一种用DSC作为活化剂的细菌多糖蛋白结合疫苗的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种细菌多糖蛋白结合疫苗的制备方法。所述制备方法中细菌多糖与蛋白共价结合前，细菌多糖首先与N,N’‑二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)在pH为8.0‑9.5碱性水溶液条件下进行活化反应，形成细菌多糖的琥珀酰亚胺碳酸酯。本发明专利技术采用N,N’‑二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)作为细菌多糖活化剂，毒性较低，环保，成本低，降低疫苗制造的成本。活化多糖时间短，且步骤较少，完成多糖活化到多糖与蛋白质结合整个周期4‑5天时间，而且游离多糖含量较低，动物免疫原性较好。

【技术实现步骤摘要】
一种用DSC作为活化剂的细菌多糖蛋白结合疫苗的制备方法
本专利技术属于疫苗制备
，尤其涉及一种用DSC作为活化剂的细菌多糖蛋白结合疫苗的制备方法。
技术介绍
目前国内外在细菌多糖蛋白结合疫苗制备时，使用的细菌多糖活化剂为溴化氰(CNBr)、1-氰基-4-二甲氨基吡啶四氟硼酸酯(CDAP)、高碘酸钠、碳二亚胺(EDAC)，此四种多糖活化剂在活化细菌多糖时都有一些不足。如，CNBr为剧毒物品，其用于细菌多糖活化时，对环境造成一定的污染以及存在一些使用的安全隐患；CDAP虽其毒性没有CNBr强，但CDAP价格较为昂贵，增加了疫苗制造的成本；高碘酸钠作为多糖活化剂，其将多糖结构破坏，并将多糖的羟基氧化为醛基，且整个反应周期较长，需要14天左右，且高碘酸钠活化法对多糖结构有破坏，步骤繁多；EDAC作为多糖活化剂，其对多糖结构要求较高，即多糖结构中要含有游离羧基，EDAC活化多糖中的羧基进而与ADH连接，形成多糖-ADH衍生物。基于以上问题，有必要研究其他的细菌多糖活化剂。N,N'-二琥珀酰亚胺基碳酸酯(DSC)，英文名为N,N'-Disuccinimidylcarbonate，CAS登记本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种细菌多糖蛋白结合疫苗的制备方法，其特征在于，所述制备方法中细菌多糖与蛋白共价结合前，细菌多糖首先与N,N’‑二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)在pH为8.0‑9.5碱性水溶液条件下进行活化反应，形成细菌多糖的琥珀酰亚胺碳酸酯。

【技术特征摘要】
1.一种细菌多糖蛋白结合疫苗的制备方法，其特征在于，所述制备方法中细菌多糖与蛋白共价结合前，细菌多糖首先与N,N’-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)在pH为8.0-9.5碱性水溶液条件下进行活化反应，形成细菌多糖的琥珀酰亚胺碳酸酯。2.如权利要求1所述的细菌多糖蛋白结合疫苗的制备方法，其特征在于，所述细菌多糖与N,N’-二琥珀酰亚胺碳酸酯(DSC)的质量比为1：1-1：3。3.如权利要求1所述的细菌多糖蛋白结合疫苗的制备方法，其特征在于，所述活化反应中细菌多糖以1-20mg/mL的浓度溶解于0.1～0.3mol/L的NaCl溶液中。4.如权利要求1所述的细菌多糖蛋白结合疫苗的制备方法，其特征在于，所述细菌多糖为b型流感嗜血杆菌多糖，奈瑟氏脑膜炎球菌血清群A群、肺炎球菌血清型1、2、4、6A、6B、7F、8、9N、9V、10A、11A、14、15B、17F、18C、19A、19F、20、22F、23F、33F，副伤寒沙门菌甲型和副伤寒沙门菌乙型中的任意一种。5.如权利要求1～4任一所述的细菌多糖蛋白结合疫苗的制备方法，其特征在于，所述细菌多糖的琥珀酰亚胺碳酸酯与双功能链接剂反应形成细菌多糖衍生物，细菌多糖衍生物再与载体蛋白在缩合剂的作用下共价结合，形成细菌多糖蛋白结合物。6.如权利要求5所述的细菌多糖蛋白结合疫苗的制备方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈玉秋，钱雯，何建东，范荣坤，王丽丽，陈敏，王铭，陆伟，
申请(专利权)人：云南沃森生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：云南,53