沙棘中三萜酸的提取纯化方法和三萜酸及三萜皂苷和应用技术

本发明专利技术提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法和三萜酸及三萜皂苷和应用，涉及提取纯化技术领域。沙棘中三萜酸的提取纯化方法包括如下步骤：(a)用有机溶剂提取沙棘果皮中的熊果酸、齐墩果酸及其衍生物，得到提取液；(b)先用碱溶液处理提取液，再用酸溶液处理提取液，得到熊果酸和齐墩果酸固体，将熊果酸和齐墩果酸固体溶于有机溶剂中，得到混合溶液；(c)用大孔树脂吸附混合溶液中的熊果酸和齐墩果酸，吸附结束后用洗脱剂洗脱，浓缩，得到粗品；(d)采用HPLC或HSCCC对粗品中的熊果酸和齐墩果酸进行分离。本发明专利技术对熊果酸和齐墩果酸的分离效果好，熊果酸的纯度高达97.6％以上，齐墩果酸的纯度高达98.2％以上。

Extraction and Purification of Triterpene Acids from Hippophae rhamnoides L. and Application of Triterpene Acids and Triterpene Saponins

The invention provides a method for extracting and purifying triterpene acids from seabuckthorn, triterpene acids and triterpene saponins and their applications, and relates to the technical field of extraction and purification. The extraction and purification methods of triterpene acids in Seabuckthorn include the following steps: (a) extracting ursolic acid, oleanolic acid and their derivatives from seabuckthorn pericarp with organic solvents to obtain the extract; (b) first treating the extract with alkali solution, then treating the extract with acid solution to obtain ursolic acid and oleanolic acid solids, and dissolving ursolic acid and oleanolic acid solids in organic solvents to obtain a mixed solution; (b) C) Ursolic acid and oleanolic acid in mixed solution were adsorbed by macroporous resin, then eluted and concentrated with eluent after adsorption; (d) Ursolic acid and oleanolic acid in crude product were separated by HPLC or HSCCC. The method has good separation effect for ursolic acid and oleanolic acid, and the purity of ursolic acid is over 97.6% and that of oleanolic acid is over 98.2%.

【技术实现步骤摘要】
沙棘中三萜酸的提取纯化方法和三萜酸及三萜皂苷和应用
本专利技术涉及提取纯化
，尤其是涉及一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法和三萜酸及三萜皂苷和应用。
技术介绍
沙棘作为一种地方特色作物品种，其防沙固沙，为当地社会经济发展带来良好的经济学和社会学价值。沙棘中的三萜酸多以游离状态或成苷或成酯的形式存在于植物中，几乎不溶于水或难溶于水。沙棘中的三萜酸主要为熊果酸和齐墩果酸，具有保肝护肝、降低血糖和抗皮肤氧化等功效。但是目前提取纯化沙棘中的熊果酸和齐墩果酸分离效果不好，纯度低。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法，以缓解现有技术中存在的提取纯化沙棘中熊果酸和齐墩果酸的分离效果不好，纯度低等技术问题。本专利技术提供的沙棘中三萜酸的提取纯化方法，包括如下步骤：(a)用有机溶剂提取沙棘果皮中的熊果酸、齐墩果酸及其衍生物，得到提取液；(b)先用碱溶液处理提取液，再用酸溶液处理提取液，得到熊果酸和齐墩果酸固体，将熊果酸和齐墩果酸固体溶于有机溶剂中，得到混合溶液；(c)用大孔树脂吸附混合溶液中的熊果酸和齐墩果酸，吸附结束后用洗脱剂洗脱，浓缩，得到粗品；(d)采用HPLC或HSCCC对粗品中的熊果酸和齐墩果酸进行分离，得到纯化的熊果酸和齐墩果酸。进一步的，所述步骤(c)中，所述大孔树脂包括D101大孔树脂、HPD500大孔树脂、HPD600大孔树脂、X-5大孔树脂、NKA-9大孔树脂或S-8大孔树脂中的至少一种；优选的，所述大孔树脂为D101大孔树脂和X-5大孔树脂，所述D101大孔树脂和X-5大孔树脂的质量比为(1-5)：(10-15)，进一步优选为(1-3)：(13-15)。进一步的，所述步骤(c)中，所述混合溶液流经大孔树脂的流速为3-5BV/h，优选为4-5BV/h；和/或，所述洗脱剂包括乙醇或甲醇中的至少一种，优选为乙醇，进一步优选为70-90％乙醇；和/或，所述洗脱剂的pH为6-8，优选为7。进一步的，所述步骤(d)中，采用HPLC分离，所述HPLC分离条件包括：采用C18色谱柱，等度洗脱，流动相：乙腈-0.6％磷酸水溶液，两者体积比为(75-85)：(15-25)，用三乙胺调节pH至6-8，流速：15-25mL/min，紫外检测波长：205-215nm，柱温：12-18℃；优选的，所述流动相：乙腈-0.6％磷酸水溶液，两者体积比为(75-80)：(20-25)，用三乙胺调节pH至7-8，流速：15-20mL/min，紫外检测波长：210-215nm，柱温：15-18℃。进一步的，所述步骤(a)中，采用回流提取或超声波提取，优选为超声波提取；优选的，所述超声波提取时间为20-40min，进一步优选为30-40min；优选的，所述有机溶剂包括乙醇、甲醇、丙酮或乙醚中的至少一种，进一步优选为乙醇，更进一步优选为70-90％乙醇。进一步的，所述步骤(b)中，先用1-2mol/L碱溶液调节pH至10-12，再用1-2mol/L酸溶液调节pH至2-4；优选的，所述碱溶液包括氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液中的至少一种；优选的，所述酸溶液包括硫酸、盐酸或磷酸中的至少一种。进一步的，所述步骤(a)中，所述沙棘果皮经干燥，粉碎得到；优选的，所述沙棘果皮的干燥温度为60-85℃，干燥时间为20-40min；进一步优选为所述干燥温度为75-85℃，和/或，所述干燥时间为30-40min；优选的，所述沙棘果皮粉碎后的粒径为80-100目，优选为90-100目。本专利技术的第二目的在于提供一种沙棘中三萜酸，三萜酸包括熊果酸和齐墩果酸，熊果酸和齐墩果酸分离效果好，纯度高。本专利技术提供的沙棘中三萜酸由上述提取纯化方法得到，所述三萜酸包括熊果酸和齐墩果酸。本专利技术的第三目的在于提供一种三萜皂苷，不仅能够防止三萜酸的活性部位被氧化，还具有良好的溶解性，生物利用度高，在护肝、降血糖、降血脂、抗肥胖和抗动脉粥样硬化等方面具有优异的效果。本专利技术提供的三萜皂苷，主要由如下原料制备而成：由上述提取纯化方法得到的三萜酸或上述三萜酸和多羟基糖类，所述多羟基糖类包括葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸中的至少一种；优选的，所述三萜皂苷包括单糖三萜皂苷、二糖三萜皂苷或三糖三萜皂苷中的至少一种。本专利技术的第四目的在于提供一种三萜酸或三萜皂苷在制备药物或保健品中的应用。本专利技术将三萜酸或三萜皂苷应用于制备药物或保健品中，可用于护肝、降血糖、降血脂、抗肥胖和抗动脉粥样硬化等，长期服用能够保持体型，延缓衰老，增强机体免疫力。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术提供的沙棘中三萜酸的提取纯化方法采用有机溶剂对沙棘果皮中熊果酸、齐墩果酸及其衍生物进行充分提取，采用碱溶液和酸溶液对提取液进行处理，得到熊果酸和齐墩果酸的混合物，采用大孔树脂富集纯化熊果酸和齐墩果酸，得到纯度较高的熊果酸和齐墩果酸，最后采用HPLC或HSCCC对熊果酸和齐墩果酸进行分离。采用本专利技术的方法对熊果酸和齐墩果酸的分离效果好，熊果酸的纯度高达97.6％以上，齐墩果酸的纯度高达98.2％以上。本专利技术提供的沙棘中三萜酸包括熊果酸和齐墩果酸，熊果酸和齐墩果酸分离效果好，纯度高。本专利技术提供的三萜皂苷，不仅能够防止三萜酸的活性部位被氧化，还具有良好的溶解性，生物利用度高，在护肝、降血糖、降血脂、抗肥胖和抗动脉粥样硬化等方面具有优异的效果。本专利技术将三萜酸或三萜皂苷应用于制备药物或保健品中，可用于护肝、降血糖、降血脂、抗肥胖和抗动脉粥样硬化等，长期服用能够保持体型，延缓衰老，增强机体免疫力。附图说明为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本专利技术的熊果酸的结构式；图2为本专利技术的齐墩果酸的结构式；图3为本专利技术的熊果酸三糖皂苷的结构式；图4为本专利技术的齐墩果酸三糖皂苷的结构式。具体实施方式下面将结合附图对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。根据本专利技术的第一个方面，本专利技术提供了一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法，包括如下步骤：(a)用有机溶剂提取沙棘果皮中的熊果酸、齐墩果酸及其衍生物，得到提取液；(b)先用碱溶液处理提取液，再用酸溶液处理提取液，得到熊果酸和齐墩果酸固体，将熊果酸和齐墩果酸固体溶于有机溶剂中，得到混合溶液；(c)用大孔树脂吸附混合溶液中的熊果酸和齐墩果酸，吸附结束后用洗脱剂洗脱，浓缩，得到粗品；(d)采用HPLC或HSCCC对粗品中的熊果酸和齐墩果酸进行分离，得到纯化的熊果酸和齐墩果酸。在步骤(a)中，由于沙棘果皮中的熊果酸、齐墩果酸及其衍生物几乎不溶于水，而熊果酸、齐墩果酸及其衍生物在有机溶剂中的溶解性良好，所以本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：(a)用有机溶剂提取沙棘果皮中的熊果酸、齐墩果酸及其衍生物，得到提取液；(b)先用碱溶液处理提取液，再用酸溶液处理提取液，得到熊果酸和齐墩果酸固体，将熊果酸和齐墩果酸固体溶于有机溶剂中，得到混合溶液；(c)用大孔树脂吸附混合溶液中的熊果酸和齐墩果酸，吸附结束后用洗脱剂洗脱，浓缩，得到粗品；(d)采用HPLC或HSCCC对粗品中的熊果酸和齐墩果酸进行分离，得到纯化的熊果酸和齐墩果酸。

【技术特征摘要】
1.一种沙棘中三萜酸的提取纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：(a)用有机溶剂提取沙棘果皮中的熊果酸、齐墩果酸及其衍生物，得到提取液；(b)先用碱溶液处理提取液，再用酸溶液处理提取液，得到熊果酸和齐墩果酸固体，将熊果酸和齐墩果酸固体溶于有机溶剂中，得到混合溶液；(c)用大孔树脂吸附混合溶液中的熊果酸和齐墩果酸，吸附结束后用洗脱剂洗脱，浓缩，得到粗品；(d)采用HPLC或HSCCC对粗品中的熊果酸和齐墩果酸进行分离，得到纯化的熊果酸和齐墩果酸。2.根据权利要求1所述的沙棘中三萜酸的提取纯化方法，其特征在于，所述步骤(c)中，所述大孔树脂包括D101大孔树脂、HPD500大孔树脂、HPD600大孔树脂、X-5大孔树脂、NKA-9大孔树脂或S-8大孔树脂中的至少一种；优选的，所述大孔树脂为D101大孔树脂和X-5大孔树脂，所述D101大孔树脂和X-5大孔树脂的质量比为(1-5)：(10-15)，进一步优选为(1-3)：(13-15)。3.根据权利要求1所述的沙棘中三萜酸的提取纯化方法，其特征在于，所述步骤(c)中，所述混合溶液流经大孔树脂的流速为3-5BV/h，优选为4-5BV/h；和/或，所述洗脱剂包括乙醇或甲醇中的至少一种，优选为乙醇，进一步优选为70-90％乙醇；和/或，所述洗脱剂的pH为6-8，优选为7。4.根据权利要求1所述的沙棘中三萜酸的提取纯化方法，其特征在于，所述步骤(d)中，采用HPLC分离，所述HPLC分离条件包括：采用C18色谱柱，等度洗脱，流动相：乙腈-0.6％磷酸水溶液，两者体积比为(75-85)：(15-25)，用三乙胺调节pH至6-8，流速：15-25mL/min，紫外检测波长：205-215nm，柱温：12-18℃；优选的，所述流动相：乙腈-0.6％磷酸水溶液，两者体积比为(75-80)：(20-25)，用三乙胺调节pH至7-8，流速：...

【专利技术属性】
技术研发人员：龚晨，于雪，李婷，吴鹏，
申请(专利权)人：青海清华博众生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：青海,63