一种PEG4000介导的马铃薯原生质体转化方法及其应用技术

本发明专利技术涉及细胞工程领域，具体而言，涉及一种PEG4000介导的马铃薯原生质体转化方法及其应用。该方法包括：将制备好的马铃薯原生质体与40v/v％浓度的PEG4000溶液、连接有目的基因的载体质粒混匀，在室温下黑暗处理5～7min后弃去上清并将沉淀重悬培养即得转化子。本方法操作简便，成本相对较低，转化率可达70％左右，且对原生质体伤害较小。

【技术实现步骤摘要】
一种PEG4000介导的马铃薯原生质体转化方法及其应用
本专利技术涉及细胞工程领域，具体而言，涉及一种PEG4000介导的马铃薯原生质体转化方法及其应用。
技术介绍
马铃薯(SolanumtuberosumL.)是茄科茄属的草本块茎植物，因其具有产量高、适应性强、营养丰富、粮菜兼用、综合加工用途广泛等特性，成为世界上仅次于小麦、水稻、玉米的第四大粮食作物，广泛分布于世界148个国家和地区，种植面积达2000多万hm2。我国的马铃薯栽培始于16世纪末至17世纪初，最早由欧美传教士传入我国，现我国已成为世界上第一大马铃薯生产国，据统计，2016年的栽培面积约600万hm2，产量9500多万吨，占世界总产量的24％左右。在我国，马铃薯不仅是主要的粮食作物，而且是全国的大宗蔬菜、牲畜饲料和重要加工原料。随着农业产业结构的调整和加工业的发展，尤其是在加入WTO后，马铃薯作为加工原料和出口创汇产品，日渐重要。因此，发展马铃薯生产具有重要的战略意义。常规育种手段虽然为马铃薯生产提供了不少优良品种，对提高马铃薯的产量和抗性起到了一定的积极作用，但近年来马铃薯常规育种工作遇到了难以跨越的“生物学路障”本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种PEG4000介导的马铃薯原生质体转化方法，其特征在于，包括：将制备好的马铃薯原生质体与40v/v％浓度的PEG4000溶液、连接有目的基因的载体质粒混匀，在室温下黑暗处理5～7min后弃去上清并将沉淀重悬培养即得转化子。

【技术特征摘要】
1.一种PEG4000介导的马铃薯原生质体转化方法，其特征在于，包括：将制备好的马铃薯原生质体与40v/v％浓度的PEG4000溶液、连接有目的基因的载体质粒混匀，在室温下黑暗处理5～7min后弃去上清并将沉淀重悬培养即得转化子。2.根据权利要求1所述的PEG4000介导的马铃薯原生质体转化方法，其特征在于，所述PEG4000溶液中PEG4000的浓度为40v/v％。3.根据权利要求1所述的PEG4000介导的马铃薯原生质体转化方法，其特征在于，所述在室温下黑暗处理的时间为5min～7min，优选为6min。4.根据权利要求1～3任一项所述的PEG4000介导的马铃薯原生质体转化方法，其特征在于，所述马铃薯原生质体、PEG4000溶液、载体质粒混合时的体积为100:110:10；更优选的，依次将载体质粒、马铃薯原生质体、PEG4000溶液加入到容器中进行混合。5.根据权利要求4所述的PEG4000介导的马铃薯原生质体转化方法，其特征在于，所述连...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡兴奎，韩忠奎，柳俊，谢从华，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42