The invention discloses a primer group for detecting the source components of mink, which includes a primer OF and an outer primer OB, an inner primer IF and an inner primer IB, a ring primer and a molecular beacon. At the same time discloses a detection method of mink, which comprises the following steps: (1) extracting sample DNA; (2) isothermal amplification reaction using constant temperature detection primer set of detected samples were amplified when isothermal amplification, detection tube was placed in the instrument can provide constant temperature and fluorescence detection, every 30 ~ 60s a fluorescence signal acquisition; (3) the results of judgment: according to whether the \S\ type amplification curve to determine the negative and positive results, \S\ type amplification curve as a positive result, and negative results. The detection method is easy to detect, overcomes the shortage of constant temperature detection technology, improves the accuracy and sensitivity of detection, and has a broad application prospect.
【技术实现步骤摘要】
水貂源性成分的恒温荧光法检测引物组、试剂盒及检测方法
本专利技术涉及生物检测领域,特别涉及一种水貂源性成分的恒温荧光法检测引物组及其检测方法。
技术介绍
近年来,由于水貂养殖业快速发展,养殖数量不断增加,水貂肉的处理成为行业内的问题。在整个产业链中,水貂有价值的只有皮毛,而肉因为味道不好,因此并没有市场,价格十分便宜。市场上的无良商家会从养殖户手中以每斤2-3元的价格大量收取水貂肉,然后通过添加各种化学品,把味道调制成羊肉或牛肉的味道,冒充羊肉或牛肉销售以牟取暴利。为此,建立快速、准确的水貂源成分检测方法势在必行。目前食品和饲料中动物源性成分检测方法主要有以下几种:1)以显微镜观察为基础的物理方法;2)以高效液相色谱技术为基础的化学方法;3)以检测蛋白为基础的免疫学方法;4)以检测DNA为基础的分子生物学方法。其中显微镜学方法设备便宜、简单易行,但要求操作者具备相当的实际经验,所测结果具有一定的主观性。高效液相色谱技术主要是蛋白质分析方法,在较高温度及压力下,蛋白质的二、三级结构发生变化,氨基酸间共价键断裂,蛋白质降解至多肽,因此此方法不能检测热处理后的蛋白质。免疫学方法简单、方便而且能够对微量的蛋白进行检测,但品种接近的蛋白间能够发生交叉反应,甚至其它品种的微量蛋白常常能够掩盖品种特异性的条带,因此会产生假阳性结果。分子生物学方法主要是利用DNA分析技术,根据基因组中的DNA序列来确定物种,并且对于经过热加工的食品仍能很好地区分动物来源。其中恒温扩增技术具有快速简便、操作准确、容易普及、安全可靠的优点,自建立来已得到广泛的应用,并在原基础上发展出采用SY ...
【技术保护点】
水貂的恒温检测引物组,包括外引物OF和外引物OB、内引物IF和内引物IB、环引物和分子信标,其核苷酸序列分别如下所示:外引物OF:5’‑GATCTCATCCGACTCTCC‑3’(SEQ ID NO.1);外引物OB:5’‑GGATAGAATAGCTAGTGTT‑3’(SEQ ID NO.2);内引物IF:5’‑AGGGGTGAAAGGGGATTTTGTCATGAAACAGGATCCAATAAC‑3’(SEQ ID NO.3);内引物IB:5’‑TATCCTACTACTGGCTATGCACTACACCGCAGTATAATTGTCTG‑3’(SEQ ID NO.4);环引物:5’‑AATCAGATGGGATTCCAG‑3’(SEQ ID NO.5);分子信标:GACCTGCTTGTGTTGGCTACTGAGGAGCGCAGGTC(SEQ ID NO.6)。
【技术特征摘要】
1.水貂的恒温检测引物组,包括外引物OF和外引物OB、内引物IF和内引物IB、环引物和分子信标,其核苷酸序列分别如下所示:外引物OF:5’-GATCTCATCCGACTCTCC-3’(SEQIDNO.1);外引物OB:5’-GGATAGAATAGCTAGTGTT-3’(SEQIDNO.2);内引物IF:5’-AGGGGTGAAAGGGGATTTTGTCATGAAACAGGATCCAATAAC-3’(SEQIDNO.3);内引物IB:5’-TATCCTACTACTGGCTATGCACTACACCGCAGTATAATTGTCTG-3’(SEQIDNO.4);环引物:5’-AATCAGATGGGATTCCAG-3’(SEQIDNO.5);分子信标:GACCTGCTTGTGTTGGCTACTGAGGAGCGCAGGTC(SEQIDNO.6)。2.一种水貂的恒温检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的恒温检测引物组。3.根据权利要求2所述的水貂的恒温检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括:DNA聚合酶、恒温反应液、阳性对照和阴性对照。4.根据权利要求3所述的水貂的恒温检测试剂盒,其特征在于,恒温反应液由10mMdNTP、150mM...
【专利技术属性】
技术研发人员:高芳,申洪杰,黄曦,郭吉原,孙春华,
申请(专利权)人:广州迪澳医疗科技有限公司,广州迪澳生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:广东,44
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