从造礁石珊瑚中提取虫黄藻基因组ＤＮＡ的试剂盒及其方法技术

本发明专利技术提供一种从造礁石珊瑚中提取虫黄藻基因组ＤＮＡ的试剂盒及其方法。试剂盒包括：试剂Ａ（裂解液）、试剂Ｂ（蛋白酶Ｅ）、试剂Ｃ（ＲＮＡａｓｅＡ）、试剂Ｄ（过饱和ＮａＣｌ溶液）、试剂Ｅ（ＤＮＡ洗涤液）、试剂Ｆ（ＤＮＡ洗脱液）。在本发明专利技术的方法中，首先用含ＳＤＳ的裂解液裂解组织细胞，然后提供一个高盐低ＰＨ的环境，使溶液中蛋白质进一步变性，而ＤＮＡ可以结合在硅胶柱上。最后在水溶性缓冲液中，ＤＮＡ就能从层析柱上定量回收。采用本试剂盒及其提取方法，可以快速便捷从不同种类的造礁石珊瑚中提取虫黄藻的基因组ＤＮＡ，所获得的ＤＮＡ可以用于分子生态学、系统进化等研究，进而满足珊瑚礁自然保护区定期监测任务的需要。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
从造礁石珊瑚中提取虫黄藻基因组ＤＮＡ的试剂盒，包含有以下试剂：（ａ）试剂Ａ：由ｐＨ８．０，１００－３００ｍＭ的Ｔｒｉｓ－Ｂｏｒｉｃ溶液、１０－１００ｍＭ的ＥＤＴＡ溶液、质量浓度１－５％的ＳＤＳ溶液、５０－２００ｍＭ的ＮａＣｌ溶液和蒸馏水按２５∶１０∶１０∶２∶５３的体积比混合而成；（ｂ）试剂Ｂ：为蛋白酶Ｅ，其浓度为５－１５ｍｇ／ｍｌ；（ｃ）试剂Ｃ：为ＲＮＡａｓｅＡ，其浓度为５－３０ｍｇ／ｍｌ；（ｄ）试剂Ｄ：为过饱和ＮａＣｌ溶液，含有５－７Ｍ的ＮａＣｌ；（ｅ）试剂Ｅ：为ＤＮＡ洗涤液，为体积浓度为６０－８０％的乙醇溶液；（ｆ）试剂Ｆ：为ＤＮＡ洗脱液，采用ｐＨ８．０，５－２０ｍＭ的ＴＥ缓冲液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：黄晖，董志军，黄良民，李元超，
申请(专利权)人：中国科学院南海海洋研究所，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]