一种检测白细胞分化抗原的参照品及其制备方法技术

本发明专利技术申请提供了一种检测白细胞分化抗原的参照品及其制备方法，所述参照品由外周淋巴细胞经过表面或者胞内特异抗体标记，可用于流式细胞仪直接检测。不仅如此，所述参照品在制备过程中，通过特定抗原阳性细胞计数后，标定了特定细胞的浓度，因此其不仅能够给流式细胞仪相对计数检测提供参照，而且可以在绝对计数检测中被用作参照品或计数参照，尤其是用于体积法计算的流式细胞仪在不同时间、不同设备、不同人员的参照和校对。

【技术实现步骤摘要】
一种检测白细胞分化抗原的参照品及其制备方法
本专利技术申请涉及一种检测白细胞分化抗原参照品的制备方法，以及由该方法制备得到的参照品，属于免疫学检测

技术介绍
白细胞分化抗原是白细胞(还包括血小板、血管内皮细胞等)在正常分化成熟不同谱系(lineage)和不同阶段以及活化过程中，出现或消失的细胞表面标记。它们大都是穿膜的蛋白或糖蛋白，含胞膜外区、穿膜区和胞浆区。簇分化抗原(clusterofdifferentiation，CD)T细胞在分化成熟过程中，不同的发育阶段和不同亚类的淋巴细胞可表达不同的分化抗原，这是区分淋巴细胞的重要标志。人外周血中白细胞表面抗原临床价值在于：1、CD3细胞代表T淋巴细胞总数，表示人体细胞免疫功能状态。CD3+T细胞增高见于某些自身免疫性疾病(如SLE)、重症肌无力、慢性活动性肝炎。CD3+T淋巴细胞数减低，见于恶性肿瘤、自身免疫疾病、先天性免疫缺陷。2、CD19+细胞的数量可间接反映机体的体液免疫功能。B细胞升高多见于慢性细菌感染，急/慢B淋巴细胞白血病，慢性肝病。B细胞下降主要见于原发性B细胞缺陷，严重联合型免疫缺陷。3、CD3-/CD19+反本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测白细胞分化抗原的参照品，其特征在于：为冻干的阳性细胞悬液，由荧光抗体标记的阳性细胞和保存剂组成，保存剂中含有缓冲液。

【技术特征摘要】
1.一种检测白细胞分化抗原的参照品，其特征在于：为冻干的阳性细胞悬液，由荧光抗体标记的阳性细胞和保存剂组成，保存剂中含有缓冲液。2.权利要求1所述的检测白细胞分化抗原的参照品的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)收集培养的细胞或者人外周血淋巴细胞，然后与缓冲液混合成细胞悬液；2)在所述细胞悬液中加入抗人CD3和抗人CD19抗体，进行孵育，然后离心收集细胞，重新在缓冲液中悬浮细胞，洗脱未结合的多余抗体，离心得到抗体标记的细胞；3)将得到的细胞加入细胞固定液，使用震荡或者吹打的方式，充分混匀后，避光固定；4)洗脱细胞固定液，使用流式细胞仪，计阳性细胞数，根据计数结果，在细胞冻干保护缓冲液中，稀释阳性细胞；5)将含有细胞的溶液分装后冷冻；6)抽真空冻干，至瓶内容物为白色或者淡黄色粉、饼状；7)从冻干机中取出，快速封口，保存。3.权利要求2所述的检测白细胞分化抗原的参照品的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中，经静脉采血或者冲洗血沉棕黄层，收集人外周血细胞，将细胞悬液平铺在蔗糖溶液或者商品化的人淋巴细胞分离液上离心，使得不同密度的细胞聚集，收集人外周淋巴细胞，然后使用含有血清的磷酸盐缓冲液或者汉克氏液混合成细胞悬液。4.权利要求2所述的检测白细胞分化抗原的参照品的制备方法，其特征在于：所...

【专利技术属性】
技术研发人员：李博，
申请(专利权)人：深圳市巴德生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44