一种肿瘤血管新生体外共培养模型制造技术

本发明专利技术涉及一种微囊化肿瘤细胞与内皮细胞共培养模型。本发明专利技术取肿瘤细胞混匀于２％海藻酸钠溶液中，通过微囊发生器将细胞混悬液喷入１００ｍｍｏｌ／Ｌ氯化钙溶液内胶化，生理盐水洗涤，与０．１％多聚赖氨酸溶液反应，生理盐水洗涤，再与０．１５％海藻酸钠溶液反应后，生理盐水洗涤，用５５ｍｍｏｌ／Ｌ的柠檬酸钠溶液液化微囊核心，在ＣＯ↓［２］培养箱中培养，微囊化肿瘤细胞直接用于共培养，或冻存，取内皮细胞贴壁培养或三维生长，加入微囊化肿瘤细胞于同一培养液中，共培养，分离肿瘤细胞与内皮细胞，行基因和蛋白检测及培养液细胞因子检测。解决了Ｍａｔｒｉｇｅｌ胶方法的局限性、Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ的缺陷。具有模拟肿瘤细胞与内皮细胞的相互作用的微环境，一次制作，长期使用，降低了科研人力、财力需求。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种肿瘤血管新生体外共培养模型，其步骤如下：　　　　（１）取肿瘤细胞充分混匀于２％海藻酸钠溶液中；　　　　（２）通过微囊发生器，将细胞混悬液喷入１００ｍｍｏｌ／Ｌ氯化钙溶液内使其胶化；　　　　（３）待微胶珠硬化，生理盐水洗涤；　　　　（４）与０．１％多聚赖氨酸溶液反应后，生理盐水洗涤；　　　　（５）再与０．１５％海藻酸钠溶液反应后，生理盐水洗涤；　　　　（６）用５５ｍｍｏｌ／Ｌ的柠檬酸钠溶液液化微囊核心后，置于ＣＯ２培养箱中培养；　　　　（７）微囊化肿瘤细胞直接用于共培养，或冻存；　　　　（８）取内皮细胞贴壁培养或三维生长，加入微囊化肿瘤细胞于同一培养液中，共培养。　　　　（９）分离肿瘤细胞与内皮细胞，分别行基因和蛋白检测以及培养液细胞因子的检测。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：丁义涛，方胜，余德才，孙喜太，
申请(专利权)人：南京大学医学院附属鼓楼医院，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]