一种免标记荧光适配体传感器及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种免标记荧光适配体传感器及其制备方法和在快速检测虾致敏蛋白中的应用。本发明专利技术免标记荧光适配体传感器包括磁性纳米微球、捕获探针和适配体，磁性纳米微球表面修饰有捕获探针，捕获探针与适配体通过碱基互补配对连接形成双链DNA；适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，捕获探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明专利技术免标记荧光适配体传感器用于虾致敏蛋白的快速检测，具有抗干扰能力强、检测准确度高、稳定性好、重复性强等优点，具有良好的应用前景和市场价值。

Label free fluorescent aptamer sensor and its preparation method and Application

The invention discloses a label free fluorescent aptamer sensor and its preparation method and its application in rapid detection of shrimp sensitizing protein. The invention of label free fluorescent aptamer sensor including magnetic nanoparticles, capture probe and aptamer, magnetic nanoparticles surface modified capture probe and capture probe aptamer through complementary base pairing connected to form a double stranded DNA aptamer; nucleotide sequence of SEQ ID NO:1, nucleotide sequence capture probe is shown such as SEQ ID NO:2. The label free fluorescent aptamer sensor has the advantages of strong anti-interference ability, high detection accuracy, good stability, strong repeatability, etc., and has good application prospect and market value.

【技术实现步骤摘要】
一种免标记荧光适配体传感器及其制备方法和应用
本专利技术涉及蛋白分析检测
，具体涉及一种利用适配体识别技术和免标记荧光探针制得的免标记荧光适配体传感器及其在虾致敏蛋白的快速检测中的应用。
技术介绍
随着人们生活水平的日渐提高，食物过敏现已逐渐成为一个公众广泛关注的食品安全问题。然而，对于食物过敏还没有有效的医学治疗方法，最有效的手段是严格避免接触食物过敏原。因此，全面认识食物过敏发生机制和开发不同过敏原的检测分析方法显得尤为必要。虾及其制品味道鲜美，营养丰富，作为一种重要的海鲜产品，越来越受到消费者的喜爱。但虾原肌球蛋白是世界上公认的八大食物致敏原之一，具有高致敏性，约20％的过敏病人对虾过敏，小儿发病率高达60％，严重影响了患者的生活质量。所以，急需研究出快速检测虾致敏蛋白的方法，以达到预防的目的。目前，有关虾原肌球蛋白的检测方法主要包括基于抗体的酶联免疫法、色谱法、质谱法等，这些检测手段都比较繁琐，需要昂贵的设备和专业人才。因此，如何构建快速简便、灵敏有效的虾致敏蛋白检测方法引起了业内的广泛关注。核酸适配体是一类在体外通过指数富集配体系统进化技术(Systematicevo本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种免标记荧光适配体传感器，其特征在于，包括磁性纳米微球、捕获探针和适配体，所述磁性纳米微球表面修饰有所述捕获探针，所述捕获探针与所述适配体通过碱基互补配对连接形成双链DNA；所述适配体的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述捕获探针的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

【技术特征摘要】
1.一种免标记荧光适配体传感器，其特征在于，包括磁性纳米微球、捕获探针和适配体，所述磁性纳米微球表面修饰有所述捕获探针，所述捕获探针与所述适配体通过碱基互补配对连接形成双链DNA；所述适配体的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示，所述捕获探针的核苷酸序列如SEQIDNO:2所示。2.根据权利要求1所述的免标记荧光适配体传感器，其特征在于，所述磁性纳米微球的直径为10～500nm。3.根据权利要求1所述的免标记荧光适配体传感器，其特征在于，所述磁性纳米微球为用聚合材料或二氧化硅包裹四氧化三铁纳米粒子的微球，其表面连接有活性基团。4.根据权利要求3所述的免标记荧光适配体传感器，其特征在于，所述聚合材料为聚苯乙烯、聚乙烯或聚氯乙烯。5.根据权利要求3所述的免标记荧光适配体传感器，其特征在于，所述活性基团为-COOH、-NH2或-SH。6.权利要求1～5中任意一条权利要求所述免标记荧光适配体传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将磁性纳米微球分散于含有捕获探针、磷酸盐缓冲液和偶联试剂的混合液中，使所述捕获探针通过其5’端活性基团与所述磁性纳米微球表面的活性基团通过共价键固定在所述磁性纳米微球的表面，得到组装有...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴清平，张友雄，张菊梅，孙铭，莫树平，王涓，柏建玲，韦献虎，蔡芷荷，卢勉飞，
申请(专利权)人：广东省微生物研究所广东省微生物分析检测中心，广东环凯微生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44