诱导免疫应答的组合物制造技术

本发明专利技术提供了基本上不含抗原的组合物，用于在鸟类或哺乳动物中诱导先天免疫应答，所述组合物包含皂苷、固醇、季胺和聚丙烯酸聚合物，给予鸟类或哺乳动物。还提供了使用该组合物的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】专利
本专利技术涉及使用免疫调节剂诱导对感染的非特异性应答的方法。专利技术背景当身体对某种感染性或免疫性攻击表现出免疫应答时，先天免疫应答(先天免疫)与获得性免疫应答(抗原特异的适应性免疫)之间的区别也展现出来。先天免疫系统是一种效率和进化程度很高的通用防御系统。先天免疫中元素的存在水平总是很低，而当受到刺激时则非常迅速地被激活。所述刺激可包括细菌性信号分子与机体细胞表面上的模式识别受体的相互作用或其他疾病机制。每天，动物都通过食物和水、空气及所接触的表面暴露于潜在的病原性微生物。先天免疫系统起到防止这些潜在病原体引起疾病的作用。先天免疫系统与称为适应性免疫(其包括抗体及抗原特异性B-和T-淋巴细胞)有差异，因为前者是一直存在的，即刻起效并且对任意给定的病原体都是相对非特异的。适应性免疫系统要求特异识别元素的扩增并因此需要数天到数周以发生应答。甚至在通过疫苗接种对适应性免疫进行预刺激后，其也需要三天或更长时间对病原体产生应答，而先天免疫会立即或迅速(数小时内)产生效果。已知先天免疫包括多种效应子功能，包括吞噬细胞、补体等等，但通常对其的理解并不完全。由此，出现了一些非常需要先天免疫应答的激活的情况。例如，在兽医领域，当动物已经或将要经历环境改变时，例如在运输中或紧接着运输后，或者在个体动物之间紧密靠近从而病原体扩散可能很迅速的环境中，激活先天免疫系统尤其有用。专利技术概述本专利技术提供用于激活先天免疫系统的方法和组合物。在特定方面，本专利技术提供了基本上上不含抗原的组合物，其包含(或在特定实施方式中基本上含有或由如下组成)皂苷、类固醇、季胺和聚丙烯酸聚合物，以及任选地至少一种糖脂和免疫刺激性寡核苷酸，用于在哺乳动物或鸟类中诱导免疫应答。在特定实施方式中，所述组合物不含抗原。在特定方面，本专利技术提供了在动物中诱导免疫应答的方法，包括向所述动物施用基本上不含抗原的组合物，所述组合物包含皂苷、类固醇、季胺和聚丙烯酸聚合物，其中所述动物选自哺乳动物和鸟类。在一些实施方式中，所述组合物不含抗原。在特定方面，上文提到的组合物进一步包含糖脂、免疫刺激性寡核苷酸或糖脂及免疫刺激性寡核苷酸二者。在适用于以上陈述的各个方面的实施方式中，皂苷存在量为约1μg至约5,000μg每剂量(优选地为约10μg至约50μg每剂量)，类固醇存在量为约1μg至约5,000μg每剂量(优选地为约10μg至约50μg每剂量)，季胺化合物存在量为约1μg至约5,000μg每剂量(优选地为约1μg至约30μg)每剂量，并且聚丙烯酸聚合物存在量为0.0001％v/v至约75％v/v(优选地为约0.01％v/v至约0.1％v/v每剂量)。如果存在糖脂，其量通常为约0.01mg至约10mg每剂量(优选地为约1mg至约2mg每剂量)。如果存在免疫刺激性寡核苷酸，其量通常为20μg至约500μg每ml(优选地为约100μg每ml至约200μg每ml)。本专利技术的组合物可用于触发对多种生物体如病毒、革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的攻击产生保护性免疫应答。在特定实施方式中，本专利技术的组合物用于触发针对革兰氏阴性细菌如支气管败血性博德特氏菌(Bordetella bronchiseptica)的保护性免疫应答。附图简述图1显示了QCDCRT佐剂对IFNα、MX-1和OAS mRNA水平
的效应。图2阐述了QCDCRT佐剂对BHV－1攻击模型中病毒脱落的效应。选定实施方式的详述为了辅助本领域普通技术人员理解本专利技术，提供以下非限制性定义。当与可测量的数字变量结合使用时，“大约”或“近似”指代变量的指定值以及指定值实验误差范围内的所有变量值(例如在平均值的95％置信区间内)或在指定值的10％内的值，选二者中较大的范围。“烷基”指代直链和分支的饱和烃部分。“胺”指代衍生自铵的化学化合物，其中烃基取代了一个或多个氢原子。“季胺”指代基于铵的具有四个烃基的化合物。“抗原”指代刺激特异免疫应答的任何物质。该术语包括杀灭的、灭活的、减弱的或修饰的活的细菌、病毒或寄生虫。术语抗原还包括多核苷酸、多肽、重组蛋白质、合成肽、蛋白质提取物、细胞(包括肿瘤细胞)、组织、多糖、或脂质，或其片段，单独地或其任意组合。术语抗原还包括抗体，如抗-独特型抗体或其片段，并可指代可模拟抗原或抗原决定簇(表位)的合成的肽模拟位。应用于佐剂制剂，“基本上包含”指代该制剂不含未提到的另外的佐剂或免疫调制试剂，其以该试剂发挥可测量到的佐剂或免疫调制效应的量。“剂量”指代施于受试者的组合物的单位，可以为质量单位或体积单位。“免疫刺激性分子”指代产生免疫应答的分子。“肠道外施用”指代通过或经由不包括消化道的途径向受试者体内引入某种物质，如疫苗。“药学可接受”指代在良好医学评价范围内的，适用于接触受试者组织，而不引起过度的毒性、辐射、过敏应答等的物质，具有相应合
理的收益风险比，并可有效地用于其预期用途。“皂苷”指代一类植物来源的表面活性糖苷，由亲水区域(通常为数个糖链)结合类固醇或三萜结构的疏水区域组成。“类固醇”指代任何类型的属于生物化学脂质类型的有机化合物，其包含四融合环系统，其中有三个融合的环己烷(六碳)环加上第四环戊烷(五碳)环。类固醇通常在无机溶剂中可溶性高，微溶于水。“固醇”指代动物内由萜类前体生物学产生的化合物。其包含类固醇环结构，具有羟基(OH)基团，通常附着至碳-3。脂肪酸置换物的烃链长度可变，通常为16至20个碳原子，可以为饱和或不饱和的。固醇一般在环结构中含有一个或多个双键，也含有多种附着至环的置换物。固醇及其脂肪酸酯基本上不溶于水。“基本上不含抗原的组合物”指代这样的组合物，其中抗原的量不足以产生保护性特异免疫应答或阻止通过抗原产生的特异免疫应答所针对的病原体的成功繁殖和/或排除(例如病毒脱落)。在一些实施方式中，基本上不含抗原组合物中抗原的量无法由血清学测定法如ELISA检测到。“三萜”指代一大类种类多样的天然产生的有机分子，衍生自六个五碳的异戊二烯(2-甲基-1，3-丁二烯)单元。多数三萜是多环结构，相互之间差异在于功能基团和其基本碳骨架。如本文所描述的，本专利技术人惊奇地发现包含皂苷、固醇、季胺化合物、聚丙烯酸聚合物以及任选地糖脂和/或免疫刺激性寡核苷酸中的一种或两者的组合物能够在无抗原的情况下在温血动物(哺乳动物和鸟类)中触发保护性免疫应答。尽管温血动物即哺乳动物和鸟类能够产生先天免疫应答及作用慢的适应性免疫应答，但其主要依赖于高度进化的适应性免疫机制。无脊椎动物相比之下缺乏适应性免疫机制，因此完全依赖于先天免疫应答机制。冷血脊椎动物例如鱼类包括先天和适应性免疫应答机制二者。而相比于温血脊椎动物，冷血脊椎动物的适应性免疫应答相对不发达，冷血脊椎动物的先天免疫应答的发达度相对较高。由此，冷血脊椎动
物相对于温血脊椎动物通常更多依赖于先天免疫机制而非适应性免疫机制。因为无脊椎动物和冷血脊椎动物相比于温血动物在先天免疫系统的相对发达程度以及对先天免疫系统的依赖性上有差异，所以关于无脊椎动物和冷血脊椎动物各自先天免疫系统的结果和发现不能预期应用于温血脊椎动物的先天免疫系统。具体而言，发现化合物或组合物可刺激无脊椎动物或冷血脊椎动物的先天免疫系统不能合理地预测该化本文档来自技高网...

【技术保护点】
在哺乳动物或鸟类中诱导免疫应答的方法，包括向哺乳动物或鸟类施用基本上不含抗原的组合物，其包括皂苷、固醇、季胺和聚丙烯酸聚合物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2013.11.26 US 61/909,0451.在哺乳动物或鸟类中诱导免疫应答的方法，包括向哺乳动物或鸟类施用基本上不含抗原的组合物，其包括皂苷、固醇、季胺和聚丙烯酸聚合物。2.权利要求1的方法，其中所述皂苷是三萜皂苷，所述固醇为胆固醇，所述季胺是DDA。3.权利要求2的方法，其中所述三萜皂苷是Quil A或其经纯化的部分。4.权利要求1-3中任一项的方法，其中皂苷以1μg至约5,000μg每剂量的量存在，固醇以1μg至约5,000μg每剂量的量存在，季胺以1μg至约5,000μg每剂量的量存在，以及聚丙烯酸聚合物以0.0001％体积/体积(v/v)至约75％v/v的量存在。5.权利要求1-4中任一项的方法，其中所述组合物基本上由皂苷、固醇、季胺和聚丙烯酸聚合物组成。6.权利要求1-4中任一项的方法，其中所述组合物进一步包含糖脂。7.权利要求6的方法，其中所述糖脂是N-(2-脱氧-2-L-亮氨酰氨基-b-D-吡喃葡糖基)-N-十八烷基月桂酰胺或其盐。8.权利要求6和7中任一项的方法，其中所述组合物不含免疫刺激...

【专利技术属性】
技术研发人员：P·J·多明诺夫斯基，D·姆旺吉，J·M·布里克，D·L·福斯，S·K·雷，S·马汉，
申请(专利权)人：硕腾服务有限责任公司，
类型：发明
国别省市：美国;US