一种L-丝氨酸的核酸适配体及其用途制造技术

本发明专利技术属于检测技术领域，具体涉及一种L‑丝氨酸的核酸适配体及其用途。本发明专利技术公开了一种L‑丝氨酸的核酸适配体，其为(a)包含选自SEQ ID NO：5的核苷酸序列的核酸适配体；(b)包含选自SEQ ID NO：5的核苷酸序列的核酸适配体，其中一个或数个核苷酸被替换、缺失、插入或添加；或(c)选自下列的缀合物：上述适配体(a)的多缀合物、上述适配体(b)的多缀合物、以及上述适配体(a)和(b)的多缀合物，其中a或b的核苷酸序列中胸腺嘧啶可替换为尿嘧啶。本发明专利技术的核酸适配体或复合物可用作诸如诊断试剂的试剂，用于诊断L‑丝氨酸相关的疾病。本发明专利技术的核酸适配体或复合物还可用于纯化和浓缩L‑丝氨酸、标记L‑丝氨酸，以及检测和定量L‑丝氨酸。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术属于检测
，具体涉及一种L?丝氨酸的核酸适配体及其用途。本专利技术公开了一种L?丝氨酸的核酸适配体，其为(a)包含选自SEQ ID NO：5的核苷酸序列的核酸适配体；(b)包含选自SEQ ID NO：5的核苷酸序列的核酸适配体，其中一个或数个核苷酸被替换、缺失、插入或添加；或(c)选自下列的缀合物：上述适配体(a)的多缀合物、上述适配体(b)的多缀合物、以及上述适配体(a)和(b)的多缀合物，其中a或b的核苷酸序列中胸腺嘧啶可替换为尿嘧啶。本专利技术的核酸适配体或复合物可用作诸如诊断试剂的试剂，用于诊断L?丝氨酸相关的疾病。本专利技术的核酸适配体或复合物还可用于纯化和浓缩L?丝氨酸、标记L?丝氨酸，以及检测和定量L?丝氨酸。【专利说明】一种L-丝氨酸的核酸适配体及其用途
本专利技术属于检测
，具体涉及一种L-丝氨酸的核酸适配体及其用途。
技术介绍
L-丝氨酸是人体非必须氨基酸，主要来自体内自身合成或外源摄入。多种研究表 明，在发生胃癌时，患者的肿瘤组织、血液中L-丝氨酸的含量显著升高。而中国专利申请 CN201310556941.9公开了，胃癌患者尿液中L-丝氨酸含量显著高于健康对照。这些都表明， L-丝氨酸有望作为胃癌尿液中的肿瘤标志物加以检测。 由于L-丝氨酸检测常用仪器如GC-MS、LC-MS、匪R共振等属于分析化学的大型仪 器，难以应用于临床实践中。因此，急需一种临床简便易行的L-丝氨酸检测方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种L-丝氨酸核酸适配体及其用途，以便于检测。 -种L-丝氨酸核酸适配体，其为 (a)包含选自SEQ ID N0:5的核苷酸序列的核酸适配体； (b)包含选自SEQ ID N0:5的核苷酸序列的核酸适配体，其中一个或数个核苷酸被 替换、缺失、插入或添加;或 (c)选自下列的缀合物:上述核酸适配体(a)的多缀合物、上述核酸适配体(b)的多 缀合物、以及上述核酸适配体(a)和(b)的多缀合物； 其中a或b的核苷酸序列中胸腺嘧啶可替换为尿嘧啶。 进一步地，所述a或b或c的核苷酸序列中各啼啶核苷酸的核糖的2'位是相同的或 不同的，并且是氟原子或被选自氢原子、羟基和甲氧基的原子或基团取代，和各嘌呤核苷酸 的核糖的2'位是相同的或不同的，并且是羟基或被选自氢原子、甲氧基和氟原子的原子或 基团取代。 进一步地，所述a或b或c中任一项描述的核酸适配体，其中所述核酸适配体中包含 的核苷酸是被修饰的。 另一方面，本专利技术还公开了包含a或b或c中任一项描述的核酸适配体和功能性物 质的复合物； 进一步地，所述复合物，其中所述功能性物质是亲和性物质、标记物、酶、药物递送 介质或药物； 另一方面，本专利技术还公开了包含a或b或c中任一项描述的核酸适配体或者所述复 合物的诊断试剂； 另一方面，本专利技术还公开了包含a或b或c中任一项描述的核酸适配体或者所述复 合物的L-丝氨酸检测探针； 另一方面，本专利技术还公开了包含a或b或c中任一项描述的核酸适配体或者所述的 复合物的用于纯化L-丝氨酸的固相载体； 另一方面，本专利技术还公开了检测L-丝氨酸的方法，该方法包括a或b或c中任一项描 述的核酸适配体或者所述的复合物;和 纯化L-丝氨酸的方法，该方法包括使用a或b或c中任一项描述的核酸适配体或者 所述的复合物。 本专利技术的核酸适配体或复合物可用作诸如诊断试剂的试剂，如诊断L-丝氨酸相关 的疾病。本专利技术的核酸适配体或复合物还可用于纯化和浓缩L-丝氨酸、标记L-丝氨酸，以及 检测和定量L-丝氨酸。【附图说明】 图1. L-丝氨酸和超顺磁性聚多巴胺磁珠偶联模式图。图2.偶联L-丝氨酸的超顺磁性聚多巴胺磁珠的扫描电镜图。图3.核酸适配体二级结构预测图。图4.亲和实验测定核酸适配体和L-丝氨酸磁珠亲和力。柱子高度代表结合在L-丝 氨酸磁珠上的核酸适配体摩尔数。图5.核酸核酸适配体apt-4亲和洗脱试验。横坐标为用于洗脱apt-4-L-丝氨酸复 合物的溶液，纵坐标为洗脱下来的apt-4摩尔数，其中1:L-丝氨酸、2:D-丝氨酸、3:L-丙氨 酸、4:甘氨酸、5: L-脯氨酸、6: L-苏氨酸、7: L-酪氨酸、8: L-异亮氨酸、9: L-甲硫氨酸、10: L-缬氨酸、11: L-色氨酸、12:对羟基苯甲酸、13:马尿酸、15:乙酰丙酸，此外14: BSA、15:空白对 照。【具体实施方式】核酸适配体是指具有对于特定靶分子的结合亲和性的核酸分子。核酸适配体还可 以通过与特定靶分子结合而抑制特定靶分子的活性。本专利技术的核酸适配体可以是RNA、DNA、 修饰的核酸或它们的混合物。本专利技术的核酸适配体还可以是直链状或环状的形态。本专利技术的核酸适配体优选为L-丝氨酸结合的核酸适配体，其序列SEQ ID N0:l、2 或5,并且具有使用MF0LD程序或RNA structure5.6软件所预测的相同的二级结构(见图3)。 本专利技术的核酸适配体的长度没有特别限制，通常可以是大约10至大约200个核苷 酸，可以是例如，不超过大约1〇〇个核苷酸，优选不超过大约50个核苷酸，更优选不超过大约 40个核苷酸，最优选不超过大约35个核苷酸。当核苷酸的总数目较小时，化学合成和大量生 产将较容易，就成本而言具有较大的优势。还考虑到化学修饰容易。 本专利技术的核酸适配体中包含的各核苷酸是相同的或不同的，并且可以是在核糖 (例如嘧啶核苷酸的核糖，嘌呤核苷酸的核糖）的2 '位包含羟基的核苷酸（即，非取代的核苷 酸），或者，通过任意原子或基团在核糖的2'位进行取代(修饰）的核苷酸(在本专利技术中有时 称作"取代的核苷酸"或"修饰的核苷酸"）。 任意此类原子或基团的实例，可以提及被氢原子、氟原子或者-0-烷基(例如-0-甲 基）、-〇-酰基(例如-0-CH0基团）、氨基(例如-NH2基团）取代的核苷酸。本专利技术的核酸适配体 还可以是修饰的核苷酸，其中至少一种（例如1、2、3或4种）核苷酸包括在核糖的2 '位的羟 基，或上述的任意原子或基团，例如，选自氢原子、氟原子、羟基和-〇-甲基的至少两种（例 如，2、3或4种)基团。 在本专利技术的核酸适配体中，所有的嘧啶核苷酸是相同的或不同的，每个可以是在 核糖的2'位被氟原子取代的核苷酸，或在核糖的2'位被上述任意原子或基团（优选选自氢 原子、羟基和甲氧基的原子或基团）取代的核苷酸。 在本专利技术的核酸适配体中，所有的嘌呤核苷酸是相同的或不同的，每个可以是在 核糖的2'位被羟基取代的核苷酸，或者在核糖的2'位被上述任意原子或基团（优选选自氢 原子、甲氧基和氟原子的原子或基团）取代的核苷酸。 本专利技术的核酸适配体还可以是这样的核酸适配体，其中所有的核苷酸在核糖的2' 位都包含羟基，或上述任意原子或基团，例如，选自氢原子、氟原子、羟基和-〇-甲基的相同 基团。本专利技术的核酸适配体还可以具有"能够特异性结合L-丝氨酸"的特征。本专利技术的核酸适配体还可以是： (a)包含选自SEQ ID N0:1、2或5的核苷酸序列(条件是胸腺嘧啶可以是尿嘧啶）的 核酸适配体； (b)包含选自SEQ ID N0:1、2或5的核苷酸序列(条件是胸腺嘧啶可以是尿嘧啶）的 核酸适配体，其中一个或数个核苷酸被替换、缺失、插入或添加;或 (c)选自下列的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种L‑丝氨酸核酸适配体，其为下列之一(a)包含选自SEQ ID NO：5的核苷酸序列的适配体；(b)包含选自SEQ ID NO：5的核苷酸序列的适配体，其中一个或数个核苷酸被替换、缺失、插入或添加；或(c)选自下列的缀合物：上述适配体(a)的多缀合物、上述适配体(b)的多缀合物、以及上述适配体(a)和(b)的多缀合物其中a或b的核苷酸序列中胸腺嘧啶可替换为尿嘧啶。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张汇若，韩飞，
申请(专利权)人：上海敬元投资有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31