胞表面上表达B7分子和4-1BB激动剂中的一种或两种。合适地，修饰步骤包括将B7分子和4-1BB激动剂中的一种或两种可从其表达的至少一种多核苷酸引入到动物细胞中。在本文描述的方面和实施方案的每一个中，将动物细胞暴露于至少一种IFN合适地包括使所述细胞在足以允许针对至少一种I型IFN的细胞反应性(cellularresponsiveness)的条件下并且持续一段时间与II型IFN接触(例如，在II型IFN的存在下培养)，以及使所述细胞在增强所述细胞的抗原呈递功能的条件下并且持续一段时间与所述至少一种I型IFN接触。细胞可以与II型IFN和I型IFN依次或同时接触。在这种类型的说明性实例中，细胞首先与II型IFN接触，并且随后与I型IFN接触。在其他说明性实例中，细胞与II型IFN和I型IFN同时接触。通常，II型IFN选自IFN-γ或其生物活性片段。至少一种I型IFN通常选自IFN-α、IFN-β或其生物活性片段。在以上宽泛描述的方法的一些实施方案中，使动物细胞失活或不能够增殖。例如，如本领域已知的，动物细胞可以用合适量的放射物(radiation)，诸如，例如γ-辐照进行辐照，以使动物细胞在预期的宿主中不能够增殖。又在另本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人工抗原呈递细胞，所述人工抗原呈递细胞在其表面上包含B7分子和4‑1BB激动剂，其中所述细胞的抗原呈递功能(例如，细胞表面上的较高水平的MHC，诸如MHC I类)通过暴露于至少一种干扰素(IFN)被增强。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.04.02 AU 20159012181.一种人工抗原呈递细胞，所述人工抗原呈递细胞在其表面上包含B7分子和4-1BB激动剂，其中所述细胞的抗原呈递功能(例如，细胞表面上的较高水平的MHC，诸如MHCI类)通过暴露于至少一种干扰素(IFN)被增强。2.根据权利要求1所述的人工抗原呈递细胞，其中所述细胞来源于癌细胞或肿瘤细胞。3.根据权利要求1或权利要求2所述的人工抗原呈递细胞，其中所述细胞的抗原呈递功能通过使所述细胞与至少一种外源IFN接触(例如，在至少一种外源IFN的存在下培养)被增强。4.一种组合物，所述组合物包含B7分子、4-1BB激动剂和动物细胞，所述动物细胞在足以增强所述细胞的抗原呈递功能的条件下并且持续一段时间与至少一种外源IFN接触(例如，在至少一种外源IFN的存在下培养)。5.根据权利要求4所述的组合物，其中所述细胞被洗涤以去除所述至少一种外源IFN。6.一种用于增强受试者中对靶抗原的免疫应答的方法，所述方法包括将有效量的根据权利要求1至3中任一项所述的人工抗原呈递细胞或根据权利要求4或权利要求5所述的组合物施用至所述受试者。7.一种治疗受试者中的癌症或肿瘤的方法，其中所述方法包括施用有效量的根据权利要求1至3中任一项所述的人工抗原呈递细胞或根据权利要求4或权利要求5所述的组合物。8.一种治疗受试者中的病原体感染的方法，其中所述方法包括施用有效量的根据权利要求1至3中任一项所述的人工抗原呈递细胞或根据权利要求4或权利要求5所述的组合物。9.根据权利要求8所述的方法，其中所述病原体感染为病毒感染、细菌感染或寄生虫感染。10.根据权利要求9所述的方法，其中所述病毒感染选自包括以下、由以下组成、或基本上由以下组成的组：HIV、肝炎、流感、日本脑炎病毒、EB病毒和呼吸道合胞病毒。11.根据权利要求6至10中任一项所述的方法，其中所述受试者的抗原呈递细胞被消耗或数目降低。12.根据权利要求11所述的方法，其中被消耗或数目降低的抗原呈递细胞为巨噬细胞、树突细胞和/或B细胞。13.根据权利要求11或权利要求12所述的方法，所述方法还包括将所述受试者暴露于免疫抑制治疗。14.根据权利要求1至13中任一项所述的细胞、组合物或方法，其中所述B7分子为B7.1分子或B7.2分子。15.根据权利要求14中任一项所述的细胞、组合物或方法，其中所述B7.1分子包含SEQIDNO:2中列出的序列、或其生物活性片段，或对应于这些中任何一个的序列。16.根据权利要求14中任一项所述的细胞、组合物或方法，其中所述B7.2分子包含SEQIDNO:4中列出的序列、或其生物活性片段，或对应于这些中任何一个的序列。17.根据权利要求1至16中任一项所述的细胞、组合物或方法，其中所述B7分子在所述细胞的表面上表达，其中所述分子的至少一部分被暴露于细胞外环境。18.根据权利要求4至16中任一项所述的组合物或方法，其中所述B7分子以可溶性形式存在。19.根据权利要求1至18中任一项所述的细胞、组合物或方法，其中所述B7分子为嵌合蛋白，所述嵌合蛋白包含对应于B7分子的细胞外结构域的与免疫球蛋白恒定区融合或以其他方式连接的多肽。20.根据权利要求1至19中任一项所述的组合物或方法，其中所述4-1BB激动剂在所述细胞的表面上表达，其中所述分子的至少一部分被暴露于细胞外环境。21.根据权利要求4至18中任一项所述的组合物或方法，其中所述4-1BB激动剂以可溶性形式存在。22.根据权利要求1至21中任一项所述的细胞、组合物或方法，其中所述可溶性4-1BB激动剂为嵌合蛋白，所述嵌合蛋白包含对应于B7分子的细胞外结构域的与免疫球蛋白恒定区融合或以其他方式连接的多肽。23.根据权利要求1至22中任一项所述的细胞、组合物或方法，其中所述4-1BB激动剂选自由以下组成的组：多肽、多核苷酸、抗体、碳水化合物和小分子。24.根据权利要求1至23中任一项所述的组合物，其中所述4-1BB激动剂为4-1BBL分子或其生物活性片段。25.根据权利要求1至23中任一项所述的细胞、组合物或方法，其中动物细胞来源于选自由以下组成的组的组织、器官或系统：肺、乳腺、子宫、子宫颈、卵巢、结肠、胰腺、前列腺、睾丸、胃、膀胱、肾、骨、肝、网状内皮系统、食管、脑、皮肤和软组织。26.根据权利要求25所述的细胞、组合物或方法，其中所述动物细胞为黑素瘤细胞。27.根据权利要求1至25中任一项所述的细胞、组合物或方法，其中所述细胞已经与IFNγ(其通常为外源的)和任选地第一I型IFN(其通常为外源的)和第二I型IFN(其通常为外源的)的一种或两种接触(例如，在IFNγ(其通常为外源的)和任选地第一I型IFN(其通常为外源的)和第二I型IFN(其通常为外源的)的一种或两种的存在下培养)，其中所述第一I型IFN选自IFNβ或其生物活性片段，且其中所述第二I型干扰素选自IFNα或其生物活性片段。28.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1至5...

【专利技术属性】
技术研发人员：斯蒂芬·拉尔夫，
申请(专利权)人：坎库雷有限公司，
类型：发明
国别省市：澳大利亚,AU