一种重组嗜碱芽孢杆菌及其制备方法和应用以及制备D-乳酸的方法技术
Recombinant basophil bacillus, preparation method and application thereof, and method for preparing D- lactic acid
The invention discloses a method for preparing a recombinant Bacillus alcalophilus. The method includes: to produce L- lactic acid bacillus alcalophilus as starting strain, through genetic engineering, the strain in the expression of L- and D- expression of lactate dehydrogenase ldh. The invention also discloses recombinant Bacillus subtilis prepared by the method and its application, and a method for preparing D- lactic acid. Prepared by the preparation method provided by the invention of the recombinant Bacillus alcalophilus of recombinant Bacillus alcalophilus for preparation of D- lactic acid, D- lactic acid obtained by optical purity higher than 99.8%, the conversion rate is above 94%, the yield can be up to 142 g / l..
【技术实现步骤摘要】
一种重组嗜碱芽孢杆菌及其制备方法和应用以及制备D-乳酸的方法
本专利技术属于基因工程领域，具体地，涉及一种重组嗜碱芽孢杆菌的制备方法，和由该方法制备得到重组嗜碱芽孢杆菌及其应用，以及一种制备D-乳酸的方法。
技术介绍
乳酸(Lacticacid)又名二羟基丙酸，是世界三大有机酸之一，可作为酸味剂、芳香剂、防腐剂、植物生长调节剂、生物可降解性材料、药物和农药等，应用于食品、制药、酿造、制革、纺织、环保和农业中。乳酸是一种手性分子，可分为L-乳酸和D-乳酸。D-乳酸作为一种重要的手性化合物，被用作医药、高效低毒农药、除草剂和其它手性化合物合成的中间体以及聚乳酸合成的原料。例如，德国Hoeehst公司开发了以D-乳酸为原料的新型高效除草剂威霸(WhipSuper)，德国BASF公司以D-乳酸异丙酯为原料生产除草剂Duplosan，并已大规模投放市场。D-乳酸的重要应用价值使得人们不断探索以高产量、高底物转化率和高生产强度生产高光学纯度D-乳酸的技术方法。目前国际上的D-乳酸生产主要采用微生物发酵法，其生产成本低、产品安全性高，而且能专一性的得到光学纯度高的D-乳酸。微生...
【技术保护点】
一种重组嗜碱芽孢杆菌的制备方法，其特征在于，该制备方法包括：以生产L‑乳酸的嗜碱芽孢杆菌为出发菌株，通过遗传工程操作，使该出发菌株不表达L‑乳酸脱氢酶而表达D‑乳酸脱氢酶。
【技术特征摘要】
1.一种重组嗜碱芽孢杆菌的制备方法，其特征在于，该制备方法包括：以生产L-乳酸的嗜碱芽孢杆菌为出发菌株，通过遗传工程操作，使该出发菌株不表达L-乳酸脱氢酶而表达D-乳酸脱氢酶。2.根据权利要求1所述的制备方法，其中，使出发菌株不表达L-乳酸脱氢酶的方式为：突变或敲除出发菌株中的L-乳酸脱氢酶编码基因，所述出发菌株优选为保藏编号为CGMCCNO.0369的嗜碱芽孢杆菌。3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其中，使D-乳酸脱氢酶表达的方式为：将含有D-乳酸脱氢酶编码基因的表达载体导入不表达L-乳酸脱氢酶的嗜碱芽孢杆菌中。4.一种由权利要求1-3中任意一项所述的制备方法制备得到的重组嗜碱芽孢杆菌。5.根据权利要求4所述的重组嗜碱芽孢杆菌，其中，所述重组嗜碱芽孢杆菌的保藏编号为CGMCCNo.11581。6.权利要求4或5所述的重组嗜碱芽孢杆菌在制备D-乳酸中的应用。7.一种制备D-乳酸的方法，其特征在于，该方法包括将权利要求4或5所述的重组嗜碱芽孢杆菌接种至发酵培养基中进行发酵，获得含有D-乳酸的发酵液。8.根据权利要求7所述的方法，其中...
【专利技术属性】
技术研发人员：薛燕芬，马化君，葛德永，于波，马延和，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11
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