本发明专利技术提供一种金黄色葡萄球菌的快速检测方法，涉及金黄色葡萄球菌的检测技术领域。一种金黄色葡萄球菌的快速检测方法，包括以下步骤：1.培养基配制；2.无菌操作取25 g(mL)样品到均质袋中，并向其中加入225mL预热后的增菌培养基，放入均质器中均质2 min；42℃静止或者振荡培养6h，根据需要也可以延长至24h；取0.1mL上述增菌液，加入含1mL选择性培养基的5mL玻璃管内，42±1℃继续培养18‑24h；3.将培养物混合均匀，取1mL到试管中沸水（100℃）加热10min，冷却至室温，用滴管滴加3‑4滴至胶体金检测卡的样品孔，反应5‑10 min，判读结果，超过30min显色无效。本发明专利技术为金黄色葡萄球菌的快速定性检测提供了一种便捷有效地途径。
【技术实现步骤摘要】
一种金黄色葡萄球菌的快速检测方法
本专利技术涉及金黄色葡萄球菌的检测
，尤其指一种金黄色葡萄球菌的快速检测方法。
技术介绍
金黄色葡萄球菌是是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属（Staphylococcus），有“嗜肉菌"的别称，是革兰氏阳性菌的代表，可引起许多严重感染。金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。因此，食品受到污染的机会很多。美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生难题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒，占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占到45%，中国金黄色葡萄球菌引起的食物中毒事件也时有发生。准确及时的检测手段是预防和控制病原微生物传播的关键。目前金黄色葡萄球菌的检测多采用传统的微生物培养的方法，主要包括前增菌、选择性增菌、平板分离、生化试验和血清学鉴定等步骤，涉及的实验较多、操作较烦琐、检测周期较长(一般需要4～7d)、准备和收尾工作繁重，已无法满足现阶段食品中致病菌快速检测的现实需要。
技术实现思路
为了解决上述技术问题，本专利技术提供一种金黄色葡萄球菌的快速检测方法。一种金黄色葡萄球菌的快速检测方法，包括以下步骤：1.培养基配制1）增菌培养基配制：称取26.5g增菌培养基，加入预热42±1℃去离子水1L，充分溶解，备用；2）选择性培养基配制：称取7.5g选择培养基，加入预热42±1℃去离子水100mL，充分溶解，备用；2.无菌操作取25g(mL)样品到均质袋中，并向其中加入225mL预热后的增菌培养基，放入均质器中均质2min；42℃静止或者振荡培养6h，根据需要也可以延长至24h；取0.1mL上述增菌液，加入含1mL选择性培养基的5mL玻璃管内，42±1℃继续培养18-24h；3.将培养物混合均匀，取1mL到试管中沸水（100℃）加热10min，冷却至室温，用滴管滴加3-4滴至胶体金检测卡的样品孔，反应5-10min，判读结果，超过30min显色无效。进一步的，所述增菌培养基包括以下原料（按重量份数计）：酵母膏12～14g、大豆胨3～3.5g、琼脂13～16g、氯化钠17～19g、丙酮酸钠4～4.2g、甘氨酸0.8～1.1g、氯化锂0.3～0.5g、4-甲基伞型酮-β-D-葡萄糖苷5.5～6.2g、对硝基β-D-葡萄糖苷0.2～0.5g、对硝基酚-α-D-吡喃半乳糖1.2～1.5g。进一步的，所述选择培养基包括以下原料：胰蛋白胨25g；葡萄糖液200ml；芋酸5g；假细锥甲素0.5g；枸橼酸镁25g；丙酮酸钠8～12mg；亚碲酸钾0.6g；琼脂0.2g；阿波酮酸0.1g；浓度300g/L的马铃薯水煮液200～300ml；N-乙酰基-D-葡萄糖胺5mg。本专利技术的有益效果是：本专利技术提供了一种快速灵敏的检测样品中的金黄色葡萄球菌的方法，为金黄色葡萄球菌的快速定性检测提供了一种便捷有效地途径。缩短金黄色葡萄球菌检测时间，加快检测进程，缩短检测人员的劳动时间，降低劳动强度，节省水电及储存清洁等成本，提高检测效率，降低检测成本，便于现场检测，提高准确度。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步说明：实施例一一种金黄色葡萄球菌的快速检测方法，包括以下步骤：1.培养基配制1）增菌培养基配制：称取26.5g增菌培养基，加入预热42℃去离子水1L，充分溶解，备用；2）选择性培养基配制：称取7.5g选择培养基，加入预热42℃去离子水100mL，充分溶解，备用；2.无菌操作取25g(mL)样品到均质袋中，并向其中加入225mL预热后的增菌培养基，放入均质器中均质2min；42℃静止或者振荡培养6h，根据需要也可以延长至24h；取0.1mL上述增菌液，加入含1mL选择性培养基的5mL玻璃管内，42℃继续培养21h；3.将培养物混合均匀，取1mL到试管中沸水（100℃）加热10min，冷却至室温，用滴管滴加3-4滴至胶体金检测卡的样品孔，反应5-10min，判读结果，超过30min显色无效。其中，所述增菌培养基包括以下原料（按重量份数计）：酵母膏13g、大豆胨3.3g、琼脂15g、氯化钠18g、丙酮酸钠4.1g、甘氨酸1g、氯化锂0.4g、4-甲基伞型酮-β-D-葡萄糖苷6、对硝基β-D-葡萄糖苷0.3g、对硝基酚-α-D-吡喃半乳糖1.4g。其中，所述选择培养基包括以下原料（按重量份数计）：胰蛋白胨25g；葡萄糖液200ml；芋酸5g；假细锥甲素0.5g；枸橼酸镁25g；丙酮酸钠8mg；亚碲酸钾0.6g；琼脂0.2g；阿波酮酸0.1g；浓度300g/L的马铃薯水煮液200ml；N-乙酰基-D-葡萄糖胺5mg。实施例二一种金黄色葡萄球菌的快速检测方法，包括以下步骤：1.培养基配制1）增菌培养基配制：称取26.5g增菌培养基，加入预热43℃去离子水1L，充分溶解，备用；2）选择性培养基配制：称取7.5g选择培养基，加入预热43℃去离子水100mL，充分溶解，备用；2.无菌操作取25g(mL)样品到均质袋中，并向其中加入225mL预热后的增菌培养基，放入均质器中均质2min；42℃静止或者振荡培养6h，根据需要也可以延长至24h；取0.1mL上述增菌液，加入含1mL选择性培养基的5mL玻璃管内，43℃继续培养18-24h；3.将培养物混合均匀，取1mL到试管中沸水（100℃）加热10min，冷却至室温，用滴管滴加3-4滴至胶体金检测卡的样品孔，反应5-10min，判读结果，超过30min显色无效。其中，所述增菌培养基包括以下原料（按重量份数计）：酵母膏14g、大豆胨3.5g、琼脂16g、氯化钠19g、丙酮酸钠4.2g、甘氨酸1.1g、氯化锂0.5g、4-甲基伞型酮-β-D-葡萄糖苷6.2g、对硝基β-D-葡萄糖苷0.5g、对硝基酚-α-D-吡喃半乳糖1.5g。其中，所述选择培养基包括以下原料（按重量份数计）：胰蛋白胨25g；葡萄糖液200ml；芋酸5g；假细锥甲素0.5g；枸橼酸镁25g；丙酮酸钠12mg；亚碲酸钾0.6g；琼脂0.2g；阿波酮酸0.1g；浓度300g/L的马铃薯水煮液300ml；N-乙酰基-D-葡萄糖胺5mg。实施例三一种金黄色葡萄球菌的快速检测方法，包括以下步骤：1.培养基配制1）增菌培养基配制：称取26.5g增菌培养基，加入预热41℃去离子水1L，充分溶解，备用；2）选择性培养基配制：称取7.5g选择培养基，加入预热41℃去离子水100mL，充分溶解，备用；2.无菌操作取25g(mL)样品到均质袋中，并向其中加入225mL预热后的增菌培养基，放入均质器中均质2min；42℃静止或者振荡培养6h，根据需要也可以延长至24h；取0.1mL上述增菌液，加入含1mL选择性培养基的5mL玻璃管内，41℃继续培养18-24h；3.将培养物混合均匀，取1mL到试管中沸水（100℃）加热10min，冷却至室温，用滴管滴加3-4滴至胶体金检测卡的样品孔，反应5-10min，判读结果，超过30min显色无效。其中，所述增菌培养基包括以下原料（按重量份数计）：酵母膏12g、大豆胨3g、琼脂13、氯化钠17g、丙酮酸钠4g、甘氨酸0.8g、氯化锂0.3g、4-甲基伞型本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种金黄色葡萄球菌的快速检测方法，其特征在于：包括以下步骤：1.培养基配制1）增菌培养基配制：称取 26.5 g 增菌培养基，加入预热 42±1 ℃去离子水 1 L，充分溶解，备用；2）选择性培养基配制：称取 7.5 g 选择培养基，加入预热 42±1 ℃去离子水 100 mL，充分溶解，备用；2.无菌操作取 25 g(mL)样品到均质袋中，并向其中加入 225 mL 预热后的增菌培养基，放入均质器中均质 2 min；42 ℃静止或者振荡培养 6 h，根据需要也可以延长至 24 h；取 0.1 mL 上述增菌液，加入含 1 mL 选择性培养基的 5 mL 玻璃管内，42±1 ℃继续培养 18‑24 h；3.将培养物混合均匀，取 1 mL 到试管中沸水（100 ℃）加热 10 min，冷却至室温，用滴管滴加 3‑4 滴至胶体金检测卡的样品孔，反应 5‑10 min，判读结果，超过 30 min 显色无效。
【技术特征摘要】
1.一种金黄色葡萄球菌的快速检测方法，其特征在于：包括以下步骤：1.培养基配制1）增菌培养基配制：称取26.5g增菌培养基，加入预热42±1℃去离子水1L，充分溶解，备用；2）选择性培养基配制：称取7.5g选择培养基，加入预热42±1℃去离子水100mL，充分溶解，备用；2.无菌操作取25g(mL)样品到均质袋中，并向其中加入225mL预热后的增菌培养基，放入均质器中均质2min；42℃静止或者振荡培养6h，根据需要也可以延长至24h；取0.1mL上述增菌液，加入含1mL选择性培养基的5mL玻璃管内，42±1℃继续培养18-24h；3.将培养物混合均匀，取1mL到试管中沸水（100℃）加热10min，冷却至室温，用滴管滴加3-4滴至胶体金检测卡的样品孔，反应5-10min，判读结果，超过30m...
【专利技术属性】
技术研发人员：李东亮，黄二辉，张广雷，
申请(专利权)人：河南艾能生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41
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