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一种植物超氧化物歧化酶的制备方法技术

技术编号:1712955 阅读:325 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
一种植物超氧化物岐化酶的制备方法,包括如下步骤:将各原料分别粉碎、打浆;合并上述打浆后的产物,加碱离子液,厌氧发酵;添加饱和缓冲液;将氧化剂和萃取剂加入到发酵容器中,脱水沉淀,过滤,取滤液,厌氧真空冷冻;添加脱水氧化剂,沉淀得到粗品酶,抽滤,离心分离,取沉淀物,真空冷冻干燥;将还原糖培养基添加到上述产物,再添加掩蔽剂,温浴抽滤;取滤液,将脱水氧化剂加到步骤(7)得到的滤液中,厌氧静置,抽滤、离心分离,冷冻真空机干燥,冷冻真空器干燥即得超氧化物岐化酶。与现有技术相比,本发明专利技术的优点在于:以廉价中草药与豆粕配合,各取所长,相互协同,经过厌氧发酵,制得卫生无污染具有抑制病菌酶活性很高的SOD,直接可以服用或外涂,并且具有良好的消炎效果。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种植物超氧化物岐化酶的制备方法,其特征在于包括如下步骤:(1)将洗净的豆粕、龙葵、白英、筋骨草、蛇莓分别粉碎、打浆;(2)合并步骤(1)中的打浆后的产物,添加重量3~4倍于合并后产物、质量百分比为0.5~2%的碱离子液,厌氧发酵1~12个月; (3)发酵完后,添加饱和缓冲液,直至pH值为7~8,厌氧静置4~6小时;(4)添加氧化剂和萃取剂到发酵容器中,脱水沉淀,过滤,取滤液,添加脱水氧化剂,在-10~0℃下,厌氧真空冷冻1~4小时,上述氧化剂添加的量为步骤(3)中溶液体积的1~100%,上述萃取剂添加的量为步骤(3)中溶液体积的15~80%,上述脱水氧化剂添加的量为步骤(3)中溶液体积的15~80%;(5)沉淀得到粗品酶,采用80~400目滤布抽滤,接着离心分离,取沉淀物,于-30~0℃真空冷冻干燥8~72小时;(6)将重量40~60倍于步骤(5)中产物、质量百分比为10~15%的还原糖培养基添加到上述产物,再添加重量0.2~0.3倍于还原糖培养基、质量百分比为1.5~3%的掩蔽剂,在78~90℃条件下温浴,温浴产物温度至65~75℃,取出;(7)在10~20分钟内,冷却至16~20℃,采用400~600目滤布抽滤;(8)取滤液,添加脱水氧化剂,厌氧静置2~4小时,抽滤、离心分离,得到产物,于-30~0℃真空机冷冻干燥24~72小时,再经常温真空器干燥24~72小时,即得超氧化物岐化酶,上述脱水氧化剂添加的量为步骤(7)中抽滤后溶液体积的15~80%,其中步骤(1)中各原料之间的质量比为1~100∶1~100∶1~100∶1~100∶1~100。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王海宝
申请(专利权)人:王海宝
类型:发明
国别省市:97[中国|宁波]

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