一种冻干人淋巴细胞CD4表面抗原质控品及其制备方法技术

本发明专利技术申请的目的是提供一种冻干人淋巴细胞CD4表面抗原质控品及其制备方法，所述参照品由外周淋巴细胞经过表面或者胞内特异抗体标记，可用于流式细胞仪直接检测。不仅如此，所述参照品在制备过程中，通过特定抗原阳性细胞计数后，标定了特定细胞的浓度，因此其不仅能够给流式细胞仪相对计数检测提供参照，而且可以在绝对计数检测中被用作参照品或计数参照，尤其是用于体积法计算的流式细胞仪在不同时间、不同设备、不同人员的参照和校对。

【技术实现步骤摘要】
一种冻干人淋巴细胞CD4表面抗原质控品及其制备方法
本专利技术申请涉及一种冻干人淋巴细胞CD4表面抗原质控品及其制备方法，属于免疫学检测

技术介绍
白细胞分化抗原是白细胞(还包括血小板、血管内皮细胞等)在正常分化成熟不同谱系(lineage)和不同阶段以及活化过程中，出现或消失的细胞表面标记。它们大都是穿膜的蛋白或糖蛋白，含胞膜外区、穿膜区和胞浆区。簇分化抗原(clusterofdifferentiation，CD)T细胞在分化成熟过程中，不同的发育阶段和不同亚类的淋巴细胞可表达不同的分化抗原，这是区分淋巴细胞的重要标志。人外周血中T淋巴细胞亚群测定的临床意义：CD4细胞为辅助性T细胞，是调控免疫反应最重要的枢纽细胞。CD4+T细胞下降，常见于某些病毒感染性疾病，如艾滋病、巨细胞病毒感染；而类风湿性关节炎活动期CD4+T细胞则升高。另外，由于艾滋病病毒攻击对象是CD4细胞，所以其检测结果对艾滋病治疗效果的判断和对患者免疫功能的判断有重要作用。临床背景：T细胞是机体细胞免疫的主要细胞。其免疫源一般为寄生原生动物、真菌、外来的细胞团块(例如，移植器官或被病毒感染的自身细胞)，在本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种冻干人淋巴细胞CD4表面抗原质控品的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)收集人外周血细胞，经过密度梯度离心，收集人外周淋巴细胞；2)使用含有血清的磷酸盐缓冲液或者汉克氏液(Hank’s buffer)冲洗；3)加入抗人CD4抗体，孵育、离心后，收集细胞，重新在磷酸盐缓冲液或Hank’s液中悬浮细胞，洗脱未结合的多余抗体，离心收获抗体标记的细胞；4)将收获的细胞，加入固定液，使用震荡或者吹打的方式，充分混匀后，避光固定；5)洗脱固定液，使用流式细胞仪，计阳性细胞数，根据计数结果，在细胞冻干保护缓冲液中，稀释阳性细胞；6)将含有细胞的溶液分装后冷冻；7)抽真空冻干，至瓶内容物为白色或者淡黄...

【技术特征摘要】
1.一种冻干人淋巴细胞CD4表面抗原质控品的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)收集人外周血细胞，经过密度梯度离心，收集人外周淋巴细胞；2)使用含有血清的磷酸盐缓冲液或者汉克氏液(Hank’sbuffer)冲洗；3)加入抗人CD4抗体，孵育、离心后，收集细胞，重新在磷酸盐缓冲液或Hank’s液中悬浮细胞，洗脱未结合的多余抗体，离心收获抗体标记的细胞；4)将收获的细胞，加入固定液，使用震荡或者吹打的方式，充分混匀后，避光固定；5)洗脱固定液，使用流式细胞仪，计阳性细胞数，根据计数结果，在细胞冻干保护缓冲液中，稀释阳性细胞；6)将含有细胞的溶液分装后冷冻；7)抽真空冻干，至瓶内容物为白色或者淡黄色粉、饼状；8)从冻干机中取出，快速封口，保存。2.根据权利要求1所述的冻干人淋巴细胞CD4表面抗原质控品的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中，经静脉采血或者冲洗血沉棕黄层，收集人外周血细胞，将细胞悬液平铺在蔗糖溶液或者商品化的人淋巴细胞分离液上，离心，使得不同密度的细胞聚集，收集人外周淋巴细胞。3.根据权利要求1所述的冻干人淋巴细胞CD4表面抗原质控品的制备方法，其特征在于：所述步骤3)中，加入抗人CD4抗体，避光，15-30...

【专利技术属性】
技术研发人员：李博，
申请(专利权)人：深圳市巴德生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44