灵芝提取物和灵芝三萜单体在治疗常染色体显性遗传多囊肾病中的应用制造技术

本发明专利技术公开了灵芝提取物和灵芝三萜单体在治疗常染色体显性遗传多囊肾病中的应用。本发明专利技术公开的灵芝提取物按照灵芝提取物的制备方法制备，该方法包括：利用乙醇水溶液回流提取灵芝子实体，得到乙醇提取物；利用乙酸乙酯对乙醇提取物进行萃取，收集乙酸乙酯相得到乙酸乙酯提取物；利用碳酸氢钠水溶液对乙酸乙酯提取物进行萃取，收集水相得到碳酸氢钠提取物；利用乙酸乙酯对碳酸氢钠提取物进行萃取，收集乙酸乙酯相得到灵芝提取物；灵芝三萜单体为灵芝酸C

Application of Ganoderma lucidum extract and Ganoderma lucidum three terpene monomer in the treatment of autosomal dominant polycystic kidney disease

The present invention discloses the application of Ganoderma lucidum extract and Ganoderma lucidum three terpene monomer in the treatment of autosomal dominant polycystic kidney disease. The invention discloses a Ganoderma lucidum extract of Ganoderma lucidum extract according to the preparation method, the method includes: extracting ganoderma lucidum using ethanol solution, obtained ethanol extract; extracts of ethanol extraction by ethyl acetate, ethyl acetate by collecting ethyl acetate extract; extraction of ethyl acetate extract with sodium bicarbonate solution, collecting the aqueous phase to form sodium bicarbonate extract; extraction of sodium bicarbonate extract by ethyl acetate, ethyl acetate extract of Ganoderma lucidum collected by Ganoderma lucidum; three terpene monomers for ganoderic acid C

【技术实现步骤摘要】
灵芝提取物和灵芝三萜单体在治疗常染色体显性遗传多囊肾病中的应用
本专利技术涉及生物医学领域中，灵芝提取物和灵芝三萜单体在治疗常染色体显性遗传多囊肾病中的应用。
技术介绍
灵芝三萜(GanodermaTriterpenes，GTs)是在灵芝中发现的一类三萜类化合物，是灵芝中十分重要的化学和药效成分,具有显著的生理活性。最早在1982年，KubotaT等人首次从赤芝子实体中分离得到三萜类化合物灵芝酸A和灵芝酸B。到目前为止，从各种灵芝的子实体，孢子和菌丝中分离得到的三萜类化合物超过300多种，属灵芝的二级代谢产物，分子量范围在400-600kDa，绝大多数均分离自赤芝。临床用药主要是赤芝、松杉灵芝和紫芝。灵芝中的三萜类化合物多为四环三萜和五环三萜，是一类高度氧化的羊毛甾烷类衍生物，具有共同的羊毛甾烷(Lanostane)骨架(化学结构式如图1)，被归类为羊毛甾烷类三萜。根据侧链和官能团的不同，又可将灵芝三萜的基本骨架分类为灵芝酸(Ganodericacid)、灵芝内酯(Ganolactone)、灵芝醇(Ganoderiol)和赤芝酸(Lucidericacid)等，灵芝酸为灵芝三萜类化合物中的主要活性成分。灵芝三萜类化合物大多具有一定的生理活性，《本草纲目》中记载：灵芝味苦、平、无毒、益心气、活血、入心充血、助心充脉、安神、益肺血、补肝气、补中、增智慧、好颜色、利关节、坚筋骨、祛痰、健胃。灵芝三萜对多种生物活性具有调节作用，和其他的天然产物相似，在使用过程中并不能完全避免其副作用。目前为止，灵芝的各种衍生物，作为保健药在市场上非常常见，各种剂型也层出不穷，孢子粉胶囊，冰冻干粉，汤剂，糖浆，药片等。为了确定灵芝衍生物各种剂型的毒性剂量，科研工作者进行了大量的体内和体外实验，结果发现随着摄入剂量不同，药物的作用呈剂量依赖的效应，其毒性也呈剂量依赖效应。常染色体显性遗传多囊肾病(autosomaldominantpolycystickidneydisease,ADPKD)是一种常见的单基因遗传性疾病，发病率约为1/1000-1/400，居遗传性肾病的第一位。ADPKD以双侧肾脏多发性进行性的充液囊泡为主要特征，囊泡上皮细胞过度增殖，囊液异常分泌，伴有间质纤维化。逐渐增大的充液囊泡不断挤压周围正常的肾组织，导致正常的肾脏结构的破坏和功能的丧失，最终发展为终末期肾衰(end-stagerenalfailure,ESRF)，ADPKD占我国终末期肾衰病因的第4位。ADPKD患者通常在中年发生显著的肾功能进行性衰退，肾小球滤过率逐年下降。约50％的ADPKD患者在60岁时进入终末期肾衰。目前对于ADPKD的治疗缺乏特异性的药物，终末期肾衰患者主要依靠透析或肾移植来维持生命，给社会和家庭带来了巨大的负担，因此，筛选ADPKD特异性的治疗药物是一个亟待解决的问题。关于ADPKD的发病机制，分子生物学的研究发现，与PKD发病相关的两个基因分别为Pkd1(polycystickidneydisease1)基因和Pkd2(polycystickidneydisease2)基因。Pkd1和/或Pkd2的突变，可以通过影响细胞内多条信号通路，导致细胞增殖水平升高，分化程度降低，囊泡产生，囊液异常分泌等，最终导致肾脏病理学的变化。由Pkd1基因突变所导致的ADPKD约占85％-90％，而Pkd2基因突变所引起的ADPKD约占10％-15％。Pkd1基因定位于第16号染色体短臂1区3带3亚带(16p13.3)，编码多囊蛋白1，PC1(polycystin1)，主要表达于肾小管上皮细胞的初级纤毛，紧密连接、粘着连接、桥粒、粘着斑等部位。Pkd2基因定位于第4号染色体长臂2区2带到2区3带(4q22-23)，翻译产物为多囊蛋白2，PC2(polycystin2)。在ADPKD的发病过程中，由于Pkd1基因或/和Pkd2基因的突变，导致多囊蛋白复合物功能异常，细胞内Ca2+浓度降低，从而导致ACVI活性升高，cAMP产生增多；PDE活性降低，cAMP降解减少，最后导致细胞内cAMP水平升高。cAMP水平的升高会导致下游信号通路的过度激活，包括激活蛋白激酶A(PKA)，诱导下游Ras/MAPK信号通路，促进分化不成熟的囊泡上皮细胞过度增殖。PC1可以通过调节结节硬化症蛋白TSC1/TSC2复合物参与抑制mTOR信号通路，从而调节mTOR信号通路——PC1的缺失会导致mTOR信号通路异常激活，导致细胞过度增殖。在ADPKD的发病过程中，除了最终导致肾衰竭以外，又常累及多种肾外器官，包括肝脏、脾脏等的囊性变以及一些心脑血管疾病，尤其是早发性的高血压(HTN)，有超过60％的PKD患者会患有早发性高血压，因此ADPKD被认为是一种系统性疾病，而相应的心血管疾病很可能作为发生终末期肾衰的预警。但是目前关于ADPKD的治疗，除了到终末期肾衰主要依靠透析或肾移植以外，尚无有效的治疗方法。由于ADPKD疾病的复杂性，联合用药一方面保留正常的肾功能，有效的避免终末期肾衰的发生，另一方面最大程度的发挥作用减缓疾病的发展，减少副作用，是一个急需解决的问题。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是如何治疗常染色体显性遗传多囊肾病(autosomaldominantpolycystickidneydisease,ADPKD)。为解决上述技术问题，本专利技术首先提供了灵芝提取物的下述任一应用：X1、制备治疗和/或预防常染色体显性遗传多囊肾病产品；X2、治疗和/或预防常染色体显性遗传多囊肾病；X3、制备治疗和/或预防Pkd1(polycystickidneydisease1)基因和Pkd2(polycystickidneydisease2)基因引发的常染色体显性遗传多囊肾病产品；X4、治疗和/或预防Pkd1(polycystickidneydisease1)基因和Pkd2(polycystickidneydisease2)基因引发的常染色体显性遗传多囊肾病；X5、制备抑制肾脏囊泡产生和/或生长产品；X6、抑制肾脏囊泡产生和/或生长；X7、制备抑制Ras/MAPK信号通路产品；X8、抑制Ras/MAPK信号通路；X9、制备促进肾脏细胞形成小管样结构产品；X10、促进肾脏细胞形成小管样结构；X11、制备促进肾脏囊泡小管样结构的形成和/或生长产品；X12、促进肾脏囊泡小管样结构的形成和/或生长；X13、制备促进肾脏囊泡上皮细胞的分化产品；X14、促进肾脏囊泡上皮细胞的分化；所述灵芝提取物可按照灵芝提取物制备方法制备；所述灵芝提取物制备方法包括：1)利用乙醇水溶液对灵芝进行回流提取，得到乙醇提取物；2)利用乙酸乙酯对所述乙醇提取物进行萃取，收集乙酸乙酯相得到乙酸乙酯提取物；3)利用碳酸氢钠水溶液对所述乙酸乙酯提取物进行萃取，收集水相得到碳酸氢钠提取物；4)利用乙酸乙酯对所述碳酸氢钠提取物进行萃取，收集乙酸乙酯相得到所述灵芝提取物。回流提取是用易挥发的有机溶剂提取原料成分，将浸出液加热蒸馏，其中挥发性溶剂馏出后又被冷却，重复流回浸出容器中浸提原料，这样周而复始，直至有效成分回流提取完全。上述应用中，所述灵芝可为灵芝子实体。所述灵芝具体可为赤芝。上述应用中，所述乙醇水溶液中乙醇的本文档来自技高网...

【技术保护点】
灵芝提取物的下述任一应用：X1、制备治疗和/或预防常染色体显性遗传多囊肾病产品；X2、治疗和/或预防常染色体显性遗传多囊肾病；X3、制备治疗和/或预防Pkd1基因和Pkd2基因引发的常染色体显性遗传多囊肾病产品；X4、治疗和/或预防Pkd1基因和Pkd2基因引发的常染色体显性遗传多囊肾病；X5、制备抑制肾脏囊泡产生产品；X6、抑制肾脏囊泡产生；X7、制备抑制Ras/MAPK信号通路产品；X8、抑制Ras/MAPK信号通路；X9、制备促进肾脏细胞形成小管样结构产品；X10、促进肾脏细胞形成小管样结构；X11、制备促进肾脏囊泡小管样结构的形成和/或生长产品；X12、促进肾脏囊泡小管样结构的形成和/或生长；X13、制备促进肾脏囊泡上皮细胞的分化产品；X14、促进肾脏囊泡上皮细胞的分化；所述灵芝提取物按照灵芝提取物制备方法制备；所述灵芝提取物制备方法包括：1)利用乙醇水溶液对灵芝进行回流提取，得到乙醇提取物；2)利用乙酸乙酯对所述乙醇提取物进行萃取，收集乙酸乙酯相得到乙酸乙酯提取物；3)利用碳酸氢钠水溶液对所述乙酸乙酯提取物进行萃取，收集水相得到碳酸氢钠提取物；4)利用乙酸乙酯对所述碳酸氢钠提取物进行萃取，收集乙酸乙酯相得到所述灵芝提取物。...

【技术特征摘要】
1.灵芝提取物的下述任一应用：X1、制备治疗和/或预防常染色体显性遗传多囊肾病产品；X2、治疗和/或预防常染色体显性遗传多囊肾病；X3、制备治疗和/或预防Pkd1基因和Pkd2基因引发的常染色体显性遗传多囊肾病产品；X4、治疗和/或预防Pkd1基因和Pkd2基因引发的常染色体显性遗传多囊肾病；X5、制备抑制肾脏囊泡产生产品；X6、抑制肾脏囊泡产生；X7、制备抑制Ras/MAPK信号通路产品；X8、抑制Ras/MAPK信号通路；X9、制备促进肾脏细胞形成小管样结构产品；X10、促进肾脏细胞形成小管样结构；X11、制备促进肾脏囊泡小管样结构的形成和/或生长产品；X12、促进肾脏囊泡小管样结构的形成和/或生长；X13、制备促进肾脏囊泡上皮细胞的分化产品；X14、促进肾脏囊泡上皮细胞的分化；所述灵芝提取物按照灵芝提取物制备方法制备；所述灵芝提取物制备方法包括：1)利用乙醇水溶液对灵芝进行回流提取，得到乙醇提取物；2)利用乙酸乙酯对所述乙醇提取物进行萃取，收集乙酸乙酯相得到乙酸乙酯提取物；3)利用碳酸氢钠水溶液对所述乙酸乙酯提取物进行萃取，收集水相得到碳酸氢钠提取物；4)利用乙酸乙酯对所述碳酸氢钠提取物进行萃取，收集乙酸乙酯相得到所述灵芝提取物。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述灵芝为灵芝子实体。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述乙醇水溶液中乙醇的体积百分比为95％；和/或，所述碳酸氢钠水溶液为饱和碳酸氢钠水溶液。4...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨宝学，苏丽敏，周虹，陈若芸，康洁，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：北京,11