The present invention relates to a method for extracting, separating and purifying four main anthocyanins from blackcurrant fruit residue. The aim is to provide a simple, economical, green and high yield method for extracting and purifying four kinds of high-purity anthocyanins from blackcurrant fruit pomace. This method takes the black currant industrial waste production and processing of the broken coupling enzymatic hydrolysis technology, vacuum cavitation assisted extraction and macroporous resin resin preconcentration technique, reverse voltage flash chromatography and low temperature crystallization and recrystallization technology, the purity of 95% delphinidin 3 O, delphinium glucoside 3 O rutinoside, 3 O cyanidin glucoside and cyanidin O 3 rutinoside four anthocyanin monomer composition of raw material by homogenate. The method has the advantages of rich raw material, easy to obtain, short process time, less solvent consumption, high purity of anthocyanin and low production cost, and is suitable for large-scale chemical industry production.
【技术实现步骤摘要】
一种从黑加仑果渣中提取分离纯化四种主要花色苷的方法
本专利技术涉及一种从黑加仑果渣中提取分离纯化高纯度四种花色苷的方法,属于植物次生代谢产物分离纯化领域。
技术介绍
黑加仑,学名黑穗醋栗(RibesnigrruuL.),俗称黑豆果,别名黑夏果,为虎耳草科(saxifragaceae)、茶蕉子属(Ribes)的一种落叶小灌木,主产于我国东北地区和新疆北部,其果实为暗紫褐色小浆果,可以食用,也可以加工成果汁、果酱等食品。黑加仑含有丰富的糖、有机酸、多种维生素、花色苷、活性矿物质及特殊芳香成分,具有很高的营养价值和药用价值。其中总花色苷含量为3.5mg/g鲜果重(张志东2002)。目前己经知道的黑加仑的治疗功能包括痛风、肾结石、膀肤炎、出疹热、蛋白尿、贫血病、水肿、风湿病、痢疾、胃肠炎、口腔和咽喉疾病、支气管咳嗽等(赵新淮1998)。花色苷(Anthocyanin)是一类广泛存在于植物中的水溶性色素,属于类黄酮化合物,花色苷是花青素与糖以糖苷键结合而成的一类化合物,广泛存在于植物的花、果实、茎、叶和根器官的细胞液中,使其呈现由红、紫红到兰等不同颜色。花色苷它不但是一种很好的天然食用色素,而且具有美容、养颜、降脂、减肥和抗衰老等重要的生理功能(金海英2006)。花色苷的主要作用在于清除自由基,对花色苷成分药理研究发现其有促进视红素再合成、改善循环、抗溃疡、抗炎症等多种药理活性,可以明显改善用眼疲劳(李春阳2006)。黑加仑浆果资源在工厂生产黑加仑果制品后,剩余的果渣现在基本上一部分作为粗加工产品如果酱,果糖等的原料,附加值低,另一部分作废弃物处理,造成了资源的浪费 ...
【技术保护点】
一种从黑加仑果渣中提取分离纯化四种主要花色苷的方法,其特征在于按如下工艺步骤进行:(1).匀浆破碎偶合酶水解黑加仑果渣:将黑加仑果渣加入一定量的水进行匀浆破碎,破碎一定时间之后,将得到黑加仑果渣浆加入酶放入恒温摇床中进行酶解,抽滤,收集滤液滤渣;(2).负压空化强化提取黑加仑滤渣:将得到的黑加仑滤渣用乙醇溶液进行负压空化强化提取,提取结束后进行抽滤,将得到的滤液与步骤(1)中的滤液合并,减压浓缩回收除去溶剂,得到黑加仑浸膏;(3).大孔吸附树脂富集黑加仑花色苷:将得到的浸膏加入适量的水溶解进行离心,将得到的上清液加入大孔吸附树脂柱进行吸附富集,然后用蒸馏水进行非目标化合物的洗脱,弃去蒸馏水洗脱液,再用一定浓度的乙醇洗脱,收集洗脱液;减压回收除去溶剂,得到黑加仑花色苷树脂富集物;(4).中压快闪反相色谱分离花色苷单体:步骤(3)得到的富集物用一定比例水,甲醇,甲酸溶液刚好溶解后上反相硅胶中压柱,用不同比例的溶剂进行等梯度洗脱,收集相应的洗脱液得到相应的花色苷单体;(5).低温晶析和重结晶黑加仑花色苷:将得到的相应花青素成分经过低温晶析和重结晶得到纯度可达95%的花色苷单体成分。
【技术特征摘要】
1.一种从黑加仑果渣中提取分离纯化四种主要花色苷的方法,其特征在于按如下工艺步骤进行:(1).匀浆破碎偶合酶水解黑加仑果渣:将黑加仑果渣加入一定量的水进行匀浆破碎,破碎一定时间之后,将得到黑加仑果渣浆加入酶放入恒温摇床中进行酶解,抽滤,收集滤液滤渣;(2).负压空化强化提取黑加仑滤渣:将得到的黑加仑滤渣用乙醇溶液进行负压空化强化提取,提取结束后进行抽滤,将得到的滤液与步骤(1)中的滤液合并,减压浓缩回收除去溶剂,得到黑加仑浸膏;(3).大孔吸附树脂富集黑加仑花色苷:将得到的浸膏加入适量的水溶解进行离心,将得到的上清液加入大孔吸附树脂柱进行吸附富集,然后用蒸馏水进行非目标化合物的洗脱,弃去蒸馏水洗脱液,再用一定浓度的乙醇洗脱,收集洗脱液;减压回收除去溶剂,得到黑加仑花色苷树脂富集物;(4).中压快闪反相色谱分离花色苷单体:步骤(3)得到的富集物用一定比例水,甲醇,甲酸溶液刚好溶解后上反相硅胶中压柱,用不同比例的溶剂进行等梯度洗脱,收集相应的洗脱液得到相应的花色苷单体;(5).低温晶析和重结晶黑加仑花色苷:将得到的相应花青素成分经过低温晶析和重结晶得到纯度可达95%的花色苷单体成分。2.根据权利要求1所述的匀浆破碎偶合酶水解黑加仑果渣技术,其特征在于加入按质量体积比5~9倍原材料的水进行匀浆破碎,连续匀浆破碎三次,每次4~9分钟。将匀浆破碎后得到的浆液用柠檬酸或盐酸将PH值调节到3~6,按果渣质量比20~60mg/g加入纤维素酶、果胶酶或上述两种酶的混合酶,然后将浆液放入恒温摇床中,在温度20~50℃酶解1~5h,抽滤,收集滤液滤渣。3.根据权利要求1...
【专利技术属性】
技术研发人员:付玉杰,焦骄,黄玉岩,顾成波,李璐,崔琦,刘巨钊,
申请(专利权)人:东北林业大学,
类型:发明
国别省市:黑龙江,23
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