The invention discloses a method for detecting the content of avian interleukin 17a and a special kit for detecting the content of the avian interleukin. The invention uses chIL 17a monoclonal antibody was established for chIL 17a at the protein level of double sandwich ELISA detection method. Experimental results show that the anti chIL 17a monoclonal antibody with high specificity and affinity, can accurately reflect the content of serum or cell supernatant of chIL 17a, and the detecting method of the invention is fast, efficient and accurate, solves the problem of using fluorescence quantitative PCR detection method has complicated operation that is time-consuming and easily affected by external conditions and other issues, not only contribute to the dynamic changes in the body of the evaluation of chIL 17a, provide a good reference for the prevention and treatment of disease, but also contribute to the solution of avian infectious diseases occurrence, development, prognosis and body protection the immune response of dynamic.
【技术实现步骤摘要】
一种检测禽白细胞介素17a含量的方法及其专用试剂盒
本专利技术属于生物
,具体涉及一种检测禽白细胞介素17a(IL-17a)含量的方法及其专用试剂盒。
技术介绍
IL-17a是活化的T细胞分泌的IL-17细胞因子家族中的主要成员,IL-17a是一种强大的促炎症细胞因子,能诱导成纤维细胞、上皮细胞和内皮细胞等组织细胞释放IL-6、IL-8、TNF-α、G-CSF等细胞因子进而增强炎症反应。此外,IL-17还能通过上调组织细胞表达CXC趋化因子,在体内炎症部位招募大量中性粒细胞,并使中性粒细胞蛋白酶和过氧化物酶等蛋白水解酶活性增强,一方面有利于病原微生物的清除,另一方面还能导致炎症反应和组织损伤。单克隆抗体技术是利用在体外培养能大量无限增殖但不能分泌特异性抗体的骨髓瘤细胞和能产生特异性抗体但在体外不能无限增殖的B淋巴细胞进行细胞融合,获得既能够无限增值又能够分泌抗体的杂交瘤细胞。只有融合的杂交瘤细胞能够在选择培养基中存活和增殖,又经过三次亚克隆及间接ELISA方法的筛选,最终获得能分泌特异性识别单一抗原表位抗体的杂交瘤细胞,经小鼠腹腔内培养,即可无限制地大量获得 ...
【技术保护点】
抗chIL‑17a的单克隆抗体,是由保藏号为CGMCC No.13830的杂交瘤细胞株ZML‑1分泌的。
【技术特征摘要】
1.抗chIL-17a的单克隆抗体,是由保藏号为CGMCCNo.13830的杂交瘤细胞株ZML-1分泌的。2.抗chIL-17a的单克隆抗体,是由保藏号为CGMCCNo.13831的杂交瘤细胞株ZML-2分泌的。3.一株分泌抗chIL-17a的单克隆抗体的杂交瘤细胞株ZML-1,其保藏号为CGMCCNo.13830。4.一株分泌抗chIL-17a的单克隆抗体的杂交瘤细胞株ZML-2,其保藏号为CGMCCNo.13831。5.一种检测或辅助检测待测样品中chIL-17a含量的酶联免疫试剂盒,其包括权利要求1所述的单克隆抗体和/或权利要求2所述的单克隆抗体。6.权利要求1或2所述的单克隆抗体或权利要求3或4所述的杂交瘤细胞株或权利要求5所述的酶联免疫试剂盒在检测或辅助检测待测样品中chIL-17a含量中的应用;或,权利要求1或2所述的单克隆抗体或权利要求3或4所述的杂交瘤细胞株在制备检测或辅助检测待测样品中chIL-17a含量的试剂或胶体金试纸条或试剂盒中的应用。7.一种检测或辅助检测待测样品中chIL-17a含量的方法,是以权利要求1所述的单克隆抗体为包被抗体、权利要求2所述的单克隆抗体为检测抗体的双抗体夹心ELISA检测方法。8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:所述方法包括如下步骤:(1)将权利要求1所述的单克隆抗体包被到酶标板上,洗涤;(2)封闭(1)得到的酶标板,洗涤;(3)向(2)得到的酶标板中加入chIL-17a标准品或待测样品,孵育,洗涤;(4)向(3)得到的酶标板中...
【专利技术属性】
技术研发人员:郑世军,赵明亮,王永强,李晓齐,曹红,
申请(专利权)人:中国农业大学,
类型:发明
国别省市:北京,11
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