一种用于脐带间充质干细胞的培养基制造技术

本发明专利技术公开了一种用于脐带间充质干细胞的培养基，由以下组分组成：基础培养基、人血清白蛋白、杨梅素、三七总皂苷、大黄素、亚油酸、胰蛋白酶、抑肽酶、光蛋白聚糖、碱性成纤维细胞生长因子、叶酸、β‑巯基乙醇、黄芪多糖、转铁蛋白、维生素、氨基酸。本发明专利技术的培养基将基础培养基、人血清白蛋白、杨梅素、三七总皂苷、大黄素、亚油酸、胰蛋白酶、抑肽酶、光蛋白聚糖、碱性成纤维细胞生长因子、叶酸、β‑巯基乙醇、黄芪多糖、转铁蛋白、维生素、氨基酸进行复配，各组分起到协同作用，能够成功培养脐带间充质干细胞，促进脐带间充质干细胞增殖，提高脐带间充质干细胞的生长速率，提高脐带间充质干细胞在体外增殖分化的活性，降低细胞凋亡率。

【技术实现步骤摘要】
一种用于脐带间充质干细胞的培养基
本专利技术属于生物
，特别涉及一种用于脐带间充质干细胞的培养基。
技术介绍
脐带间充质干细胞(MesenchymalStemCells，MSCs)是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞，它能分化成许多种组织细胞，具有广阔的临床应用前景。脐带间充质干细胞具有较高的分化潜能，可向多个方向进行分化。它在骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、内皮和心肌等组织工程方面具有广阔的临床应用前景。有报道从人脐带中分离出间充质干细胞，且细胞含量、增殖能力优于骨髓间充质干细胞，免疫原性比骨髓间充质干细胞低，并且具有取材方便，无伦理学争议等优点，因此越来越受到研究工作者们的关注。干细胞的培养体系主要应用含动物血清(如胎牛血清)的培养基，在此种环境下生长的干细胞，其内部结构会发生何种变化尚未可知。现有的培养基存在脐带间充质干细胞的生长速率低的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种用于脐带间充质干细胞的培养基，以提高脐带间充质干细胞的生长速率，以及脐带间充质干细胞在体外增殖分化的活性。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是：一种用于脐带间充质干细胞的培养基，由以下组分组成：基础培养基、人血清白蛋白、杨梅素、三七总皂苷、大黄素、亚油酸、胰蛋白酶、抑肽酶、光蛋白聚糖、碱性成纤维细胞生长因子、叶酸、β-巯基乙醇、黄芪多糖、转铁蛋白、维生素、氨基酸。具体的，各组分的含量如下：基础培养基10-50g/L人血清白蛋白5-20g/L杨梅素5-20mg/L三七总皂苷5-20mg/L大黄素5-20mg/L亚油酸2-10mg/L胰蛋白酶1-10mg/L抑肽酶4-10mg/L光蛋白聚糖5-20μg/L碱性成纤维细胞生长因子1-10μg/L叶酸1-15mg/Lβ-巯基乙醇2-10mg/L黄芪多糖50-80mg/L转铁蛋白1-10mg/L维生素80-500mg/L氨基酸80-500mg/L。优选的，各组分的含量如下：基础培养基20-30g/L人血清白蛋白10-15g/L杨梅素10-15mg/L三七总皂苷10-15mg/L大黄素10-15mg/L亚油酸5-8mg/L胰蛋白酶4-8mg/L抑肽酶6-9mg/L光蛋白聚糖10-15μg/L碱性成纤维细胞生长因子2-8μg/L叶酸5-10mg/Lβ-巯基乙醇5-8mg/L黄芪多糖60-70mg/L转铁蛋白2-8mg/L维生素180-360mg/L氨基酸180-360mg/L。更优选的，各组分的含量如下：基础培养基24g/L人血清白蛋白12g/L杨梅素12mg/L三七总皂苷12mg/L大黄素13mg/L亚油酸6mg/L胰蛋白酶5mg/L抑肽酶8mg/L光蛋白聚糖13μg/L碱性成纤维细胞生长因子5μg/L叶酸8mg/Lβ-巯基乙醇6mg/L黄芪多糖68mg/L转铁蛋白5mg/L维生素280mg/L氨基酸260mg/L。所述人血清白蛋白为人脐血人血清白蛋白。所述基础培养基为IMDM培养基。所述维生素为水溶性维生素，包括维生素B1，维生素B2和维生素C等。所述氨基酸为多种氨基酸复合物，包括L-脯氨酸、L-丝氨酸、L-丙氨酸、L-异亮氨酸、L-门冬氨酸、L-酪氨酸、L-谷氨酸、L-苯丙氨酸、精氨酸、赖氨酸、缬氨酸、苏氨酸、组氨酸、甲硫氨酸、胱氨酸甘氨酸等的部分或者全部。有益效果：本专利技术的培养基将基础培养基、人血清白蛋白、杨梅素、三七总皂苷、大黄素、亚油酸、胰蛋白酶、抑肽酶、光蛋白聚糖、碱性成纤维细胞生长因子、叶酸、β-巯基乙醇、黄芪多糖、转铁蛋白、维生素、氨基酸进行复配，各组分起到协同作用，能够成功培养脐带间充质干细胞，促进脐带间充质干细胞增殖，提高脐带间充质干细胞的生长速率，提高脐带间充质干细胞在体外增殖分化的活性，降低细胞凋亡率。具体实施方式根据下述实施例，可以更好的理解本专利技术。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的具体的物料配比、工艺条件及其结果仅用于说明本专利技术，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本专利技术。实施例1基础培养基24g/L，人血清白蛋白12g/L，杨梅素12mg/L，三七总皂苷12mg/L，大黄素13mg/L，亚油酸6mg/L，胰蛋白酶5mg/L，抑肽酶8mg/L，光蛋白聚糖13μg/L，碱性成纤维细胞生长因子5μg/L，叶酸8mg/L，β-巯基乙醇6mg/L，黄芪多糖68mg/L，转铁蛋白5mg/L，维生素280mg/L，氨基酸260mg/L。采用上述配方制备培养基，按照常规培养方法进行脐带间充质干细胞的培养。实施例2基础培养基10g/L，人血清白蛋白15g/L，杨梅素10mg/L，三七总皂苷15mg/L，大黄素10mg/L，亚油酸2mg/L，胰蛋白酶10mg/L，抑肽酶10mg/L，光蛋白聚糖10μg/L，碱性成纤维细胞生长因子1μg/L，叶酸15mg/L，β-巯基乙醇10mg/L，黄芪多糖80mg/L，转铁蛋白1mg/L，维生素360mg/L，氨基酸180mg/L。采用上述配方制备培养基，按照常规培养方法进行脐带间充质干细胞的培养。实施例3基础培养基50g/L，人血清白蛋白5g/L，杨梅素5mg/L，三七总皂苷20mg/L，大黄素5mg/L，亚油酸8mg/L，胰蛋白酶1mg/L，抑肽酶4mg/L，光蛋白聚糖20μg/L，碱性成纤维细胞生长因子8μg/L，叶酸5mg/L，β-巯基乙醇2mg/L，黄芪多糖50mg/L，转铁蛋白3mg/L，维生素500mg/L，氨基酸80mg/L。采用上述配方制备培养基，按照常规培养方法进行脐带间充质干细胞的培养。实施例4基础培养基30g/L，人血清白蛋白10g/L，杨梅素15mg/L，三七总皂苷10mg/L，大黄素15mg/L，亚油酸8mg/L，胰蛋白酶8mg/L，抑肽酶6mg/L，光蛋白聚糖15μg/L，碱性成纤维细胞生长因子2μg/L，叶酸5mg/L，β-巯基乙醇8mg/L，黄芪多糖60mg/L，转铁蛋白2mg/L，维生素180mg/L，氨基酸500mg/L。采用上述配方制备培养基，按照常规培养方法进行脐带间充质干细胞的培养。实施例5基础培养基50g/L，人血清白蛋白5g/L，杨梅素20mg/L，三七总皂苷5mg/L，大黄素20mg/L，亚油酸4mg/L，胰蛋白酶1mg/L，抑肽酶4mg/L，光蛋白聚糖5μg/L，碱性成纤维细胞生长因子10μg/L，叶酸1mg/L，β-巯基乙醇2mg/L，黄芪多糖50mg/L，转铁蛋白10mg/L，维生素240mg/L，氨基酸240mg/L。采用上述配方制备培养基，按照常规培养方法进行脐带间充质干细胞的培养。以上所述仅是本专利技术的优选实施方式，应当指出，对于本
的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本专利技术的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于脐带间充质干细胞的培养基，其特征在于：由以下组分组成：基础培养基、人血清白蛋白、杨梅素、三七总皂苷、大黄素、亚油酸、胰蛋白酶、抑肽酶、光蛋白聚糖、碱性成纤维细胞生长因子、叶酸、β‑巯基乙醇、黄芪多糖、转铁蛋白、维生素、氨基酸。

【技术特征摘要】
1.一种用于脐带间充质干细胞的培养基，其特征在于：由以下组分组成：基础培养基、人血清白蛋白、杨梅素、三七总皂苷、大黄素、亚油酸、胰蛋白酶、抑肽酶、光蛋白聚糖、碱性成纤维细胞生长因子、叶酸、β-巯基乙醇、黄芪多糖、转铁蛋白、维生素、氨基酸。2.根据权利要求1所述的用于脐带间充质干细胞的培养基，其特征在于：各组分的含量如下：基础培养基10-50g/L人血清白蛋白5-20g/L杨梅素5-20mg/L三七总皂苷5-20mg/L大黄素5-20mg/L亚油酸2-10mg/L胰蛋白酶1-10mg/L抑肽酶4-10mg/L光蛋白聚糖5-20μg/L碱性成纤维细胞生长因子1-10μg/L叶酸1-15mg/Lβ-巯基乙醇2-10mg/L黄芪多糖50-80mg/L转铁蛋白1-10mg/L维生素80-500mg/L氨基酸80-500mg/L。3.根据权利要求2所述的用于脐带间充质干细胞的培养基，其特征在于：各组分的含量如下：基础培养基20-30g/L人血清白蛋白10-15g/L杨梅素10-15mg/L三七总皂苷10-15mg/L大黄素10-15mg/L亚油酸5-8mg/L胰蛋白酶4-8mg/L抑肽酶6-9mg/L光蛋白聚糖10-1...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱学义，王小龙，张雪梅，王豪东，王彦，魏天迪，
申请(专利权)人：河南省银丰生物工程技术有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41