The present invention provides ATP nucleic acid aptamers and methods and kits for detecting ATP with gold nanoparticles. The ATP aptamer has such as SEQ ID NO:1 the base sequence. The present invention provides a method for detection of ATP using nano gold color, the method comprises the following steps: (1) the ATP containing the test solution and the ATP containing nucleic acid aptamer detection solution; (2) the step (1) obtained mixed liquid and nano gold solution, then add salt solution and mixing; (3) testing or observation steps (2) mixed solution obtained. With the method of the invention, the ATP is determined without any chemical modification, no complicated reaction process, no expensive instrument, and even can be observed by naked eyes. The operation is simple and the cost is low. The method has the advantages of short detection time, convenient operation, high sensitivity and good specificity.
【技术实现步骤摘要】
ATP核酸适配体、利用纳米金显色检测ATP的方法及试剂盒
本专利技术涉及生物检测
,更具体地,涉及ATP核酸适配体、利用纳米金显色检测ATP的方法及试剂盒。
技术介绍
ATP作为所有生物体生存和繁殖的细胞合成中必不可少的普遍能量来源,在机体代谢过程中扮演着非常重要的角色。研究表明ATP可以作为细胞存活率和细胞损伤的指示剂。ATP在细胞中的异常浓度和许多疾病,比如肿瘤,心血管疾病,帕金森综合征等有着密切的联系。因此,对ATP快速准确的检测在临床应用上有着重大的意义。目前已有的ATP的检测方法主要包括HPLC法、荧光素/荧光素酶法以及电泳法。这些方法的灵敏度和特异性都很好,但是需要昂贵的仪器和繁琐的操作步骤,并且耗时耗力。核酸适配体(Aptamer)是一段DNA,RNA或者是XNA序列。通常是利用体外筛选技术-指数富集的配体系统进化技术(Systematicevolutionofligandsbyexponentialenrichment,SELEX),从核酸分子文库中得到的寡核苷酸片段。核酸适配体能与多种目标物质高特异性、高选择性地结合,因此被广泛应用于生物传 ...
【技术保护点】
一种ATP核酸适配体,其特征在于,该ATP核酸适配体具有如SEQ ID NO:1所示的碱基序列:5’‑ACCTTCCTGGGGGAGTATTGCGGAGGAAGGT‑3’(SEQ ID NO:1)。
【技术特征摘要】
1.一种ATP核酸适配体,其特征在于,该ATP核酸适配体具有如SEQIDNO:1所示的碱基序列:5’-ACCTTCCTGGGGGAGTATTGCGGAGGAAGGT-3’(SEQIDNO:1)。2.一种利用纳米金显色检测ATP的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:(1)使含有ATP的待测溶液与含有如权利要求1所述的ATP核酸适配体的检测溶液混合;(2)将步骤(1)得到的混合液与纳米金溶液混合,然后加入盐溶液并混匀;(3)仪器检测或观测步骤(2)得到的混合溶液。3.根据权利要求1所述的方法,其中,步骤(1)中,含有ATP的待测溶液中的ATP与含有ATP核酸适配体的检测溶液中的ATP核酸适配体的摩尔比为1:1-1000。4.根据权利要求1所述的方法,其中,步骤(1)中,含有ATP核酸适配体的检测溶液中ATP核酸适配体的浓度为0.1μM-10μM,含有ATP适配子的检测溶液优选为Tris-HCl缓冲液。5.根据权利要求1所述的方法,其中,步骤(2)中,步骤(...
【专利技术属性】
技术研发人员:张晶珠,樊婷婷,毛瑜,李露露,
申请(专利权)人:深圳市坤健创新药物研究院,
类型:发明
国别省市:广东,44
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