一种人脐带间充质干细胞的无血清培养基制造技术

本发明专利技术提供一种人脐带间充质干细胞的无血清培养基，属于干细胞培养技术领域，用于临床应用的人脐带间充质干细胞培养的改进方法以及改进的人脐带间充质干细胞的培养组合物。其中基础培养基为Alpha‑MEM培养基，添加成份明确的血清替代物一种或者多种：营养因子，血小板源性因子，表皮生长因子，碱性成纤维生长因子，细胞因子抗体，蛋白多肽，植物提取物等。人脐带间充质干细胞在上述培养基中传代培养及扩增之后对培养细胞表面标记分析，生长曲线结果显示人脐带间充质干细胞的活率提高，流式结果显示人脐带间充质干细胞的特性稳定，其中不含血清，避免了血清成份对细胞培养的影响，防止了外源性不明成分和病原性污染，有效保证干细胞治疗产品的质量稳定和标准化，为用于临床治疗奠定了方法学基础。

A serum-free medium for human umbilical cord mesenchymal stem cells

【技术实现步骤摘要】
一种人脐带间充质干细胞的无血清培养基
本专利技术涉及干细胞培养
，具体地说是一种人脐带间充质干细胞的无血清培养基和提高干细胞活率的方法。
技术介绍
人脐带间充质干细胞是指从人脐带中分离的一种多能干细胞，与其他来源的间充质干细胞比较有较明显的临床应用优势，如取材容易、易收集、冷冻保存及相对纯净等，具有较高的分化潜能，可向多个方向进行分化，如成骨细胞、软骨细胞、类肝细胞、类胰岛素细胞、神经细胞和心肌细胞等，且无伦理方面的问题。目前，人脐带间充质干细胞已经在临床领域得到应用并取得令人鼓舞的治疗效果。干细胞增殖数量、活率以及无外源性污染是人脐带间充质干细胞在临床治疗应用中获得疗效与安全的关键，一方面由于常规培养基中含有各种不明确的细胞生长因子，会对细胞的分化形成干扰，另一方面采用动物血清培养的干细胞进行临床应用，可能引起病原体的交叉感染，因此需要开发成分明确的无血清培养基。促进干细胞自我增殖的细胞因子对于开发无血清培养基具有重要的意义，而添加的特定细胞因子抗体则可防止细胞出现分化的特征，添加的植物提取物则可有效的促进细胞的活率，市场上存在的无血清干细胞培养基用于培养人脐带间充质干细胞时本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种人脐带间充质干细胞的无血清培养基，基础培养基为Alpha‑MEM培养基，根据需要添加如下成份中的一种或者多种：1）营养因子A（1 ng/mL ‑100 ng/mL）；2）营养因子B（1 ng/mL ‑100 ng/mL）；3）血小板源性因子（1 ng/mL ‑100 ng/mL）；4）表皮生长因子（1 ng/mL ‑100 ng/mL）；5）碱性成纤维生长因子（1 ng/mL ‑100 ng/mL）；6）细胞因子抗体A（1 ng/mL ‑100 ng/mL）；7）细胞因子抗体B（1 ng/mL ‑100 ng/mL）；8）细胞因子抗体C（1 ng/mL ‑100 ng/mL）。

【技术特征摘要】
1.一种人脐带间充质干细胞的无血清培养基，基础培养基为Alpha-MEM培养基，根据需要添加如下成份中的一种或者多种：1）营养因子A（1ng/mL-100ng/mL）；2）营养因子B（1ng/mL-100ng/mL）；3）血小板源性因子（1ng/mL-100ng/mL）；4）表皮生长因子（1ng/mL-100ng/mL）；5）碱性成纤维生长因子（1ng/mL-100ng/mL）；6）细胞因子抗体A（1ng/mL-100ng/mL）；7）细胞因子抗体B（1ng/mL-100ng/mL）；8）细胞因子抗体C（1ng/mL-100ng/mL）。2.根据权利1要求所述的人脐带间充质干细胞无血清培养基组合物,其中培养基包含一种或多种生长因子或细胞因子，可选择的添加成份以及优化以后的剂量如下：1）营养因子A（20ng/mL-50ng/mL）；2）营养因子B（20ng/mL-50ng/mL）；3）血小板源性因子（20ng/mL-50ng/mL）；4）表皮生长因子（20ng/mL-50ng/mL）；5）碱性成纤维生长因子（20ng/mL-50ng/mL）；6）细胞因子抗体A（20ng/mL-50ng/mL）；7）细胞因子抗体B（20ng/mL-50ng/mL）；8）细胞因子抗体C（20ng/mL-50ng/mL）。3.根据权利1要求所述的人脐带间充质干细胞无血清培养基组合物，对于原代细胞的脐带间充质干细胞无血清培养基组合物，其中可添加植物提取物来自玫瑰花，芦荟，人参...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘劼，孙毅，薛婷，陈彩琴，廖方圆，朱益辉，黄明辉，
申请(专利权)人：刘劼，孙毅，朱益辉，黄明辉，
类型：发明
国别省市：上海,31