本发明专利技术涉及一种沙棘铜锌超氧化物歧化酶及其制备方法，其目的是提供一种经采果、清洗、取汁、两次酒精提取、离心分离、膜过滤、微孔过滤、冷冻粉碎制得含有酶活为８０００－１００００ｕ／ｍｇ的沙棘铜锌超氧化物歧化酶的方法，该方法简单，采用低温生物物理相结合的方法解决了沙棘中高活性物质因高温氧化而褐变的问题，工艺中没有添加任何有机溶剂，无残留，成本低，酶活性高，产品得率高。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种植物超氧化物歧化酶及其制备方法，具体地说，涉及一种 沙棘铜锌超氧化物歧化酶及其制备方法。
技术介绍
超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase)是一类清除自由基的蛋白酶，能 够平衡机体的氧自由基，对需氧生物的生存起着重要的作用，是生物体防御氧 毒性的关键。基于金属辅基不同，可分为铜锌超氧化物歧化酶、锰超氧化物歧 化酶、铁超氧化物歧化酶三种类型。目前已开发的铜锌超氧化物歧化酶决大多是从动物的血、肝中分离提取， 存在有血制品污染和动物中的病毒、细菌感染的危险。所以，从植物中提取铜 锌超氧化物歧化酶就显得尤为重要。中国专利申请号94112613.7公开了一种沙 棘超氧化物歧化酶及小分子抗氧化复合物，其中以沙棘果、叶为原料采用有机 溶剂提取获得的是复合物，酶纯度不高，有机溶剂残留多，酶活性低，其范围 为2000-4000u/100ml;中国专利申请号92109883.9公开了由沙棘提取分离超氧 化物歧化酶工艺采用有机溶剂多级分离，得率仅为0.005%。,酶活性低，其范围为 979u/100ml;中国专利ZL200510011365.5公开了从沙棘鲜嫩枝叶提取蛋白质、 总黄酮和超氧化物歧化酶的方法，采用硫酸铵提取后管式超高速离心分离冻干 的酶粗品，得率3%。。沙棘果实营养丰富，现代科学研究发现，沙棘果实含有 IOO多种生物活性物质，营养成分十分丰富。其中每克沙棘鲜果超氧化物歧化酶 含量达到2746.0个酶单位，是人参含量的4倍。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种高纯度、高酶活性的沙棘铜锌超氧化物歧化酶， 还提供一种提高得率的制备方法。本专利技术提供了一种沙棘铜锌超氧化物歧化酶，其特征在于酶活性 ,0画10000u/mg。本专利技术还提供了上述沙棘铜锌超氧化物歧化酶的制备方法，其特征在于工 艺过程为将沙棘果采摘后流水清洗，加入高速离心机离心取汁，按重量比l: 0.2 0.5与10 40%的食用酒精混合搅拌5 15分钟，在10 2(TC下回收酒精后将剩余溶 液按重量比l: 0.6 0.8与上述浓度酒精混合搅拌8 15分钟，回收酒精，将剩余 溶液用2000~5000转/分钟离心机离心10 15分钟，取上清液用0.2~0.3微米的膜 过滤，再用0.1微米的微孔滤膜浓縮，在-35 -40'C冷冻粉碎即得8000~10000u/mg的沙棘铜锌超氧化物歧化酶粉末。 -本专利技术的优点是产品制备方法简单，釆用低温生物物理相结合的方法解决了沙棘中高活性物质因高温氧化而褐变的问题，工艺中没有添加任何有机溶 剂，无残留，成本低，酶活性高，产品得率高。附图说明图1为的生产工艺流程图。具体实施方式实施例1将沙棘果采摘后流水清洗，加入高速离心机离心取汁，按重量比l: 0.2与40%的食用酒精混合搅拌5分钟，在l(TC下回收酒精后将剩余溶液按重量比1: 0.6与上述浓度酒精混合搅拌15分钟，回收酒精，将剩余溶液用4500转/分钟离 心机离心12分钟，取上清液用0.3微米的膜过滤，再用0.1微米的微孔滤膜浓 縮，在-35"C冷冻粉碎得8000u/mg的沙棘铜锌超氧化物歧化酶粉末。 实施例2将沙棘果采摘后流水清洗，加入高速离心机离心取汁，按重量比l: 0.3与 25°/。的食用酒精混合搅拌10分钟，在16。C下回收酒精后将剩余溶液按重量比1: 0.7与上述浓度酒精混合搅拌11分钟，回收酒精，将剩余溶液用2000转/分钟离 心机离心15分钟，取上清液用0.26微米的膜过滤，再用0.1微米的微孔滤膜浓 缩，在-37。C冷冻粉碎得9500u/mg的沙棘铜锌超氧化物歧化酶粉末。实施例3将沙棘果釆摘后流水清洗，加入高速离心机离心取汁，按重量比l: 0.5与10%的食用酒精混合搅拌15分钟，在20 2(TC下回收酒精后将剩余溶液按重量比1: 0.6~0.8与上述浓度酒精混合搅拌8分钟，回收酒精，将剩余溶液用5000转/分 钟离心机离心10分钟，取上清液用0.2微米的膜过滤，再用0.1微米的微孔滤 膜浓縮，在-4(TC冷冻粉碎得10000u/mg的沙棘铜锌超氧化物歧化酶粉末。权利要求1、一种沙棘铜锌超氧化物歧化酶，其特征在于酶活性8000-10000u/mg。2、 一种权利要求1所述沙棘铜锌超氧化物歧化酶的制备方法，其特征在于 工艺过程为一将沙棘果采摘后流水清洗，加入高速离心机离心取汁，按重量比1: 0.2 0.5 与10 40%的食用酒精混合搅拌5 15分钟，在10 2(TC下回收酒精；一将剩余溶液按重量比l: 0.6 0.8与上述浓度酒精混合搅拌8 15分钟，回 收酒精；一将剩余溶液用2000 5000转/分钟离心机离心10 15分钟，取上清液用 0.2~0.3微米的膜过滤，再用0.1微米的微孔滤膜浓縮；一在-35 -40"C冷冻粉碎即得8000 10000u/mg的沙棘铜锌超氧化物歧化酶。全文摘要本专利技术涉及，其目的是提供一种经采果、清洗、取汁、两次酒精提取、离心分离、膜过滤、微孔过滤、冷冻粉碎制得含有酶活为8000-10000u/mg的沙棘铜锌超氧化物歧化酶的方法，该方法简单，采用低温生物物理相结合的方法解决了沙棘中高活性物质因高温氧化而褐变的问题，工艺中没有添加任何有机溶剂，无残留，成本低，酶活性高，产品得率高。文档编号C12N9/08GK101255409SQ200810045010公开日2008年9月3日 申请日期2008年3月15日 优先权日2008年3月15日专利技术者山永凯, 曾端国, 李树志, 鲁长征 申请人:青海清华博众生物技术有限公司本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种沙棘铜锌超氧化物歧化酶，其特征在于酶活性８０００－１００００ｕ／ｍｇ。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：鲁长征，李树志，山永凯，曾端国，
申请(专利权)人：青海清华博众生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：63[中国|青海]
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