一种基于InDel分子标记的枳实基原植物鉴别方法及专用引物组合技术

本发明专利技术公开了一种基于InDel分子标记的枳实基原植物鉴别方法及专用引物组合，属于中药材鉴定技术领域。针对现有技术中枳实基原混杂（酸橙、甜橙、宜昌橙）导致的药材质量不可控问题，本发明专利技术通过基因组重测序筛选出两对特异性引物：YCC‑F/R（SEQ ID NO:1‑2），用于宜昌橙特异性鉴定（扩增单条带~1000 bp）；SC‑F/R（SEQ ID NO:3‑4），用于区分酸橙（单条带~1300 bp）与甜橙（双条带~1200 bp/1300 bp），结合PCR扩增与凝胶电泳分析，可实现三大基原植物的三重精准鉴别。该方法操作简便、成本低、周期短，适用于药材大规模溯源与质量控制。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物技术及中药材鉴定领域，具体涉及用于鉴别枳实基原植物的特异性indel分子标记、检测方法及试剂盒。

技术介绍

1、《中华人民共和国药典》（2020版）规定，枳实（aurantii fructus immaturus）为芸香科植物酸橙（ citrus aurantiuml.）及其栽培变种或甜橙（ citrus sinensisosbeck）的干燥幼果。但实际上，湖北宜昌等地也采集宜昌橙（ citrus ichangensisswingle）幼果当作枳实原料售卖，造成枳实基原植物不明、药效难以掌控的现状。枳实具有破气消积、化痰散痞的药理功效，在当下消费者愈加注重健康养生的背景下，其产业发展具有广阔前景。然而，由于酸橙、甜橙及宜昌橙幼果形态学特征相似、不易区分，传统鉴别方法存在效率低、周期长及成本高等局限性。加之由于酸橙、甜橙、香橙及宜昌橙积累不同的次生代谢物质，如酸橙高积累新橙皮苷和柚皮苷，甜橙高积累橙皮苷，宜昌橙则高积累柚皮苷等物质，导致药用枳实产业化进程中原本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一组用于鉴别枳实基原植物的特异性引物对组合，其特征在于，包含：

2.一种鉴别枳实基原植物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.如权利要求2所述的鉴别枳实基原植物的方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应体系为：10μL 2×Phanta Max Buffer，0.4μL dNTP Mix，0.4μL Phanta Max Super-FidelityDNA Polymerase，0.8μL正向引物，0.8μL反向引物，1μL DNA模板，6.6μL ddH2O。

4.如权利要求2所述的鉴别枳实基原植物的方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应程序为：...

【技术特征摘要】

1.一组用于鉴别枳实基原植物的特异性引物对组合，其特征在于，包含：

2.一种鉴别枳实基原植物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

3.如权利要求2所述的鉴别枳实基原植物的方法，其特征在于，所述pcr扩增的反应体系为：10μl 2×phanta max buffer，0.4μl dntp mix，0.4μl phanta max super-fidelitydna polymerase，0.8μl正向引物，0.8μl反向引物，1μl dna模板，6.6μl ddh2o。

4.如权利要求2所述的鉴别枳实基原植物的方法，其特征在于，所述pcr扩增的反应程序为：95℃预变性5mi...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐娟，吴东轩，余红星，陈嘉景，尹守铮，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：